p53基因3′UTR双荧光素酶报告质粒的构建及其与miRNA-2127靶向关系的验证

论文摘要

为了验证miRNA-2127与p53基因的靶向关系,利用生物信息学软件预测p53与miRNA-2127的结合位点,全基因合成法合成该结合位点的野生型与突变型模板,并将其克隆到pmiR-RB-REPORTTM双荧光素酶报告载体中,构建野生型与突变型重组双荧光素酶报告质粒。将293T细胞分为4组,分别共转染野生型报告质粒+阴性对照（NC）、野生型报告质粒+miRNA-2127、突变型报告质粒+NC、突变型报告质粒+miRNA-2127。检测各组细胞中荧光素酶活性差异,结果显示:共转染了野生型报告质粒+miRNA-2127的293T细胞与共转染了野生型报告质粒+NC组相比,荧光素酶活性显著降低（P<0.05）;且突变型报告质粒+miRNA-2127组的相对荧光素酶活性显著高于野生型报告质粒+miRNA-2127（P<0.05）,说明miRNA-2127能够靶向调控p53基因,且结合位点位于3′UTR区369—375间。

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文章来源

类型: 期刊论文

作者: 张玉霞,袁小远,王友令,孟凯

关键词: 双荧光素酶报告系统

来源: 山东农业科学 2019年01期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学

单位: 山东省农业科学院家禽研究所

基金: 山东省自然科学基金项目(ZR2017BC039),山东省农业科学院高层次人才及创新团队引进计划项目,山东省农业科学院青年科研基金项目(2015YQN61)

分类号: Q78

DOI: 10.14083/j.issn.1001-4942.2019.01.003

页码: 14-17

总页数: 4

文件大小: 385K

下载量: 483

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标签：双荧光素酶报告系统论文;