论文摘要
以提高溶液中抗黄曲霉毒素B1单克隆抗体纯度为目的,采用来自小鼠腹水、经辛酸-饱和硫酸铵法提取的粗品单抗溶液为原料,通过单因次和响应面优化试验,建立了两步超滤法的纯化工艺。第一次超滤采用200 kD截留分子量的超滤膜。第二次超滤采用50 kD截留分子量的超滤膜,超滤温度25℃、超滤压力0.12 MPa、浓缩倍数6倍。取两步超滤的中间截留液,单抗纯度可达80.5%,而提取率仅下降8.7%。纯化工艺对单抗效价没有影响,基本脱除了溶液中的硫酸铵。该工艺可用于大规模制备高质量的抗AFB1单克隆抗体。
论文目录
1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 实验材料 1.1.2 试剂 1.1.3 仪器设备 1.2 方法 1.2.1 腹水制备 1.2.2 溶液配制 （1）醋酸钠缓冲溶液（pH4.0, 60 mmol/L） （2）醋酸钠缓冲溶液（pH4.4, 0.2 mol/L） （3） PBS缓冲溶液（pH7.4, 0.1 mol/L） （4） PBS缓冲溶液（pH7.4, 0.01 mol/L） （5） PBS缓冲溶液（pH7.4, 150 mmol/L） 1.2.3 粗品单抗的提取 1.2.4 粗品单抗的纯化 （1）不同截留分子量超滤膜的选择 （2）第二次超滤纯化工艺的单因次实验 （3）第二次超滤纯化工艺的响应面实验 1.2.5 检测方法 （1）总蛋白浓度 （2）单抗浓度和单抗纯度 （3）单抗提取率 （4）单抗效价 （5）硫酸铵浓度 1.2.6 数据统计与分析2 结果与讨论 2.1 不同截留分子量超滤膜的选择 2.2 第二次超滤纯化工艺的单因次实验 2.2.1 超滤温度对单抗纯化的影响 2.2.2 超滤压力对单抗纯化的影响 2.2.3 浓缩倍数对单抗纯化的影响 2.3 第二次超滤纯化工艺的响应面实验 2.3.1 响应面实验结果 2.3.2 响应面实验的交互作用分析 2.4 各步骤单抗溶液的分析3 结论
文章来源
类型: 期刊论文
作者: 陆丽婷,石文婷,祁苏娴,张海涛,徐剑宏,祭芳
关键词: 黄曲霉毒素,单克隆抗体,超滤,纯化
来源: 粮食与食品工业 2019年04期
年度: 2019
分类: 工程科技Ⅰ辑,工程科技Ⅱ辑
专业: 无机化工,有机化工,工业通用技术及设备
单位: 江苏省苏微微生物研究有限公司,江苏省农业科学院农产品质量安全与营养研究所
基金: 2017年江苏省农业科技自主创新基金项目[CX(17)1003]
分类号: TQ028.8
页码: 54-61
总页数: 8
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标签：黄曲霉毒素论文; 单克隆抗体论文; 超滤论文; 纯化论文;
