导读:本文包含了时间分辨荧光法论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:荧光,时间,免疫,蛋白,毒素,可溶性,血清。
时间分辨荧光法论文文献综述
何聚莲,谢慈嘉,杨皓云,龙彩云,梁秀珍[1](2019)在《时间分辨荧光免疫法检测TP-Ab在梅毒筛查试验中的应用价值》一文中研究指出目的对时间分辨荧光免疫法(TRIFMA)检测梅毒抗体(TP-Ab)试验数值进行分析,探讨适合梅毒的筛查方法和流程。方法收集2018年8 711例临床血清样本,采用TRIFMA检测梅毒特异性抗体,经TRIFMA检测TP-Ab的阳性血清样本280份,用TPPA对这280份标本进行复检,得到TRIFMA检测TP-Ab的敏感度、特异度;采用SPSS 19.0软件做统计学处理,绘制TP-Ab的TRIFMA检测数值受试者工作特性(ROC)曲线,用卡方检验验证TRIFMA法检测的数值有无性别年龄差异;将TRIFMA值从低到高依次分为13组,进一步探讨TRIFMA不同的值区间可信度以及最佳诊断临界点。结果 TRIFMA检测TP-Ab的阳性率为3.21%,诊断准确度为99.54%;TRIFMA检测的假阳性无性别差异(P> 0.05),但假阳性率随年龄的增高有升高的趋势;复检样本中S/CO为1≤X <5组阳性符合率为10.81%,S/CO为5≤X <10组阳性符合率为61.11%,S/CO为≥10组阳性符合率为100%。叁组符合率差异有统计学意义(P <0.05)。TRIFMA的最佳检测能效区间为7.435~13.742;可信度最高的TRIFMA检测值约为7.651,此时敏感度为0.958,特异度为0.975,值均大于0.7。结论合理确定TRIFMA检测TP-Ab的最佳诊断界点和不同的值区间可信度,其灵敏度和特异度较高,误诊率较低,对梅毒筛查具有良好的诊断价值。(本文来源于《皮肤病与性病》期刊2019年05期)
余治[2](2019)在《时间分辨荧光免疫方法在乙肝血清标志物检测方面的临床意义和应用价值》一文中研究指出目的分析在乙肝血清标志物检测方面应用时间分辨荧光免疫方法的意义和价值。方法 2017年1月~2019年3月时间段内,挑选乙肝病毒患者200例作为研究对象,采用时间分辨荧光免疫方法与酶联免疫吸附试验对乙肝血清标本实施标志物的定量和定性测量。结果与酶联免疫吸附试验法相比较,时间分辨荧光免疫方法的抗-HBs、抗-HBe以及抗-HBc的检出敏感度均显着较高(P<0.05)。结论通过应用时间分辨荧光免疫方法可有效检测乙肝血清标志物,灵敏度较高。(本文来源于《临床医药文献电子杂志》期刊2019年77期)
文蛟龙,张璐[3](2019)在《时间分辨荧光分析法检测血清中妊娠相关蛋白A对孕早期唐氏筛查的意义》一文中研究指出目的探讨应用时间分辨荧光分析法检测孕早期妇女血清中妊娠相关蛋白A(pregnancy associated plasma protein A,PAPP-A)对唐氏筛查的临床意义。方法选取2017年6月-2017年12月期间在本院就诊的150例孕周为9~13周的妇女为研究对象,采用时间分辨荧光分析法检测孕妇血清PAPP-A水平,并按年龄、BMI指数分组比较,以羊水细胞染色体核型确诊唐氏综合征,评价PAPP-A对孕早期唐氏筛查的作用。结果孕早期妇女血清PAPP-A水平随孕周增加而呈上升趋势(P<0.05);以孕周为12周的孕妇为例,血清PAPP-A水平随孕妇年龄增长而呈下降趋势(P<0.05),孕早期妇女血清PAPP-A水平随BMI指数增加而呈下降趋势(P<0.05);随访结果显示,孕早期血清PAPP-A水平相对较低的孕妇,其生育唐氏患儿的概率较大。结论血清妊娠相关蛋白A可作为孕早期唐氏筛查的一项评价指标,其对妊娠结局预判有一定参考价值。(本文来源于《中国生育健康杂志》期刊2019年05期)
