表达双基因的重组新城疫病毒载体的构建

表达双基因的重组新城疫病毒载体的构建

论文摘要

为了构建表达双外源基因的重组新城疫病毒载体,试验采用分子生物学方法对重组新城疫病毒进行了研究。通过反向遗传学操作构建并拯救表达双基因的重组新城疫病毒[r Clone30-EGFP(NP/P)-RFP (P/M)];用重组新城疫病毒感染鸡胚成纤维细胞并绘制生长曲线;通过免疫荧光试验检测重组新城疫病毒感染HepG2细胞后荧光蛋白的表达情况。结果表明:试验成功构建并拯救了表达双基因的重组新城疫病毒;重组新城疫病毒的生长动力学与亲本病毒相似,差异不显著(P>0. 05);重组新城疫病毒能够在HepG2细胞中稳定表达增强型绿色荧光蛋白(EGFP)和红色荧光蛋白(RFP)。说明重组新城疫病毒感染HepG2细胞后可稳定表达双外源基因。

论文目录

  • 1 材料
  •   1.1 质粒、病毒和细胞
  •   1.2 试验动物
  •   1.3 主要试剂
  •   1.4 主要仪器
  • 2 方法
  •   2.1 重组新城疫病毒的构建
  •   2.2 重组新城疫病毒的拯救
  •   2.3 重组新城疫病毒增殖稳定性检测
  •   2.4 免疫荧光检测重组新城疫病毒感染Hep G2细胞后荧光蛋白的表达
  •   2.5 数据的统计分析
  • 3 结果与分析
  •   3.1 重组新城疫病毒的构建
  •   3.2 重组新城疫病毒的拯救
  •   3.3 重组新城疫病毒增殖的稳定性检测
  •   3.4 免疫荧光检测重组新城疫病毒感染HepG2细胞后荧光蛋白的表达
  • 4 讨论与结论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 高超,李德山,肖莉杰

    关键词: 重组新城疫病毒,反向遗传学,双基因,生长曲线,免疫荧光试验,增强型绿色荧光蛋白,红色荧光蛋白

    来源: 黑龙江畜牧兽医 2019年21期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院,东北农业大学生命科学学院生物制药教研室

    基金: “十三五”重大专项

    分类号: S852.65

    DOI: 10.13881/j.cnki.hljxmsy.2019.01.0302

    页码: 87-90+178-179

    总页数: 6

    文件大小: 599K

    下载量: 70

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