融合蛋白TAT-RIG-I-GFP的原核表达及其跨膜递送

论文摘要

本研究旨在探讨融合蛋白TAT-RIG-I-GFP原核表达载体的构建并验证TAT在跨膜递送中的作用。首先设计了4对特异性引物,克隆了绿头鸭AnasplatyrhynchosRIG-I基因,构建了pET-TAT-RIG-I-GFP和pET-RIG-I-GFP原核表达载体;转化至感受态DE3细胞,经IPTG诱导表达,利用His60镍亲和层析柱纯化,进行SDS-PAGE;然后,将纯化后的上述两种表达蛋白分别孵育DF-1细胞;最后利用荧光显微镜观察是否在DF-1细胞产生相应的荧光。结果证实,携带有TAT的pET-TAT-RIG-I-GFP融合蛋白在DF-1细胞中显示出明显的绿色荧光;而不具有TAT的pET-RIG-I-GFP蛋白却不能显示绿色荧光。这表明携带TAT的融合蛋白已成功进入DF-1细胞,并在跨膜递送过程中发挥了关键作用。上述为进一步研制家禽的抗病毒药物奠定了基础。

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文章来源

类型: 期刊论文

作者: 盛晓丹,黄迪海,郭卉,刘霞,秦卓明

关键词: 反式激活蛋白,融合蛋白,跨膜递送

来源: 生物工程学报 2019年08期

年度: 2019

分类: 基础科学

专业: 生物学

单位: 山东省健牧生物药业有限公司,山东省农业科学院家禽研究所

基金: 山东省自然科学基金(No.ZR2014CP023)资助~~

分类号: Q78

DOI: 10.13345/j.cjb.190110

页码: 1463-1468

总页数: 6

文件大小: 1880K

下载量: 184

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