荧光素标记肽论文-逯晓青,赵量,贾昕,姚红,杨晓峰

荧光素标记肽论文-逯晓青,赵量,贾昕,姚红,杨晓峰

导读:本文包含了荧光素标记肽论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献,主要关键词:膀胱肿瘤,荧光素-5-异硫氰酸盐,抗体特异性,NYZL1

荧光素标记肽论文文献综述

逯晓青,赵量,贾昕,姚红,杨晓峰[1](2018)在《异硫氰酸荧光素标记膀胱癌靶向肽NYZL1的体外特异性鉴定》一文中研究指出目的探讨膀胱癌靶向肽NYZL1的特异性,为其临床应用提供理论基础。方法 (1)采用固相化学合成法制备多肽及其异硫氰酸荧光素(FITC)连接肽,噻唑蓝(MTT)鉴定其细胞毒性。(2)采用免疫荧光技术检测FITC-NYZL1与人膀胱癌组织结合的特异性,以FITC-sv NYZL1作阴性对照。(3)应用扫描激光共聚焦显微镜检测FITC-NYZL1与膀胱癌BIU-87、T24、E-J、5637细胞和肾癌KC细胞结合的特异性,以FITC-sv NYZL1作阴性对照。结果 (1)成功制备了实验所需的化学合成肽,高效液相色谱纯化和质谱检测结果显示其纯度高达98%,MTT结果表明化学合成肽对BIU-87细胞的增殖无影响。(2)FITC-NYZL1标记的膀胱癌组织出现了荧光富集,而其他组织未见荧光富集,FITC-sv NYZL1标记的各组织均未见荧光富集。(3)与对照组相比,FITC-NYZL1在膀胱癌细胞上均有荧光富集,且不同膀胱癌细胞间平均荧光强度差异无统计学意义(P>0.05)。结论多肽NYZL1与膀胱癌组织、细胞均能特异结合,具有显着的结合特异性,为膀胱癌的早期诊断和靶向治疗提供了新的可能。(本文来源于《中国药物与临床》期刊2018年09期)

黄绍代,王玉,鲁长风,陈鹏,王冲[2](2018)在《PKH26荧光素标记脂肪间充质干细胞的生物学特性的研究》一文中研究指出目的研究PKH26荧光素染料对脂肪间充质干细胞(ADSCs)生物学特性的影响。方法分离培养新生SD大鼠的ADSCs,通过流式细胞仪、成脂、成骨、成软骨诱导鉴定ADSCs的免疫表型和多向分化的能力。用细胞膜荧光素染料PKH26对第二代脂肪干细胞进行标记,通过倒置相差显微镜、荧光显微镜以及CCK-8法评估标记后细胞的形态、荧光强度以及增殖活性的变化。结果成功分离和培养ADSCs,其纯度达95%以上,并成功将ADSCs诱导成脂肪、骨、软骨;PKH26标记24 h后,在荧光显微镜下可见细胞膜上均匀分布的强红色荧光,细胞的形态以及增殖活性与未标记的细胞无明显差异。结论 PKH26荧光素染料标记后对ADSCs的形态及增殖活性无明显影响,是一种理想的细胞标志物,能够很好的应用于示踪间充质干细胞的迁移转归及干细胞标记等方面的研究。(本文来源于《安徽医科大学学报》期刊2018年09期)

崔英丽,李霄,岳瑛,金宁一[3](2017)在《溶瘤腺病毒Ad-VT对荧光素标记人卵巢癌细胞的抑制作用的研究》一文中研究指出引言卵巢恶性肿瘤是女性生殖器常见的叁大恶性肿瘤之一,由于卵巢位于盆腔深部,早起病变不易发现,一旦出现症状多属晚期,因此卵巢恶性肿瘤致死率居妇科恶性肿瘤首位。传统的疗法如手术切除,化学治疗等,虽有一定的治疗效果,但副作用大。随着基因工程发展及应用,基因疗法表现出越来越突出的优势,尤以腺病毒为载体的靶向癌细胞的疗法受到广泛的关注。传统的动物模型无法连续地、动态地研究肿瘤的生长和转移。荧光素基因(luciferase gene)作(本文来源于《中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第九次全国会员代表大会暨第十七次全国学术研讨会论文集》期刊2017-08-20)

