论文摘要
旨在建立一种口蹄疫灭活病毒疫苗的处理方法,去除尺寸排阻色谱法(HPSEC)检测146S抗原过程中的杂质干扰,获得最佳的检测信号并实现146S抗原含量的准确测定。分别考察了超速离心法、PEG沉淀法、核酸酶消化法对两批疫苗样品中的HPSEC检测干扰杂质的去除效果。在优化条件下,超速离心法处理后146S检测结果分别为7.1、7.6μg/mL,PEG沉淀法为9.7、10.4μg/mL;酶消化法处理后的检测值最高,分别为10.5、10.4μg/mL,且杂质去除完全、处理速度快、操作条件温和。通过响应面法确定最优酶消化处理条件如下:200μL水相中添加终浓度421 U/mL的Benzonase,25.1℃下反应1.29 h。在该最优条件下,对4家企业各3种不同血清型共12批疫苗样品进行146S含量检测,结果表明建立的方法对不同疫苗均有良好适用性,且重复性好(RSD<5.3%,n=3)。通过该处理方法,解决了杂质对146S定量检测的干扰,扩大了HPSEC检测技术的应用范围,进一步确保了检测结果的准确可靠。
论文目录
文章来源
类型: 期刊论文
作者: 宋艳民,杨延丽,苏志国,刘丽丽,朱元源,徐嫄,邹兴启,赵启祖,张松平
关键词: 尺寸排阻色谱,口蹄疫疫苗,定量,酶消化
来源: 生物工程学报 2019年08期
年度: 2019
分类: 基础科学,农业科技
专业: 生物学,畜牧与动物医学
单位: 中国科学院过程工程研究所生化工程国家重点实验室,中国科学院大学化学工程学院,中国兽医药品监察所
基金: 国家自然科学基金(Nos.21808226,21821005)资助~~
分类号: S852.4
DOI: 10.13345/j.cjb.190047
页码: 1441-1452
总页数: 12
文件大小: 2744K
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