导读:本文包含了磷丙糖转移酶论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:血吸虫,日本,基因,磷酸,文库,免疫学,作用。
磷丙糖转移酶论文文献综述
陈多玲,张婧,姚涌,汪学龙[1]（2012）在《重组日本血吸虫磷酸丙糖转移酶免疫保护性的研究》一文中研究指出目的观察重组日本血吸虫磷酸丙糖转移酶(rSj-TPM)在小鼠抗血吸虫感染中的免疫保护作用,寻找新的血吸虫疫苗候选分子。方法以rSj-TPM每鼠50μg/100μl、100μg/100μl和200μg/100μl分别免疫BALB/c小鼠,同时设生理盐水对照组,尾蚴攻击模型小鼠,计算减虫率、减卵率,观察它们的抗血吸虫感染作用;病例切片观察肝脏组织中肉芽肿的变化。结果用重组Sj-TPM免疫BALB/c小鼠,1、2及3组诱导的减虫率分别为27.1%、32.1%和35.2%;1、2及3组诱导的肝组织减卵率分别为34.2%、39.29%和43.66%,各实验组与对照组比较,经t检验差别有显着意义(P<0.05);各实验组间两两比较,经X~2检验差别无显着意义(P>0.05)。病理可见重组Sj-TPM组小鼠肝脏表面较光滑,质地较软,色泽略带暗红色,隐约可见少量灰白色小点,虫卵结节较少;生理盐水组小鼠肝组织中可见大量的虫卵肉芽肿形成,肉芽肿体积较大,周围有大量炎细胞浸润,较多的肝细胞变性坏死。结论日本血吸虫磷酸丙糖转移酶可能是一种潜在的血吸虫病疫苗候选分子。(本文来源于《热带病与寄生虫学》期刊2012年04期）
童畅,沈际佳,蒋作君,汪学龙[2]（2002）在《血吸虫磷酸丙糖转移酶基因的克隆及表达》一文中研究指出目的 对血吸虫磷酸丙糖转移酶基因进行克隆及原核表达 ,以寻找新的预防日本血吸虫感染的疫苗候选分子。方法 用血吸虫病人阳性混合血清经大肠杆菌预吸收后对日本血吸虫童虫cDNA文库进行免疫学筛选 ,所获阳性克隆测序后 ,送GenBankBLAST进行蛋白质序列同源性比较 ,证实与其它物种的磷酸丙糖转移酶有很高的同源性。将其克隆入 pGEM-T载体质粒 ,再定向亚克隆入pBK -CMV表达质粒载体上经IPTG诱导表达后 ,用SDS -PAGE和Western -blot分析和鉴定表达产物。结果 用PCR和EcoRⅠ、XhoⅠ双酶切鉴定均证实TPM基因的重组成功 ,表达产物为 32kD的融合蛋白 ,表达产物可被免疫阳性血清识别。结论 首次成功构建编码日本血吸虫磷酸丙糖转移酶基因表达载体克隆 ,为进一步研究其作为疫苗分子的可能性奠定基础(本文来源于《中国人兽共患病杂志》期刊2002年05期）
童畅[3]（2002）在《日本血吸虫肝期童虫cDNA文库的构建及其磷酸丙糖转移酶基因的表达、鉴定》一文中研究指出血吸虫病是严重危害人类健康的寄生虫病之一。我国经过多年的灭螺．化疗。血吸虫病的防治取得了实质性进展。但是，普通方法的缺点，如化疗的肝肾脏损伤的负作用。由于反复感染而多次用药等又突显出来。研究防治血吸虫病的疫苗变得迫切起来。随着分子生物学及其相关技术的发展，研制分子疫苗变得切实可行。分子疫苗较普通疫苗有许多优点，如易大量生产，易于保存和使用、纯度高、毒副作用少等。但目前所出现的疫苗分子所诱导保护力均不够理想。原因可能是当前的疫苗候选分子绝大多数是血吸虫成虫来源的，这时血吸虫已发育成熟，其对人体免疫系统的攻击的抵抗力较童虫强，而且血吸虫若发育至成虫阶段时其生殖系统已可以产卵而导致以肝硬化为主的对人体的损害，童虫期的血吸虫正处于发育分化阶段，易受到免疫攻击，如果有针对童虫期的疫苗分子，能影响童虫的生长发育，导致童虫的死亡或影响其产卵，将针对童虫期的疫苗分子和当前已证明有效的成虫来源的疫苗分子联合应用，有可能取得较好效果。因此，寻找抗日本血吸虫童虫的疫苗分子很有必要。为寻找有效的疫苗候选分子和早期的诊断日本血吸虫病的试剂，我们用日本血吸虫阳性钉螺逸出尾蚴，人工感染家兔，感染15天后剖杀家兔，门静脉灌注法收集肝期章虫约100mg，酚氯仿法提取童虫总RNA约30mg，以PolyT为引物，在MMLV RnaseH-反转录酶的作用下，逆转录合成cDNA，再利用MMLV酶的末端转移酶特性PCR合成cDNA双链。