猪PBD1成熟肽基因在干酪乳酸杆菌中的表达及其抑菌活性的检测

论文摘要

为获得一株能够稳定表达猪β防御素-1 （PBD1）成熟肽蛋白的重组干酪乳酸杆菌,本研究将PBD1成熟肽基因克隆至含有短小干酪乳酸杆菌信号肽的pUCK-SP载体中,再将SP-PBD1亚克隆到干酪乳酸杆菌整合性表达质粒pMJ67的Lac启动子下游,获得重组质粒pMJ67-SP-PBD1,电转化入干酪乳酸杆菌,经红霉素抗性筛选和基因组DNA PCR测序鉴定,证实猪PBD1基因整合到了干酪乳酸杆菌中。采用半定量RT-PCR分析显示,经2%乳糖诱导18 h后的重组菌中猪PBD1 mRNA含量最高。Western blot检测显示,经乳糖诱导的重组菌表达了约5.8 ku的目的蛋白,与PBD1成熟蛋白理论分子量相符。抑菌试验结果显示重组PBD1对葡萄球菌具有明显抑制作用。表明猪PBD1基因在重组干酪乳酸杆菌中获得了表达,且具有抑菌活性。本研究为进一步研发具有广谱抗菌作用的微生态制剂奠定了基础。

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文章来源

类型: 期刊论文

作者: 杨兴武,郭奎,韩昊莹,赵宇,郑慧华,杨明凡,陈红英

关键词: 猪防御素,成熟肽基因,干酪乳酸杆菌,表达

来源: 中国预防兽医学报 2019年02期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学

单位: 河南农业大学牧医工程学院,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,郑州市猪重大疫病防控重点实验室

基金: 河南省产学研合作计划项目(152107000003),河南省基础与前沿技术研究计划项目(142300410156)

分类号: Q78

页码: 179-183

总页数: 5

文件大小: 314K

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