亮氨酸脱氢酶与甲酸脱氢酶共表达菌株发酵产酶条件优化及其在L-2-氨基丁酸合成中的应用

论文摘要

亮氨酸脱氢酶催化2-酮丁酸生成L-2-氨基丁酸需要辅酶NADH参与,构建Escherichia coli （Leu DH/FDH）,通过共表达亮氨酸脱氢酶和甲酸脱氢酶实现了辅酶NADH胞内循环再生。通过产酶条件优化,提高该菌株催化制备L-2-氨基丁酸的效率。结果表明,在5 L发酵罐上,在诱导温度为22℃、诱导剂乳糖质量浓度为8. 0 g/L和诱导时间为17 h的条件下,亮氨酸脱氢酶和甲酸脱氢酶的酶活分别达到79. 2 U/g和216. 1 U/g,催化效果最佳。利用该菌株全细胞为催化剂,耦合苏氨酸脱氨酶,在1 L反应体系中进行了催化反应,L-苏氨酸质量浓度为180 g/L时,无需额外添加辅酶,8 h反应后底物转化率达到99%,L-2-氨基丁酸e. e.值99. 5%以上,时空产率19. 3 g/（L·h）。该研究为建立高效、低成本的L-2-氨基丁酸工业化生产方法提供了基础。

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类型: 期刊论文

作者: 徐建妙,陈策,张博,柳志强

关键词: 氨基丁酸,亮氨酸脱氢酶,甲酸脱氢酶,共表达,优化

来源: 食品与发酵工业 2019年10期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑

专业: 一般化学工业

单位: 浙江工业大学生物工程学院

基金: 浙江省科技计划公益技术应用研究项目(2017C33157)

分类号: TQ925

DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.019942

页码: 29-35

总页数: 7

文件大小: 1597K

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标签：氨基丁酸论文;  亮氨酸脱氢酶论文;  甲酸脱氢酶论文;  共表达论文;  优化论文;