甘薯IbSSI基因启动子序列的克隆及瞬时表达分析

甘薯IbSSI基因启动子序列的克隆及瞬时表达分析

论文摘要

植物可溶性淀粉合成酶(soluble starch synthase, SS)在植物支链淀粉的合成中起着关键作用,其主要负责支链的延伸。前期我们从甘薯中克隆到IbSSI基因并对其进行了表达分析及功能验证,发现该基因在甘薯中的表达受到外源蔗糖的诱导以及昼夜节律的调控。本研究在此基础上利用染色体步移法克隆到IbSSI基因1 811 bp的启动子序列。PlantCARE在线分析表明IbSSI启动子序列富含TATA-box和CAAT-box两个基本元件,还含有与昼夜节律、光照、蔗糖、逆境响应及组织特异表达等相关的顺式作用元件。将IbSSI基因全长启动子及其6个启动子5’端缺失片段分别替换植物表达载体pBI121的CaMV 35S启动子并在本生烟草(Nicotiana benthamiana)叶片中进行瞬时表达。GUS染色结果表明不同长度片段的启动子驱动β-葡萄糖醛酸酶基因(GUS)表达的能力有所差异,其中-200 bp~-369 bp区段以及-1 015 bp~-1 304 bp区段可能存在着增强转录的重要顺式作用元件。本研究揭示了IbSSI基因受外源蔗糖诱导表达及昼夜节律调控的原因,并为进一步阐明IbSSI基因在甘薯淀粉生物合成中的作用提供了科学依据。

论文目录

  • 1 结果与分析
  •   1.1 甘薯IbSSI基因启动子的克隆及序列分析
  •   1.2 IbSSI启动子5'端缺失表达载体的构建以及在本生烟草中的瞬时表达
  • 2 讨论
  • 3 材料与方法
  •   3.1 实验材料
  •   3.2 IbSSI基因启动子的克隆及序列分析
  •   3.3 IbSSI基因启动子5'端缺失表达载体的构建
  •   3.4 本生烟草中的瞬时表达及GUS活性分析
  • 作者贡献
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 王雁楠,杨育峰,杨国红,张莉,陈献功,徐心志,刘庆昌,翟红,何绍贞

    关键词: 甘薯,基因,启动子,顺式作用元件,瞬时表达

    来源: 分子植物育种 2019年20期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学,农作物

    单位: 河南省农业科学院粮食作物研究所,中国农业大学农业农村部甘薯生物学与生物技术重点实验室

    基金: 国家甘薯产业技术体系项目(CARS-10),河南省科技攻关重点项目(172102110080),河南省农业科学院科研发展专项资金项目(2018XKYH01)共同资助

    分类号: S531;Q943.2

    DOI: 10.13271/j.mpb.017.006604

    页码: 6604-6610

    总页数: 7

    文件大小: 3136K

    下载量: 364

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