导读:本文包含了鸡的输卵管生物反应器论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:输卵管,生物反应器,转基因,基因,蛋白,逆转录,载体。
鸡的输卵管生物反应器论文文献综述
宋政,牛俊伟,孙晓先,龚道清[1]（2013）在《转基因鸡输卵管生物反应器生产药用蛋白研究进展》一文中研究指出与哺乳动物生物反应器相比,鸡输卵管生物反应器因其经济、高效、稳定、周期短等多个潜在优势而被认为是最具开发前景的生产药用蛋白的技术平台之一。本文在介绍转基因鸡输卵管生物反应器生产药用蛋白研究方法的同时,重点分析了转基因鸡生产技术—逆转录病毒载体法、原始生殖细胞(PGCs)介导法和定点基因敲除-敲入技术。逆转录病毒载体法虽有很多优势,但难以掩盖其在生物安全性和实际应用中的不足;而应用piggyBac转座子转导PGCs介导的基因转移和表达系统也具有很大的潜在优势和应用前景;定点基因敲除-敲入技术定点整合的精确性优势使其在转基因动物生产和生物反应器开发方面具有广泛的应用前景。(本文来源于《中国家禽》期刊2013年19期）
王丽辉,杨鹏翔,丁宁[2]（2012）在《鸡输卵管生物反应器的研究进展》一文中研究指出随着人们对营养类蛋白、医用类蛋白需求量的增长,建立经济高效的生产技术平台成为转基因动物研究的重要领域,鸡输卵管生物反应器作为转基因鸡重要的应用器官得到越来越多的重视。目前,构建用于携带外源基因的高效表达载体和良好的导入方法是制备能够稳定生产外源基因转基因鸡的关键技术,文章对鸡输卵管生物反应器的研究进展进行了综述,并提出了存在的问题。(本文来源于《黑龙江畜牧兽医》期刊2012年17期）
李永双,石放雄,于福先,朱志伟,陈晓宇[3]（2011）在《家禽输卵管生物反应器的研究进展》一文中研究指出转基因生物反应器主要有血液生物反应器、乳腺生物反应器和家禽输卵管生物反应器叁类,由于家禽具有生长周期短、生产性能高、研究成本低,而且表达产物更接近天然状态和易于纯化等优点;因此,已成为转基因动物研究的热点之一。文章仅就家禽输卵管生物反应器的研究现状、卵清蛋白基因的结构、调控机理及输卵管特异性表达载体构建的研究作一综述。(本文来源于《黑龙江畜牧兽医》期刊2011年23期）
王安平,孙怀昌[4]（2009）在《重组禽腺联病毒介导的输卵管暂态生物反应器的初步研究》一文中研究指出将输卵管特异表达启动子调控的人组织激肽释放酶(human tissue kallikrein,hKLK1)表达盒插入至AAAV转移载体pAITR中,与AAAV包装载体pcDNA-ARC及腺病毒辅助质粒pHelper叁质粒利用磷酸钙沉淀法共转染AAV-293细胞,制备输卵管特异表达hKLK1的rAAAV。将获得的重组病毒以每只鸡2×1010病毒颗粒数翅静脉注射正常产蛋母鸡,RT-PCR结果显示hKLK1只在输卵管部位表达;酶活性检测结果表明:注射后第2天就可以检测到rhKLK1的活性,第3周表达量最高,达107.3U/ml,表达时间持续6周之久;用含rhKLK1的蛋清灌喂自发性高血压大鼠(SHR),可使其血压下降70mmHg,5天后回升到饲喂前水平。以上结果表明重组禽腺联病毒介导的鸡输卵管暂态生物反应器不仅具有很好的组织特异性,而且可指导外源基因长期稳定的表达。(本文来源于《中国生物工程杂志》期刊2009年12期）
喻晓亮,谢达平,燕海峰,胡雄贵,邓缘[5]（2009）在《鸡输卵管生物反应器研究进展》一文中研究指出鸡输卵管生物反应器是一种很有市场前景的生产药物蛋白的生物反应器。综述了激素对输卵管细胞和卵清蛋白基因的调控、输卵管组织特异性调控元件的研究、转基因鸡的制作途径、新型逆转录病毒载体在转基因鸡制作上的应用和国内研究现状、最新成果及发展前景等。(本文来源于《江西农业学报》期刊2009年03期）