刁桐湘,余力生,静媛媛,韩琳,郑宏伟[4](2017)在《耳后注射异硫氰酸荧光素标记葡聚糖的可能转运途径》一文中研究指出目的探讨耳后注射异硫氰酸荧光素标记的葡聚糖(FITC-Dextran)进入内耳的可能途径。方法以异硫氰酸荧光素标记的葡聚糖(分子量为3 000~5 000,20μl)为示踪剂,将200只出生24h内的昆明乳鼠随机分为耳后对照组[5mg/ml的葡聚糖(Dextran)20μl耳后注射]、耳后实验组(5mg/ml的FITC-Dextran 20μl耳后注射)、肌注对照组(5mg/ml的葡聚糖20μl肌肉注射)、肌注实验组(5mg/ml FITC-Dextran 20μl肌肉注射),每组50只;于给药后0min、5min、15min、30min、1h、3h、5h、7h、12h、24h处死动物,取其头颅做冰冻切片,应用激光共聚焦成像技术观察分析荧光示踪剂在乙状窦、内淋巴囊及耳蜗的分布及强度变化,以实验组与相应对照组荧光强度比值为强度值。结果肌注实验组乙状窦在给药后3h、内淋巴囊及耳蜗在给药后12h可检测到荧光强度轻度增高,其余各部位各时间点均未检测出明显荧光增强。耳后实验组耳后注射示踪剂后,乙状窦、内淋巴囊分别在给药后即刻、耳蜗在给药后30min可观察到荧光信号,随后荧光强度随时间延长依次升高,乙状窦、内淋巴囊、耳蜗的荧光强度达峰值时间分别为给药后5~15、30、60min,到12小时强度均再次小幅度升高。结论药物在耳后注射较肌肉注射更易于进入内淋巴液,可能径路为:示踪剂首先通过局部循环和局部渗透至乙状窦内富集,随后通过乙状窦与内淋巴囊间的脉络关系进入内淋巴液,最终逆内淋巴浓度梯度作用于内耳。(本文来源于《听力学及言语疾病杂志》期刊2017年04期)

张雅娟,俞洁,张冬未,梁洪泽,梁明明[5](2016)在《异硫氰酸荧光素标记尿激酶的制备与性能研究》一文中研究指出用异硫氰酸荧光素(FITC)对溶栓蛋白药物尿激酶(uPA)进行了荧光标记,制备了荧光素标记的尿激酶(FITC-u PA),经核磁谱及红外谱表征证实了反应能有效进行,其荧光素/蛋白值(F/P)值为0.45.尿激酶经荧光素标记后,具有良好的荧光性质,其荧光检测下限低达10-6 g?m L~(-1).在1~100mg?m L~(-1)范围内,荧光强度与溶液浓度具有很好的线性关系,可用于微/痕量蛋白质的定量/定性检测和跟踪标记.荧光素标记后的尿激酶,其流体力学直径与未标记的尿激酶基本一致,其体外溶栓能力也与未标记的尿激酶相当,说明FITC标记基本不影响尿激酶的生物活性,是一种简单、有效的溶栓药物标记方法.(本文来源于《宁波大学学报(理工版)》期刊2016年03期)

郭超[6](2016)在《白金针菇多糖的分离纯化及异硫氰酸荧光素标记研究》一文中研究指出金针菇在我国有丰富的自然资源,目前大多形成工厂化生产。金针菇有丰富的营养价值和药理作用,其中金针菇多糖(FVP)具有抗菌、抗氧化、提高记忆力、调节机体免疫和抑制癌细胞等诸多作用。但目前FVP提取率较低,结构复杂,且没有特定的光吸收也不带有发光基团,这些因素都限制了FVP的发展。目的:为了提高FVP热水提取法的提取率,初步探究FVP的结构,为FVP的开发利用提供实验依据,本文利用单因素试验和响应面RSM试验对提取FVP的条件进行优化;通过DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换层析和Sephacryl S-300HR凝胶柱层析纯化FVP,并用HPLC分析了FVP的单糖构成和分子量分布;用MTT法检测了FVP对人肝癌细胞HepG-2增殖的影响;通过胺化还原法用FITC对FVP荧光标记,检测了荧光多糖的体外稳定性和细胞毒性。结果:1.通过单因素试验和RSM优化试验,得到了热水提取FVP的最佳提取条件:液料比41︰1 mL/g、提取温度为92℃、提取时间3小时,FVP的提取率为4.87%。2.通过不同浓度的乙醇进行分级沉淀,除去可溶蛋白、色素,透析滤掉小分子,经离子交换柱层析和凝胶分子筛层析纯化得到两种新的FVP:FVP-w1和FVP-Y2。FVP-w1和FVP-Y2的相对分子量分别为2.2×104 Da和4.2×105 Da。其中FVP-w1为中性糖,主要的单糖为葡萄糖(Glc)占66.9%,还含有17.0%的半乳糖(Gal),14.9%的甘露糖(Man),以及少量的鼠李糖(Rha)占1.2%;摩尔比为:Glc:Gal:Man:Rha=1.0:0.25:0.22:0.02。而FVP-Y2为酸性FVP多糖,主要单糖构成为半乳糖(Gal,30.4%),葡萄糖(Glc,26.2%),甘露糖(Man,18.3%),鼠李糖(Rha,16.1%),以及还有少量的岩藻糖(Fuc,9.0%),摩尔比为Gal:Glc:Man:Rha:Fuc=1.16:1.0:0.70:0.61:0.34。3.通过还原胺化反应成功的将FITC标记于FVP,FITC取代度为0.90%,标记前后没有改变FVP的生物活性,且体外稳定性较好。4.通过经典的MTT法检测了不同浓度的FVP-Y2对HepG-2细胞增殖的抑制作用,结果发现在25-500μg/mL浓度范围内,纯化的FVP-Y2对HepG-2细胞的增殖有抑制作用,且随着浓度的增大,抑制作用增强,呈剂量依赖性,在FVP-Y2为500μg/mL时,抑制率最大,抑制率为55.77%。(本文来源于《吉林农业大学》期刊2016-05-01)