引物中含有sfi A，B酶切位点。经过纯化、酶切、过柱片段大小分离后，与λTrip1Ex2噬菌体载体两臂连接包装后形成日本血吸虫童虫的cDNA文库。初始文库的容量为3． 6×106，重组子经感染XL-Blue菌后扩增后文库的滴度达1010pfu／ml。任意挑取克隆经自身环化后提取质 安徽医科大学硕士学位论文粒，酶切后片段大小范围为400－1200hP，以急性血吸虫病人阳性混合血清筛选此文库，共获得20个阳性克隆，阳性克隆经过测序和同源性序列比较，发现是其中之一是血吸虫磷酸丙糖转移酶的基因，将其亚克隆入真核表达载体pBK｛MV中，IPTG诱导表达后SDS－PAGE分析，所表达的蛋白质为32kDa，用阳性病人血清经预吸收后作Western－blot反应呈阳性。本试验成功地构建了日本血吸虫肝期童虫CDNA文库，所获血吸虫磷酸丙糖转移酶基因有望作为疫苗候选分子和早期诊断试剂，有值得进一步深入研究的价值。(本文来源于《安徽医科大学》期刊2002-04-20）
童畅,汪学龙,沈际佳[4]（2002）在《PCR法筛选日本血吸虫cDNA文库中磷酸丙糖转移酶基因》一文中研究指出目的 用PCR法自日本血吸虫童虫cDNA文库筛选磷酸丙糖转移酶 (TPM )基因 ,为进一步亚克隆和表达奠定基础。方法 根据GeneBank中的日本血吸虫TPM基因开放阅读框设计合成一对引物 ,应用PCR测定cDNA文库中该基因的频率。根据测得的频率 ,将适量的噬菌体接种于96孔细胞培养板上进行细菌培养扩增。再利用PCR鉴定阳性克隆所在位置 ,经过选择性扩增 ,筛选出阳性克隆 ,并环化成质粒 ,经测序验证后构建pGEM T/TPM克隆载体。结果 经过 3轮筛选 ,所得阳性克隆经过测序 ,用GenebankBLAST进行序列比较 ,证实为日本血吸虫磷酸丙糖转移酶基因。重组质粒 pGEM T经双酶切证实有约 76 0bp的插入片段。结论 从日本血吸虫cDNA文库中筛选出TPM基因 ,并成功地构建该基因的克隆载体 ,为研究该基因在血吸虫糖代谢中的作用创造了条件(本文来源于《安徽医科大学学报》期刊2002年01期）
磷丙糖转移酶论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的 对血吸虫磷酸丙糖转移酶基因进行克隆及原核表达 ,以寻找新的预防日本血吸虫感染的疫苗候选分子。方法 用血吸虫病人阳性混合血清经大肠杆菌预吸收后对日本血吸虫童虫cDNA文库进行免疫学筛选 ,所获阳性克隆测序后 ,送GenBankBLAST进行蛋白质序列同源性比较 ,证实与其它物种的磷酸丙糖转移酶有很高的同源性。将其克隆入 pGEM-T载体质粒 ,再定向亚克隆入pBK -CMV表达质粒载体上经IPTG诱导表达后 ,用SDS -PAGE和Western -blot分析和鉴定表达产物。结果 用PCR和EcoRⅠ、XhoⅠ双酶切鉴定均证实TPM基因的重组成功 ,表达产物为 32kD的融合蛋白 ,表达产物可被免疫阳性血清识别。结论 首次成功构建编码日本血吸虫磷酸丙糖转移酶基因表达载体克隆 ,为进一步研究其作为疫苗分子的可能性奠定基础
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
磷丙糖转移酶论文参考文献
[1].陈多玲,张婧,姚涌,汪学龙.重组日本血吸虫磷酸丙糖转移酶免疫保护性的研究[J].热带病与寄生虫学.2012
[2].童畅,沈际佳,蒋作君,汪学龙.血吸虫磷酸丙糖转移酶基因的克隆及表达[J].中国人兽共患病杂志.2002
[3].童畅.日本血吸虫肝期童虫cDNA文库的构建及其磷酸丙糖转移酶基因的表达、鉴定[D].安徽医科大学.2002
[4].童畅,汪学龙,沈际佳.PCR法筛选日本血吸虫cDNA文库中磷酸丙糖转移酶基因[J].安徽医科大学学报.2002
论文知识图