满朝来,于晓龙[6]（2008）在《转基因鸡及输卵管生物反应器》一文中研究指出随着生物制药业的迅速发展,转基因鸡输卵管生物反应器正逐渐成为人们关注的焦点,转基因鸡以其卓越的优势必将成为科学研究的热点和生物制药领域的新兴产业之一。目前,转基因鸡最成功的制备方法即逆转录病毒介导法,并已成功制备出表达标记基因的转基因鸡。通过综述鸡作为生物反应器的优势、转基因鸡发展历程、逆转录病毒载体制备转基因鸡的方法过程和转基因鸡的研究进展,同时也讨论了转基因鸡的意义和可能存在问题。(本文来源于《中国农学通报》期刊2008年12期）
单崇丽[7]（2007）在《逆转录病毒法制备鸡输卵管生物反应器的前期探索》一文中研究指出基于禽蛋生物反应器独特的优点,转基因鸡输卵管生物反应器已成为转基因动物和生物制药研究领域中最有活力的热点。本研究首先分别探索了17月龄、6-9月龄以及激素刺激的雏鸡的输卵管上皮细胞的原代培养。通过脂质体转染法、CaCl2转染法以及电击转染法进行上皮细胞转染条件的摸索,其中以电击转染法最为有效,可以达到3-5%的转染效率。其次,本研究以增强型绿色荧光蛋白(eGFP)为报告基因,以人类促红细胞生成素(hEPO)为目的基因。在PCR扩增1.1kb鸡卵清蛋白5′调控序列(OV)、GFP、sGFP、EPO等基因序列基础上,将上述DNA片段连入pMD-18T载体,经筛选得到正确连接方向的重组子后,再经酶切、连接后,构成调控序列(OV)与基因片段(GFP、sGFP、EPO)的正确衔接。再通过酶切反应,将上述衔接片断切下,连入逆转录病毒表达载体pLNCX,构建的阳性载体分别命名为pLN-OV-GFP、pLN-OV-sGFP、pLN-OV-EPO。最后,将能够表达MLV(莫洛尼鼠白血病病毒)Gag和Pol基因的质粒载体以脂质体转染法转染HEK293细胞,经过抗性药物HisD(L-Histidinol dihydrochloride,L-组氨醇二盐酸盐)筛选,提取细胞基因组进行PCR鉴定,得到阳性细胞克隆。再将逆转录病毒表达载体pLN-OV-GFP、pLN-OV-sGFP经脂质体转染阳性克隆细胞,经G418筛选,提取细胞基因组进行PCR鉴定,得到整合有报告基因的病毒包装细胞系。综上所诉,本研究进行了不同鸡龄母鸡输卵管上皮细胞的原代培养,以及上皮细胞转染方法的摸索;成功构建了叁个逆转录病毒表达载体;制备了能够表达MLV(莫洛尼鼠白血病病毒)的Gag和Pol基因以及逆转录病毒载体pLN-OV-GFP、pLN-OV-sGFP的HEK293包装细胞系。旨在通过eGFP的表达来检测输卵管生物反应器系统的构建,为制作特异表达人类促红细胞生成素基因的鸡输卵管生物反应器奠定了基础。(本文来源于《哈尔滨工业大学》期刊2007-07-01）
房浩霞[8]（2006）在《暂态表达重组蛋白鸡输卵管生物反应器的优化》一文中研究指出随着重组DNA技术的飞速发展,已经出现了多种生产重组蛋白的表达系统,其中以转基因动物生物反应器,尤其是转基因哺乳动物的乳腺生物反应器和转基因家禽的输卵管生物反应器的优点最为突出,能在不损伤机体正常生理功能的条件下源源不断地获得表达产品。家禽具有繁殖周期短、生产性能高、研究成本较低等优点,其输卵管是生产蛋白质的天然“发酵罐”,更加适合作为生产重组蛋白的生物反应器。但由于家禽特殊的生殖生理特点,其转基因技术一直落后于其它动物。虽然近几年来相关技术有所突破,但家禽转基因研究仍有许多理论和技术难题有待突破,距离产业化开发仍有很远的路要走。为此,寻求禽类的转基因技术的突破和开辟新的研究方法已成为当前研究工作的重点。本课题组用自行克隆的鸡卵清蛋白(OV)基因表达调控序列构建成鸡输卵管定位表达载体,以人溶菌酶和组织激肽释放酶(hK1)基因为目的基因的鸡输卵管暂态表达试验结果表明,通过翅静脉注射一定剂量的重组载体后,能表达一定水平的重组酶并分泌到试验鸡的蛋清中,具有一定的开发利用价值。本研究在前期研究的基础上,以hK1基因为目的基因,通过对先前构建的鸡输卵管特异表达载体进行优化改造,旨在获得结构更为合理、表达水平更高、维持时间更长的表达载体。