吕梦雨,牛晓君,彭志芳,胡蹦,荣天悦[4](2019)在《时间分辨荧光免疫分析在环境中的应用进展》一文中研究指出时间分辨荧光免疫分析技术(TRFIA)作为一种新型的超微量分析技术,不断应用于环境痕量分析领域,在检测环境中的有机污染物、生物毒素等方面发挥了重大作用。该文论述了近年来开发的TRFIA新系统,阐述了TRFIA在检测环境中的药物残留、生物毒素及化工试剂等方面的研究进展,并在此基础上对其应用前景进行了分析,展望了其在检测新兴有机污染物方面的巨大潜力。(本文来源于《环境科学与技术》期刊2019年08期)
温恬,黄超,曾晓燕,史凤娟,郭喜玲[5](2019)在《I型志贺毒素时间分辨荧光免疫分析方法的建立》一文中研究指出目的构建基于时间分辨荧光免疫分析技术(TRFIA)的高灵敏性、高特异性的I型志贺毒素(StxI)双抗体夹心免疫检测法,用于产志贺毒素大肠杆菌(STEC)感染的临床快速诊断。方法采用两株针对StxI不同表位的单克隆抗体2F6-F8和8E7-E6,构建双抗体夹心TRFIA,并评价该方法的灵敏度、特异性以及稳定性;以PCR检测stxI基因结果为金标准,以TRFIA、ELISA、Duopath~?Verotoxins免疫胶体金检测试剂盒,检测54例StxI毒素粗提物,比较灵敏度、特异性、阳性预测值、阴性预测值和与PCR法的一致性。结果建立的以StxI为靶向分子的TRFIA,可以在2h内完成对StxI检测,检测最大稀释倍数为1:1 000的StxI阳性菌株毒素粗提物样本,灵敏度比ELISA提高了约2个数量级。Stx I的TRFIA与StxII型无交叉反应,检测结果在1个月内仍保持较高稳定性。与PCR方法相比,TRFIA灵敏度(93.8%)高于ELISA(82.4%)和Duopath~?Verotoxins免疫胶体金(57.1%),差异有统计学意义(P<0.05);其特异性(100.0%)、阳性预测值(100.0%)、阴性预测值(97.4%)均大于等于ELISA(分别为97.2%、93.3%、92.1%)和Duopath~?Verotoxins免疫胶体金(分别为100.0%、100.0%、87.0%);TRFIA检测结果与PCR一致性(Kappa=0.955)高于ELISA(Kappa=0.809)法和Duopath~?Verotoxins免疫胶体金(Kappa=0.664)。结论成功构建StxI-TRFIA快速检测方法检测样品中StxI毒素,为TRFIA在毒素检测方面的推广应用提供了依据。(本文来源于《江苏预防医学》期刊2019年04期)
Sobia,Niazi[6](2019)在《基于适配体功能化时间分辨荧光纳米探针的真菌毒素检测方法研究》一文中研究指出食品安全问题是各国政府和科学家面临的主要挑战之一。真菌毒素是由真菌产生的有毒次生代谢产物,能够导致人类和动物死亡。目前,人们已从农业科学,环境科学、免疫学、药理学和医学等多方面对真菌毒素展开了认真的研究。由于色谱法和传统免疫分析法的不足,所以需要开发创新和稳定的方法来对真菌毒素进行适宜、灵敏和快速的检测。正因如此,各国都在研制和发展一次性适配体传感器/生物传感器,用以识别真菌毒素。近年来,研究者们开发了多种针对各类真菌毒素的荧光适配体传感器,而时间分辨荧光技术与适配体相结合的应用才刚刚出现。时间分辨荧光技术(TRF)可以有效消除背景荧光,具有较高的噪比。