（盘锦市石油化工技校，辽宁盘锦124000）
摘要：介绍了一种较好的测定盐酸左氟沙星的含量的方法，采用HPLC法测定盐酸左氟沙星的含量，本法操作简便，色谱条件能较好地将其被测成份与杂质完全分离，测定结果准确。
关键词：盐酸左氟沙星；对照品；含量；滴定；色谱图
盐酸左氟沙星具有广谱抗菌作用，国内已用于临床。其含量测定常用非水溶液法，用结晶紫指示剂指示终点。该法由于加入醋酸汞试液，使得在滴定过程中产生的白色氯化汞沉淀而影响被测试液的颜色观察，终点判断不易掌握。为此，我们采用HPLC法测定盐酸左氟沙星的含量，本法操作简便，色谱条件能较好地将其被测成份与杂质完全分离，测定结果准确。
1仪器与药品
1.1仪器
高效液相色谱仪LC-6A，SPD-6AV检测仪，SIL-6A自动进样器，CR-3A积分仪，UV-260分光光度计，Millipore-Qplus超纯水器。
1.2药品
盐酸左氟沙星对照品（含量为99.92%，中国人民解放军230医院提供）；盐酸左氟沙星原料（供注射用）3批：980624、980625、980626（中国人民解放军230医院提供）；氧氟沙星原料，批号：990105（含量99.2%,广州军区总医院提供）；乙腈（色谱纯）、异丙醇（分析纯），磷酸（分析纯），超纯水（自制）。
2实验方法与结果
2.1可行性试验
2.1.1盐酸左氟沙星对照品溶液的配制：称取经105℃干燥2h的盐酸左氟沙星对照品10mg，置于100ml容量瓶中，加流动相适量使其溶解并至刻度，摇匀，为浓溶液，备用①。吸取此浓溶液2ml置于100ml容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，备用②。
2.1.2氧氟沙星溶液的配制：称取经105℃干燥2h的氧氟沙星原料10mg,置于100ml容量瓶中，加流动相适量使其溶解并至刻度，摇匀，备用③。
2.1.3盐酸左氟沙星与氧氟沙星混合液的配制:取上述的备用②③液适量等体积混合,摇匀，备用④。
2.1.4盐酸左氟沙星与其杂质分离色谱图、氧氟沙星色谱图、盐酸左氟沙星与氧氟沙星混合色谱图的制备：取上述各溶液的备用液20μl,照含量测定项下的方法进行测定，结果见液相色谱图。
2.2盐酸左氟沙星的线性试验
取可行性试验中盐酸左氟沙星对照品浓溶液0.2，0.6，1.0，1.4，1.8，2.0ml分别置于10ml容量瓶中，各加流动相稀释至刻度，摇匀，作为标准溶液。各取20μl依次注入液相色谱仪，照含量测定项下的方法进行分析，记录色谱图。以浓度为横座标，峰面积为纵座标，进行归回处理。得盐酸左氟沙星回归方程：S=(6230C+1.4656)×104，r=0.9999。
2.3回收率试验
精确称取已知含量的盐酸左氟沙星10mg,置于100ml容量瓶中，加流动相适量使其溶解并至刻度，摇匀。精确吸取1ml,置于25ml容量瓶中，共取6份，分别加入上述盐酸左氟沙星对照品的浓溶液0.5、0.5、1.0、1.0、2.0、2.0ml、各加流动相适量，振摇使溶解至刻度，摇匀。照含量项下的方法分别测定，计算平均回收率为99.98%，RSD=0.71%(n=6)。
2.4精密度试验
取同一浓度的盐酸左氟沙星供试品，照含量项下的方法，重复进样6次测得峰积分面积，计算相对标准偏差为：RSD=0.32(n=6)。
2.5稳定性试验
取盐酸左氟沙星线性试验下的一标准溶液，照含量测定下的方法，分别在0、2、4、6、8h时依法测定。得峰积分面积，计算相对标准偏差为：RSD=1.03%(n=5)。表明在8h内稳定。
2.6含量测定
2.6.1色谱条件与系统适用性试验。色谱柱ZORBAX-C18（5μm，4.6mm×150mm，美国惠普）；流动相：乙腈-水-异丙醇-磷酸（50：34：16：0.1）；检测波长为294nm；理论塔板数按盐酸左氟沙星峰计算为11979，盐酸左氟沙星和其杂质的分离度为2.35，符合要求。
2.6.2测定方法
精确称取本品10mg，置于100ml容量瓶中，加流动相适量使溶解并至刻度，摇匀。精确吸取5ml，置于50ml容量瓶中，加流动相稀释并至刻度，摇匀。精确吸取20μｌ注入液相色谱仪，记录色谱图；另取经105℃干燥2h的盐酸左氟沙星对照品，同法测定。按外标法以峰面积计算，即得。测定3批样品的含量并与非水滴定法测得结果基本一致。结果见下表。
表样品含水量测定结果（%，n=2）
3讨论
3.1测定波长的选择
取盐酸左氟沙星、氧氟沙星原料，用2.6含量测定下项下的流动相分另溶解，并在200-400nm范围内扫描，两者的吸收图谱一致，均在（294±1）nm处有最大吸收，故选取定其为测定波长。
3.2盐酸左氟沙星色谱图中杂质峰的确定
左氟沙星是氧氟沙星的左旋体，所以本文以氧氟沙星来确定盐酸左氟沙星色谱图中的小峰是否为其对映体。因为氧氟沙星是一个外消旋体，有两种光学异构体（S-和R-）。如果不在流动相中加入配合剂与配合离子，是很难将两面种异构体分开的，本文的色谱系统就不具备这个条件，从2.14色谱图结果可以看出，盐酸左氟沙星、氧氟沙星两者主峰的出峰时间一致，说明本法色谱条件不能将两种异构体分离。从而确定盐酸左氟沙星浓溶液所呈现色谱中的小峰不是其对映体，是个杂质。
3.3方法适用性
本法色谱条件，能较好的将盐酸左氟沙星与其杂质完全分离，故能准确地反应出盐酸左氟沙星的含量，结果重现性好，操作简单快速，且实验环境污染少。
3.4非水溶液滴定法测定盐酸左氟沙星的含量，由于滴定反应过程中产生的难电离的氯化汞的干扰，被测溶液混浊严重，滴定终点的蓝色不能灵敏的反应出来，操作误差较大，重复性差。操作经验少者更甚。
参考文献
[1]于世林，苗凤琴.分析化学[M].北京：化学工业出版社.
[2]朱明华.仪器分析[M].北京：高等教育出版社.
[3]王似菊.对映体选择HPLC测定微粒体中氧氟沙星光学异构体[J].中国药学杂志，1995.