一种改良的Sprague Dawley新生大鼠视网膜Müller细胞培养方法

一种改良的Sprague Dawley新生大鼠视网膜Müller细胞培养方法

论文摘要

目的改良Sprague Dawley(SD)新生大鼠视网膜Müller细胞培养方法。方法取新生1~2 d的SD,分2 d完成视网膜Müller细胞的提取,第1天将眼球浸泡于含体积分数1%双抗的无血清高糖达尔伯克改良伊戈尔培养基(DMEM)中,置于37℃、含体积分数5%CO2的培养箱内过夜;第2天,去培养基,以2. 5 g·L-1胰蛋白酶消化眼球1 h,分离视网膜组织,加入含体积分数1%双抗和体积分数10%胎牛血清的高糖DMEM培养基,制备细胞悬液接种培养; 24 h后换液,6~8 d后传代,传至第4代,细胞免疫荧光染色法鉴定Müller细胞纯度。结果 Müller细胞贴壁生长良好,细胞体宽大,细胞质丰富,细胞核呈圆形或椭圆形,无神经元共生长,Müller细胞纯度> 95%。结论改良的SD新生大鼠视网膜Müller细胞培养方法操作简单,细胞纯度高。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 实验动物
  •   1.2 主要试剂与仪器
  •   1.3 方法
  •     1.3.1 Müller细胞原代培养
  •     1.3.2 Müller细胞传代与纯化
  •     1.3.3 视网膜神经元纯度鉴定
  •     1.3.4 Müller细胞纯度鉴定
  • 2 结果
  •   2.1 原代及传代培养细胞生长情况
  •   2.2 神经元纯度鉴定
  •   2.3 Müller细胞纯度鉴定
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 杨梅,范围,黄瑶,袁容娣

    关键词: 细胞培养,大鼠,视网膜,细胞

    来源: 新乡医学院学报 2019年09期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技,基础科学

    专业: 生物学,眼科与耳鼻咽喉科

    单位: 中国人民解放军陆军军医大学第二附属医院眼科

    基金: 国家自然科学基金资助项目(编号:81470630)

    分类号: R774.1;Q813.11

    页码: 815-818

    总页数: 4

    文件大小: 194K

    下载量: 65

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