通过设置一定的延迟时间,可以区分样品中所含荧光物质的荧光寿命,从而提高检测的灵敏度。基于此,本研究中,合成了几种时间分辨的荧光纳米材料并对其进行表征,并结合多种纳米材料(如磁性纳米材料、二硫化钨、石墨烯氮化碳纳米片)及相应技术(时间分辨荧光技术、磁分离技术、滚环扩增技术)等,构建了一系列快速,简单,灵敏,高效的适配体传感器用于检测多种真菌毒素。首先,基于已报道的玉米赤霉烯酮(ZEN)适配体序列,构建了一种新颖、高灵敏、强亲和性的时间分辨荧光适配体传感器用于ZEN检测。合成了镧系元素(Ln~(3+))掺杂的时间分辨荧光纳米材料(NaYF_4:Ce/Tb)和氨基化Fe_3O_4磁性纳米材料(MNPs),并对其进行了表征。该传感器利用MNPs标记的ZEN适体作为捕获探针,并用适配体互补链DNA(cDNA)标记的TRFL纳米颗粒作为信号探针。在优化条件下,在544 nm处时间分辨荧光强度对应的ZEN检测范围为0.001~10 ng mL~(-1),相关系数R~2=0.9920,检测限(LOD)为0.21 pg mL~(-1)。在该方法中,适配体传感器的特异性通过使用其他真菌毒素来确证,结果表明,该适配体仅特异性地识别ZEN。此外,还将本适配体传感器应用于玉米和小麦实际样品中ZEN的检测分析,并将检测结果与现有方法进行了比较。基于这些结果,表明使用基于该适配体传感器的生物测定法检测食品和农产品中的ZEN是快速、简便的。其次,由于多种真菌毒素同时存在导致的危害更多样化和严重,同时识别两种真菌毒素赭曲霉毒素A(OTA)和伏马毒素B_1(FB_1)的方法是必要的。为了这一目标,在前述研究的基础上另一种Ln~(3+)掺杂的时间分辨荧光纳米材料NH_2-Eu/DPA@SiO_2被合成。NaYF_4:Ce/Tb和NH_2-Eu/DPA@SiO_2两种纳米颗粒可以在同一波长(273 nm)下被激发,并且它们的发射光谱不重迭。基于这些发现,并结合已报道的OTA和FB_1适配体序列,联合使用两种时间分辨荧光纳米颗粒构建了一种双重识别的生物传感器,用于同时识别OTA与FB_1两种真菌毒素。在制备过程中,NaYF_4:Ce,Tb和NH_2-Eu/DPA@SiO_2 NPs分别与FB_1适配体体和OTA适配体cDNA偶联作为信号探针,同时两种适配体与MNPs共轭充当捕获探针。在优化条件下,544 nm和618 nm处的时间分辨荧光强度分别为Tb~(3+)和Eu~(3+)的响应信号,被分别用于测定FB_1(Y=19177.1+(-12054.4)x,R~2=0.9917)和OTA(Y=4138.8+(-11182.6)x,R~2=0.9924)。FB_1和OTA的检测限(LOD)分别为0.019 pg mL~(-1)和0.015 pg mL~(-1),远低于已报道的同时检测OTA和FB_1的方法,线性范围为0.0001~0.5 ng mL~(-1)。通过将检测结果与ELISA方法进行比较,表明该适配体传感器能有效地用于玉米样品中的FB_1和OTA定量检测。这是基于时间分辨荧光(TRF)的适配体传感器用于同时检测玉米中两种重要真菌毒素的首次报道。构建的适配体传感器具有用于检测食品安全领域毒素的潜力。第叁,叁种真菌毒素玉米赤霉烯酮(ZEN)、单端孢霉烯族毒素A(T-2)和黄曲霉毒素B_1(AFB_1)被同时检测。合成了3色镧系元素(Ln~(3+)=Dy~(3+),Tb~(3+),Eu~(3+))掺杂的时间分辨荧光纳米材料(KYF_4:Dy~(3+),KYF_4:Tb~(3+),KYF_4:Eu~(3+))并对其进行了表征。