黄芪甲苷配伍三七总皂苷对OGD/R大鼠骨髓间充质干细胞增殖、凋亡、迁移及神经分化的影响

黄芪甲苷配伍三七总皂苷对OGD/R大鼠骨髓间充质干细胞增殖、凋亡、迁移及神经分化的影响

论文摘要

目的观察黄芪甲苷(ASTIV)配伍三七总皂苷(PNS)对氧糖剥夺后再复糖复氧(OGD/R)大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖、凋亡、迁移及神经分化的影响。方法全骨髓贴壁法分离、培养、扩增、纯化BMSCs,流式细胞仪检测BMSCs表面标志物CD29、CD90、CD34、CD45阳性表达率。取第3代BMSCs,采用AST IV与PNS高(100μmol/L+60μmol/L)、中(50μmol/L+30μmol/L)、低(25μmol/L+15μmol/L)剂量配伍预处理24 h,以OGD/R建立缺血再灌注损伤模型,同时设立对照组和模型组。CCK-8法测定细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell实验检测细胞迁移,巢蛋白(Nestin)/神经元特异性烯醇化酶(NSE)、Nestin/胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫荧光双标观察BMSCs向神经元及星形胶质细胞分化情况。结果成功培养分离BMSCs,流式细胞仪检测CD29、CD90阳性率分别为94.23%、94.69%;而CD34、CD45阳性表达率分别为5.76%、5.31%;与对照组比较,模型组细胞存活数量明显减少(P<0.05)、细胞凋亡率显著增加(P<0.05),与模型组比较,AST IV与PNS不同剂量配伍均能促进BMSCs增殖(P<0.05、0.01),并抑制细胞凋亡(P<0.05、0.01);与对照组比较,模型组、AST IV与PNS不同剂量配伍均能促进BMSCs迁移(P<0.05),与模型组比较,AST IV与PNS不同剂量配伍组的迁移细胞数量明显增加(P<0.05);与对照组比较,模型组与AST IV与PNS不同剂量配伍组均能促进BMSCs向神经元及星形胶质细胞分化(P<0.01),与模型组比较,ASTIV与PNS不同剂量配伍组的Nestin/NSE、Nestin/GFAP阳性表达率明显增高(P<0.01)。结论 ASTIV配伍PNS在体外能促进缺血再灌注模型BMSCs增殖、迁移,抑制其凋亡,并诱导其向神经元、星形胶质细胞定向分化。

论文目录

  • 1 材料
  •   1.1 实验动物
  •   1.2 药品与试剂
  •   1.3 仪器
  • 2 方法
  •   2.1 BMSCs分离、培养及鉴定
  •   2.2 AST IV配伍PNS对OGD/R大鼠BMSCs增殖的影响
  •   2.3 AST IV配伍PNS对OGD/R大鼠BMSCs凋亡作用
  •   2.4 AST IV配伍PNS对OGD/R大鼠BMSCs迁移作用
  •   2.5 AST IV配伍PNS对OGD/R大鼠BMSCs神经分化的影响
  •   2.6 统计学方法
  • 3 结果
  •   3.1 BMSCs鉴定
  •   3.2 AST IV配伍PNS对OGD/R大鼠BMSCs增殖的影响
  •   3.3 AST IV配伍PNS对OGD/R大鼠BMSCs凋亡的影响
  •   3.4 AST IV配伍PNS对OGD/R大鼠BMSCs迁移的影响
  •   3.5 AST IV配伍PNS对OGD/R大鼠BMSCs神经分化的影响
  • 4 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 刘晓丹,丁煌,邓常清

    关键词: 黄芪甲苷,三七总皂苷,骨髓间充质干细胞,脑缺血再灌注,凋亡,迁移,神经分化

    来源: 中草药 2019年23期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技

    专业: 中药学

    单位: 湖南中医药大学分子病理实验室,中西医结合心脑疾病防治湖南省重点实验室,细胞生物学与分子技术湖南省高校重点实验室

    基金: 湖南省自然科学基金项目(2018JJ3382),湖南省教育厅优秀青年项目(18B236),湖南省科技厅科技创新平台与人才计划——中医脑病临床研究中心(2017SK4005),湖南省自然科学创新群体基金:中医药防治心脑血管疾病基础研究

    分类号: R285.5

    页码: 5795-5801

    总页数: 7

    文件大小: 815K

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