温来欣,司萍,杨东平,方丽萍,吕传臣[7](2015)在《诺如病毒抗原的异硫氰酸荧光素标记-酶联免疫吸附检测法》一文中研究指出目的建立基于FITC-抗FITC放大系统的检测人粪便中诺如病毒抗原的ELISA方法,用于筛查或辅助诊断诺如病毒感染。方法以诺如病毒特异性单克隆抗体1包被微孔板,用异硫氰酸荧光素(FITC)标记配对的诺如病毒特异性单克隆抗体2,以辣根酶标记的抗FITC抗体作为示踪物,建立检测人粪便中诺如病毒抗原的ELISA方法,使用商业化酶联免疫法试剂盒和分型试剂进行比对分析。结果该方法的捕获抗体鼠抗诺如病毒单克隆抗体1的最佳包被量为1∶2 000,FITC标记的检测抗体鼠抗诺如病毒单克隆抗体2的最佳稀释度为1∶1 000,辣根酶标记的抗FITC抗体最佳稀释度为1∶1 200;临界值为0.368;板间和板内变异系数均小于5%;灵敏度和特异性均大于95%;对拜发酶联免疫法试剂盒与本方法进行了一致性(Kappa)检验,表明两种检测方法所得结果之间一致性良好(k=0.986)。收集231份住院腹泻患儿粪便标本经该方法检测,46份呈诺如病毒阳性,阳性率为19.91%;经酶联免疫法试剂盒(德国拜发公司)检测,45份呈阳性。与分型试剂盒(欧佩沦公司)比较,阳性符合率为91.3%(42/46),阴性符合率为97.9%(185/189)。结论基于FITC-抗FITC放大系统的ELISA方法适用于人粪便中诺如病毒抗原的监测,特异性和灵敏度较好,有助于诊断由诺如病毒引起的急性腹泻。(本文来源于《环境与健康杂志》期刊2015年03期)

乔媛媛,张达矜,王珊珊,熊鸣,赵晓航[8](2015)在《荧光素标记噬菌体抗体的制备及其应用》一文中研究指出目的:通过直接荧光素标记方法制备荧光标记的噬菌体单链抗体,并且对于肿瘤细胞的免疫学活性进行检测。方法:用异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)和四甲基异硫氰酸罗丹明(tetramethyl rhodamine isothio cyanate,TRITC)标记的单链噬菌体抗体对肿瘤细胞进行直接染色,通过荧光显微镜和激光扫描共聚焦显微镜检测观察单链抗体与肿瘤细胞及白细胞的荧光显色情况。结果:荧光显微镜和激光扫描共聚焦显微镜检测证实标记荧光素FITC、TRITC的噬菌体抗体与肿瘤细胞有较好的特异性结合,主要结合在细胞膜的表面。比较荧光的强度,与白细胞结合活性有差异。结论:用荧光素标记的噬菌体单链抗体能够作为检测试剂用于细胞、组织的检测,具备应用于免疫检测分析的价值,进一步证实所筛选的抗肿瘤细胞噬菌体抗体具有较好的免疫生物学活性。(本文来源于《现代肿瘤医学》期刊2015年02期)