通过利用二硫化钨(WS_2)纳米片的猝灭效率及WS_2与DNA分子之间的相互作用,多色Ln~(3+)掺杂的TRFNPs(在相同波长下激发)被用于构建一种用于同时检测3种真菌毒素的“turn-on”型适配体传感器。分别用ZEN,T-2和AFB_1适配体对KYF_4:Dy~(3+),KYF_4:Tb~(3+),and KYF_4:Eu~(3+)时间分辨荧光纳米颗粒进行功能化修饰并作为识别探针,WS_2纳米片作为荧光猝灭剂。在优化条件下,488,544和619 nm处的时间分辨荧光强度分别与Dy~(3+)、Tb~(3+)和Eu~(3+)响应,用于测定ZEN(R~2=0.9947),T-2(R~2=0.9972)和AFB_1(R~2=0.9909)。构建的适配体传感器对ZEN、T-2和AFB_1具有高选择性和高灵敏性,LOD分别为0.51、0.33和0.40pg mL~(-1)。此外,经干扰试验表明,该适配体传感器可用于同时检测叁种真菌毒素而不会相互干扰。构建的适配体传感器有效地用于定量检测玉米样品中的ZEN、T-2和AFB_1,并将检测结果与ELISA方法进行比较。结果显示,所构建的适配体传感器均一性好,可在一小时内实现多个靶标的同时检测。因此,所构建的基于该传感器的检测方法可作为其他单一检测方法的替代方法,例如,酶联免疫吸附法(ELISA),也可用于替换适配体各种靶标检测的多重分析。第四,基于上述方法,进一步采用滚环扩增技术(RCA)来提高检测方法的灵敏度。通过使用被修饰的KYF_4:Eu~(3+)作为信号探针以及石墨烯氮化碳纳米片(g-C3N4)作为猝灭剂,实现了黄曲霉毒素M_1(AFM_1)的荧光检测。该传感器以AFM_1的适配体作为识别元件,同时适配体也作为DNA合成引物。与互补链DNA(cDNA)连接的时间分辨纳米颗粒作为信号探针。在靶标不存在的情况下,滚环模板(RCT)被设计成与靶适配体的两端互补,成功连接到靶适配体并开始滚环扩增反应。将与目标适配体互补的TRFNPs-cDNA信号探针退火至扩增的RCA产物(RCAP)的多个位点以形成RCAP/TRFNP-cDNA双链结构。该RCAP/TRFNPs-cDNA双链结构吸附在g-C_3N_4单层上的能力减弱,导致荧光增强。当AFM_1存在时,由于适配体和靶标的特异性结合形成适体-靶标复合物,致使适配体与RCT无杂交反应,也无法形成RCA和双链体结构。因此,游离的TRFNPs-cDNA被吸附到g-C_3N_4单层上。这种“signal-off”方法可以避免在传感系统中吸附非特异性的DNA。该检测方法能达到比已报道的AFM_1检测方法更低的检测限(0.0194 pg mL~(-1))。此外,它具有高灵敏度、高特异性,回收率在92.0~99.8%之间,可用于检测牛奶中的AFM_1。结果表明,基于g-C_3N_4与RCA结合的荧光检测法是用于定量检测小分子的有效方法。总之,使用Ln~(3+)离子化合物的长时间荧光发射可以有效地降低背景信号。因此,与常规荧光测定方法相比,时间分辨荧光检测法在基于荧光的生物检测中提供更高信噪比。本研究中,结合时间分辨荧光检测技术,磁分离技术和滚环扩增信号放大技术,构建了多种新型适配体传感器,并成功应用于实际食品样品中的真菌毒素检测。本研究可以为改善真菌毒素的检测和监测技术提供了新思路和支持。(本文来源于《江南大学》期刊2019-06-01)
