高效液相色谱法评价海洋生物中半胱亚磺酸脱羧酶活性

高效液相色谱法评价海洋生物中半胱亚磺酸脱羧酶活性

论文摘要

[目的]建立磺基丙氨酸(CA)的高效液相色谱分析法,并以CA为底物,评价不同海洋生物组织中半胱亚磺酸脱羧酶(CSD)的活性。[方法]以Agilent Eclipse XDB-C18为色谱柱,采用邻苯二甲醛(OPA)进行柱前衍生,检测波长为315 nm,对衍生化过程及色谱条件进行了优化。[结果]当CA∶OPA(物质的摩尔比)=1∶2、衍生时间2 min、流动相甲醇∶乙酸钠=65∶35(V/V)、流速1 m L/min时,CA具有最优的检测效果。在该条件下,CA浓度在10~500μg/m L具有良好的线性关系(R2>0.99),平行样品的相对标准偏差为0.9%~8.6%,保留时间为1.4~1.5 min。不同海洋生物组织中CSD活性检测结果显示,在所选择的海洋贝类、头足类、鱼类中,贻贝、疣荔枝螺和大黄鱼均未检测到CSD活性;蛏子、血蛤、芝麻螺和鱿鱼中CSD活性较低。不同组织比较,海鲈鱼肝脏中CSD活性最高,达21.8 U/mg,而肉和鳃中则未检测到CSD活性。[结论]不同海洋生物体内牛磺酸的合成途径不尽相同。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 试验材料
  •     1.1.1 试材。
  •     1.1.2 药品与试剂。
  •     1.1.3 仪器与设备。
  •   1.2 试验方法
  •     1.2.1 溶液的配制。
  •     1.2.2 CA高效液相检测。
  •     1.2.3 CA标准曲线绘制。
  •     1.2.4 精密度试验。
  •     1.2.5 样品中CSD活性检测。
  •     1.2.6 粗酶液的蛋白浓度测定。
  • 2 结果与分析
  •   2.1 流动相比例选择
  •   2.2 流动相流速优化
  •   2.3 衍生剂用量选择
  •   2.4 衍生化时间优化
  •   2.5 CA色谱图与标准曲线
  •   2.6 精密度试验
  •   2.7 海洋生物样品中CSD活性的评价
  • 3 结论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 张千伟,徐红萍,毛丽沙,金火喜

    关键词: 海洋生物,半胱亚磺酸脱羧酶,磺基丙氨酸,高效液相色谱

    来源: 安徽农业科学 2019年01期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学,工程科技Ⅰ辑

    专业: 生物学,化学

    单位: 浙江海洋大学食品与医药学院

    基金: 舟山市科技局浙江海洋大学专项(2016C41002),国家自然科学基金面上项目(21476212)

    分类号: Q176;O657.72

    页码: 212-215

    总页数: 4

    文件大小: 445K

    下载量: 74

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