王锐,王秀华,王玉娟,韩雯,黄倢[9](2014)在《异硫氰酸荧光素标记鳗弧菌条件优化及应用条件对荧光信号的影响》一文中研究指出为了实现对目标细菌的有效示踪,实验以异硫氰酸荧光素(FITC)为标记物,分别设置FITC标记浓度0.2、2、20、50、100、200μg/mL,标记时间1、15、30、60、120、240 min,研究了FITC标记浓度与标记时间对鳗弧菌标记效果的影响,同时对在不同温度(25、4、-20、-70℃)及不同时间(24、48、96、192 h)存储条件下鳗弧菌标记荧光的稳定性进行了比较,对标记鳗弧菌经甲醛灭活后的荧光变化进行了观察,研究了不同光照条件(0、150、1 500、25 000 lx)对标记鳗弧菌的荧光衰减影响,以及在-20和-70℃条件下反复冻融对标记鳗弧菌荧光强度的影响。结果表明,FITC的最适标记浓度范围为20~100μg/mL,最适标记时间范围60~120 min,储藏在-20和-70℃条件下,标记后的鳗弧菌荧光信号比储藏在4和25℃条件下稳定,标记后的鳗弧菌经甲醛灭活后的荧光信号稳定性优于对照组,不同强度自然光照对标记鳗弧菌的荧光衰减效果不明显,标记细菌经3次冻融,发现在-70℃条件下冻存的细菌荧光信号稳定性保持良好。本研究结果为FITC用于标记海洋细菌提供了实用的技术参数。(本文来源于《水产学报》期刊2014年04期)

徐蓉,阮林高,戈梅,张怡轩[10](2014)在《异硫氰酸荧光素标记万古霉素的制备及其与细菌相互作用的荧光检测》一文中研究指出以异硫氰酸荧光素(FITC)标记万古霉素(Vanco)制备了FITC-Vanco(FV),FV经高效液相制备色谱纯化后,进行了质谱结构鉴定。分别通过荧光分光光度计和流式细胞仪(FCM)测定不同浓度FV培养基中培养细菌细胞的荧光强度。结果显示,所制备的荧光探针对5种细菌有特异性结合,用荧光强度可表征细胞结合抗生素的数量,对细菌耐药机制研究和细菌对万古霉素作用敏感性的测试有应用价值。(本文来源于《应用化学》期刊2014年02期)

荧光素标记肽论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

目的研究PKH26荧光素染料对脂肪间充质干细胞(ADSCs)生物学特性的影响。方法分离培养新生SD大鼠的ADSCs,通过流式细胞仪、成脂、成骨、成软骨诱导鉴定ADSCs的免疫表型和多向分化的能力。用细胞膜荧光素染料PKH26对第二代脂肪干细胞进行标记,通过倒置相差显微镜、荧光显微镜以及CCK-8法评估标记后细胞的形态、荧光强度以及增殖活性的变化。结果成功分离和培养ADSCs,其纯度达95%以上,并成功将ADSCs诱导成脂肪、骨、软骨;PKH26标记24 h后,在荧光显微镜下可见细胞膜上均匀分布的强红色荧光,细胞的形态以及增殖活性与未标记的细胞无明显差异。结论 PKH26荧光素染料标记后对ADSCs的形态及增殖活性无明显影响,是一种理想的细胞标志物,能够很好的应用于示踪间充质干细胞的迁移转归及干细胞标记等方面的研究。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

荧光素标记肽论文参考文献

[1].逯晓青,赵量,贾昕,姚红,杨晓峰.异硫氰酸荧光素标记膀胱癌靶向肽NYZL1的体外特异性鉴定[J].中国药物与临床.2018

[2].黄绍代,王玉,鲁长风,陈鹏,王冲.PKH26荧光素标记脂肪间充质干细胞的生物学特性的研究[J].安徽医科大学学报.2018

[3].崔英丽,李霄,岳瑛,金宁一.溶瘤腺病毒Ad-VT对荧光素标记人卵巢癌细胞的抑制作用的研究[C].中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第九次全国会员代表大会暨第十七次全国学术研讨会论文集.2017

[4].刁桐湘,余力生,静媛媛,韩琳,郑宏伟.耳后注射异硫氰酸荧光素标记葡聚糖的可能转运途径[J].听力学及言语疾病杂志.2017

[5].张雅娟,俞洁,张冬未,梁洪泽,梁明明.异硫氰酸荧光素标记尿激酶的制备与性能研究[J].宁波大学学报(理工版).2016

[6].郭超.白金针菇多糖的分离纯化及异硫氰酸荧光素标记研究[D].吉林农业大学.2016

[7].温来欣,司萍,杨东平,方丽萍,吕传臣.诺如病毒抗原的异硫氰酸荧光素标记-酶联免疫吸附检测法[J].环境与健康杂志.2015

[8].乔媛媛,张达矜,王珊珊,熊鸣,赵晓航.荧光素标记噬菌体抗体的制备及其应用[J].现代肿瘤医学.2015

[9].王锐,王秀华,王玉娟,韩雯,黄倢.异硫氰酸荧光素标记鳗弧菌条件优化及应用条件对荧光信号的影响[J].水产学报.2014

[10].徐蓉,阮林高,戈梅,张怡轩.异硫氰酸荧光素标记万古霉素的制备及其与细菌相互作用的荧光检测[J].应用化学.2014

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