陈华鑫[7](2019)在《均相时间分辨荧光免疫分析检测降钙素原方法的建立》一文中研究指出本研究成功合成出两种稀土荧光螯合剂并对通过核磁氢谱与质谱对结构进行确认,对它们的荧光性质的研究结果显示两种稀土荧光螯合剂均保持有叁价铕离子的特征激发峰与发射峰,其中Eu~(3+)?bpy.bpy.py(CO_2H)_2的最大激发波长为312nm,最大发射波长为598nm和615nm,Eu~(3+)?bpy.bpy.py[CONH(CH_2)NH_2]_2的最大激发波长为311nm,最大发射波长为597nm和616nm。两种稀土螯合剂的荧光强度均与浓度呈线性相关,线性方程分别为Eu~(3+)?bpy.bpy.py(CO_2H)_2:y=310x-565.98,R~2=0.999;Eu~(3+)?bpy.bpy.py[CONH(CH_2)NH_2]_2:y=310x-1930,R~2=0.999。荧光寿命分别为1064μs与398μs;量子产率分别为10.1%与12.1%。两种稀土螯合剂的荧光性质满足时间分辨荧光免疫分析的需求。以Eu~(3+)?bpy.bpy.py[CONH(CH_2)NH_2]_2为基础进行修饰,合成并通过质谱确认得到Eu~(3+)?bpy.bpy.py[CONH(CH_2)NHCOCH_2OCH_2COOH_2]_2。最大激发波长为312nm,最大发射波长为598nm和615nm,荧光强度与浓度线性方程为y=310x-1041.4,R~2=0.999。利用DCC/NHS作为脱水剂,在DMAP的催化作用下使螯合剂与抗降钙素原检测抗体(anti-PCT detection antibody)相结合。优化标记条件后通过发现Eu~(3+)?bpy.bpy.py[CONH(CH_2)NHCOCH_2OCH_2COOH_2]_2与抗体最佳标记条件为:螯合剂与DCC/NHS的摩尔比为1:4:6,室温反应6h,与抗体蛋白以20:1的摩尔比反应10h,可以得到标记比为10的稀土荧光螯合剂标记抗体。ELISA检测结果确认标记后抗体蛋白效价为1:800。利用标记的抗降钙素原检测抗体(anti-PCT detection antibody)与抗降钙素原包被抗体(anti-PCT coating antibody)构建检测降钙素原的时间分辨免疫荧光分析方法,实验结果表明,anti-PCT coating antibody的最佳稀释比例为1:200,anti-PCT detection antibody的最佳稀释比例为1:400,最佳孵育时间为60min,在0.5~50ng/mL浓度范围内,检测荧光信号强度与抗原浓度呈线性相关,线性方程为y=2552.6x+4.8222,R~2=0.9928,灵敏度为0.5ng/mL,CV<10%,重复性良好,与常见临床标志物AFP,CEA,CRP无交叉反应。(本文来源于《长春理工大学》期刊2019-06-01)
王旭,孙雨,王睿男,肖颖,蒋菲[8](2019)在《牛血清中口蹄疫病毒非结构蛋白抗体时间分辨荧光免疫分析检测方法的建立》一文中研究指出为研究快速定量检测牛血清中口蹄疫病毒非结构蛋白抗体的方法,试验通过优化抗原表达条件等步骤,在大肠杆菌原核表达系统中表达可溶性的3A-3B融合蛋白,并基于纯化的可溶性融合蛋白建立口蹄疫病毒非结构蛋白抗体时间分辨荧光免疫分析检测试剂盒。结果表明:建立的方法能够检测牛血清中的口蹄疫病毒非结构蛋白抗体,敏感性高,特异性强,对其他相关的牛类病原无交叉反应,其组内与组间变异系数分别低于10%和15%,具有良好的重复性。对300份临床牛血清样品进行检测,同Procheck公司的口蹄疫非结构蛋白抗体试剂盒进行比较,阳性样品符合率96%,阴性样品符合率93.3%,总的符合率95.7%。重复性试验组内与组间变异系数均小于10%。文章首次建立了口蹄疫病毒非结构蛋白抗体时间分辨荧光免疫分析检测方法,同传统的ELISA方法相比,该检测方法特异性相当、敏感性更高,操作更简单、快速,具有较高的应用推广价值。(本文来源于《中国草食动物科学》期刊2019年03期)
