多重位点特异性PCR快速检测牛肉中常见掺假动物源性成分

多重位点特异性PCR快速检测牛肉中常见掺假动物源性成分

论文摘要

目的:基于动物线粒体cytb基因的多态性位点,建立一种特异性多重PCR体系检测牛肉、猪肉和鸡肉的方法。方法:提取肉类的基因组DNA,利用不同物种mtDNA cytb基因序列的SNP位点的差异,设计特异性引物。进行多重PCR扩增,利用扩增产物片段大小不同,检测牛肉中常见的掺假动物源性成分。通过灵敏性试验,确定最低检测量。结果:实验设计的引物特异性良好,在同一反应体系中,在同一退火温度52℃条件下,牛肉DNA扩增后产生149 bp的特异性条带,猪肉DNA扩增片段为261 bp,鸡肉DNA扩增片段为554 bp,未发生非特异性扩增。且检测的最低浓度达到100 pg/μL,具有高度的灵敏性和适用性。结论:根据动物线粒体cytb基因的差异性位点,开发的多重PCR体系,可一次性地同时检测牛肉、猪肉和鸡肉,可快速、灵敏、高通量地分析食品中掺假动物成分的来源。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料与仪器
  •   1.2 实验方法
  •     1.2.1 提取肉样DNA
  •     1.2.2 检测DNA的纯度和浓度
  •     1.2.3 引物的设计
  •     1.2.4 多重PCR反应及条件优化
  •     1.2.5 引物特异性检测
  •     1.2.6 灵敏性测试
  •   1.3 数据处理
  • 2 结果与分析
  •   2.1 肉类DNA模板的质量
  •   2.2 PCR反应条件优化
  •     2.2.1 最适退火温度和循环数的确定
  •     2.2.2 最适引物量的确定
  •   2.3 混合肉样的多重PCR检测
  •   2.4 引物特异性验证结果
  •   2.5 灵敏性考察结果
  • 3 讨论与结论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 李盈诺,王艳双,苑广信,孙丽媛,艾金霞,冯源,李明成,张丽华

    关键词: 基因,位点,牛肉,多重,肉类掺假,动物源性成分

    来源: 食品工业科技 2019年24期

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅰ辑

    专业: 轻工业手工业

    单位: 北华大学药学院,北华大学医学院,北华大学吉林省中药DNA指纹检测技术科技创新中心,北华大学医学技术学院

    基金: 吉林省发改委项目(2018C048-2),吉林省科技发展计划项目(20180201023YY),吉林省科技发展计划项目(20190303093SF),吉林省科技发展计划项目(20190301014NY),吉林省科技创新中心建设项目(20190902018TC)

    分类号: TS251.52

    DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2019.24.014

    页码: 82-87

    总页数: 6

    文件大小: 1715K

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