在先前构建的pOV3K载体的基础上,分别通过酶切消化或PCR扩增等方法,将其中3.0 kb的OV基因5′-调控序列的长度分步缩减,获得叁个新的重组载体分别命名为pOV4K、pOV5K和pOV6K。将此重组载体与25 kDa聚乙烯亚胺(polyethylenimine,PEI)混合,经翅静脉注射产蛋鸡,用标准方法检测蛋清中的重组酶活性,结果表明,含1.1 kb OV基因5′-调控序列的pOV6K表达水平和表达时间均不如含3.0 kb OV基因5′-调控序列的pOV3K,含2.1 kb OV基因5′-调控序列的pOV4K和含1.7 kb OV基因5′-调控序列的pOV5K与含3.0 kb OV基因5′-调控序列的pOV3K表达水平相当,说明1.7 kb OV基因5′-调控序列足以指导外源基因(本文来源于《扬州大学》期刊2006-05-01）
张传生[9]（2005）在《鸡X期胚盘细胞体外培养与输卵管生物反应器的研制》一文中研究指出鸡输卵管生物反应器研制已成为转基因研究热点之一。人们尝试应用多种方法研制鸡输卵管生物反应器,但至今没有取得令人满意的效果。因此探索更为有效的转基因鸡制备途径已成为目前研究的一个重要课题。应用鸡内源性的调控元件指导外源基因在鸡输卵管特定的表达是研制鸡输卵管生物反应器的一种全新策略,需要对家禽多能细胞体外长期培养和遗传修饰。因此本研究首先对胚盘细胞的进行体外培养、标记,探索对鸡早期胚盘细胞遗传修饰技术,继而构建可用于输卵管生物反应器研制的表达载体,取得如下结果: 1.克隆寿光鸡cENS2基因的U3R调控区,序列分析表明该调控区含有CES细胞特异的增强子B区;U3R调控区与pEGFP-N载体融合构建了鸡CES细胞特异表达载体pEGFP-cENS2-Promoter,通过转染胚盘细胞、CEF细胞验证其特异的启动子活性。 2.应用pEGFP-cENS2-Promoter转染不同区域的胚盘细胞从而从分子水平确定CES细胞或其前体细胞主要分布在胚盘明区。 3.以pEGFP-N作为阳性对照,应用pEGFP-cENS2-Promoter载体转染胚盘单层细胞并进行G418药物筛选,表明体外培养一周胚盘细胞依然具有部分细胞的干细胞特性,但难以获得增殖性能强的稳定整合的细胞克隆。 4.以BRL-3A细胞条件的基础培养基添加2%鸡血清,0.1mMβ-巯基乙醇,2mML-谷氨酰胺,10mM HEPES(PH7.6),100U/ml青霉素,100μg/ml链霉素,10ng/ml庆大霉素,20ng/ml伴白蛋白,胎牛血清及细胞因子为配制CES完全培养基,结合应用小鼠成纤维细胞饲养层,分离获得短期传代(3代)的具有胚胎干细胞表型(PAS、AKP染色阳性)的细胞克隆。 5.应用pEGFP-cENS2-Promoter载体对分散成单个X期胚盘细胞进行瞬时转染,应用CES完全培养基联合SNL饲养层对转染后的细胞继续培养、并进行G418筛选,可以延长标记细胞的体外培养时间,为对细胞遗传修饰奠定了技术条件。 6.以pLNHX载体为骨架,切去HSP70启动子同时插入OV-INF-IRES2-EGFP-PolyA表达盒,构建了两个(正反向)卵清蛋白基因启动子指导的猪β干扰素和绿色荧光基因共表达的逆转录病毒表达载体命名为pLNHX-OV-INF-IRES2-EGFP(±),测序验证表明各组件连接正确。 7.通过电泳阻滞实验确定DNA与PEI的N/P=3,配制pLNHX-OV-INF-IRES2-EGFP(+)/PEI溶液经翅静脉体内转染产蛋鸡,通过RT-PCR证明目的基因在输卵管(本文来源于《山东农业大学》期刊2005-05-25）