赵颖,王瑶,肖盟,吴卫,杨启文[9](2019)在《一种基于时间分辨免疫荧光法的免疫分析仪检测降钙素原的性能评估》一文中研究指出目的评估一种基于时间分辨免疫荧光法的免疫分析仪检测降钙素原(PCT)的性能。方法采用第叁方质控品朗道PCT质控品两个水平(高值和低值)对其进行精密度检测。分别采用朗道高值质控品和患者混合高值血浆对其进行线性检测。选取103例患者的血液标本,与参考方法生物梅里埃VIDAS 30进行方法学比对。结果精密度方面,朗道两个水平的质控待评估方法变异系数均<10%。线性方面,采用朗道高值质控和患者混合高值血浆来检测线性范围,待考核方法检测值与理论值的r2均达到>0.99的要求。采用临床标本进行相关性分析时,测量结果的差值对均值的Bland-Altman分析及测量结果比值对均值的Bland-Altman分析显示二者的相关性较好。待考核方法与VIDAS 30的Spearman相关系数为0.98,P<0.000 1。结论待考核方法定量检测全血PCT,操作简便,具有较好的精密度,在检测临床标本时与生物梅里埃VIDAS 30检测PCT有较好的一致性,适用于急诊检查和床旁检测。(本文来源于《检验医学与临床》期刊2019年10期)
孙雨,宋晓晖,董浩,赵柏林,曲萍[10](2019)在《小反刍兽疫病毒双抗原夹心时间分辨荧光免疫测定方法的建立》一文中研究指出通过优化大肠埃希菌密码子、优化表达条件等方法,在大肠埃希菌表达系统中成功获得了可溶性的N蛋白与NH融合蛋白。进一步基于纯化的可溶性N蛋白与NH融合蛋白建立了小反刍兽疫病毒双抗原夹心时间分辨荧光免疫测定方法。该方法敏感性高,特异性强,能够特异性的检测羊血清中的小反刍兽疫病毒抗体,与其他相关疫病病原无交叉反应;重复性试验组内与组间变异系数均小于10%。对292份临床血清样品进行检测,与法国IDVET竞争ELISA试剂盒比较,阳性样品符合率为92.47%,阴性样品符合率为97.26%,总的符合率为94.86%。该方法与传统的ELISA方法相比,具有敏感性、特异性相当,操作简单、快速,具有较高的推广应用价值。(本文来源于《动物医学进展》期刊2019年04期)
时间分辨荧光法论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
目的分析在乙肝血清标志物检测方面应用时间分辨荧光免疫方法的意义和价值。方法 2017年1月~2019年3月时间段内,挑选乙肝病毒患者200例作为研究对象,采用时间分辨荧光免疫方法与酶联免疫吸附试验对乙肝血清标本实施标志物的定量和定性测量。结果与酶联免疫吸附试验法相比较,时间分辨荧光免疫方法的抗-HBs、抗-HBe以及抗-HBc的检出敏感度均显着较高(P<0.05)。结论通过应用时间分辨荧光免疫方法可有效检测乙肝血清标志物,灵敏度较高。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
时间分辨荧光法论文参考文献
[1].何聚莲,谢慈嘉,杨皓云,龙彩云,梁秀珍.时间分辨荧光免疫法检测TP-Ab在梅毒筛查试验中的应用价值[J].皮肤病与性病.2019
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[9].赵颖,王瑶,肖盟,吴卫,杨启文.一种基于时间分辨免疫荧光法的免疫分析仪检测降钙素原的性能评估[J].检验医学与临床.2019
[10].孙雨,宋晓晖,董浩,赵柏林,曲萍.小反刍兽疫病毒双抗原夹心时间分辨荧光免疫测定方法的建立[J].动物医学进展.2019