高波[10]（2005）在《表达人组织激肽释放酶鸡输卵管暂态生物反应器的研究》一文中研究指出为了构建鸡输卵管特异表达载体,根据已经发表的鸡卵清蛋白基因5′-和3′-调控区序列设计两对引物,用高保真PCR法从中国狼山鸡基因组DNA中分别扩增出长度各为3.0kb的卵清蛋白基因5′-和3′-调控区,将扩增产物克隆入pGEM-T载体,部分序列测定结果证明与国外发表的鸡卵清蛋白基因相应区域同源性为100%。将鸡卵清蛋白基因5′-和3′-调控区插入粘粒载体pHC20,获得的鸡输卵管特异表达载体命名为pOV1。为了证明构建的载体能有效驱动目的基因在鸡输卵管上皮细胞中表达,将绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因通过Xho Ⅰ位点克隆入pOV1载体,将获得的重组载体pOV1EGFP与脂质体或多聚阳离子(PEI)包裹后,分别转染产蛋鸡输卵管上皮细胞和成纤维细胞,转染后48 h在荧光显微镜下观察报告基因的表达,结果证明pOV1载体能有效驱动EGFP报告基因在输卵管上皮细胞中表达,而在鸡成纤维细胞中不表达。为了进一步优化pOV1载体的结构,用限制性内切酶将鸡卵清蛋白基因5′-和3′-调控区从pOV1载体中切出,然后克隆入切除CMV启动子和SV40序列的pcDNA3.0载体,获得的鸡输卵管特异表达载体命名为pOV2;将鸡卵清蛋白基因5′-调控区单独克隆入改造后的pcDNA3.0载体,获得的鸡输卵管特异表达载体命名为pOV3。将LacZ报告基因分别克隆入pOV1、pOV2、pOV3的5′-端调控区下游,获得的重组载体pOV1LacZ、pOV2LacZ和pOV3LacZ经基因转染剂PEI包裹后,分别经翅静脉注射产蛋鸡,然后将载体注射鸡扑杀,取其输卵管和内脏组织,分别用RT-PCR和酶活性检测法测定报告基因的表达,结果显示LacZ基因在注射鸡的肝、脾、肾、心等组织不表达,在输卵管膨大部表达,而且表达的重组酶能被分泌到鸡蛋的蛋清中。载体注射前注射雌激素对报告基因的表达具有促进作用,在相同的注射剂量下,pOV3LacZ的表(本文来源于《扬州大学》期刊2005-05-01）
鸡的输卵管生物反应器论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
随着人们对营养类蛋白、医用类蛋白需求量的增长,建立经济高效的生产技术平台成为转基因动物研究的重要领域,鸡输卵管生物反应器作为转基因鸡重要的应用器官得到越来越多的重视。目前,构建用于携带外源基因的高效表达载体和良好的导入方法是制备能够稳定生产外源基因转基因鸡的关键技术,文章对鸡输卵管生物反应器的研究进展进行了综述,并提出了存在的问题。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
鸡的输卵管生物反应器论文参考文献
[1].宋政,牛俊伟,孙晓先,龚道清.转基因鸡输卵管生物反应器生产药用蛋白研究进展[J].中国家禽.2013
[2].王丽辉,杨鹏翔,丁宁.鸡输卵管生物反应器的研究进展[J].黑龙江畜牧兽医.2012
[3].李永双,石放雄,于福先,朱志伟,陈晓宇.家禽输卵管生物反应器的研究进展[J].黑龙江畜牧兽医.2011
[4].王安平,孙怀昌.重组禽腺联病毒介导的输卵管暂态生物反应器的初步研究[J].中国生物工程杂志.2009
[5].喻晓亮,谢达平,燕海峰,胡雄贵,邓缘.鸡输卵管生物反应器研究进展[J].江西农业学报.2009
[6].满朝来,于晓龙.转基因鸡及输卵管生物反应器[J].中国农学通报.2008
[7].单崇丽.逆转录病毒法制备鸡输卵管生物反应器的前期探索[D].哈尔滨工业大学.2007
[8].房浩霞.暂态表达重组蛋白鸡输卵管生物反应器的优化[D].扬州大学.2006
[9].张传生.鸡X期胚盘细胞体外培养与输卵管生物反应器的研制[D].山东农业大学.2005
[10].高波.表达人组织激肽释放酶鸡输卵管暂态生物反应器的研究[D].扬州大学.2005
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