导读:本文包含了等电聚焦论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:毛细管,电荷,电泳,异质,蛋白,抗体,蛋白质。
等电聚焦论文文献综述
刘让东,许歆瑶,王薇薇,王彦,闫超[1]（2019）在《固化pH梯度毛细管等电聚焦整体柱的制备及在蛋白质等电点分析中的应用》一文中研究指出通过聚合物原位聚合反应,制备了部分填充的毛细管整体柱。pH 3～10的载体两性电解质被固化在该毛细管整体柱上。在引入八通进样阀、叁通阀和四通连接单元的基础上,构建了适用于固化pH梯度毛细管等电聚焦整体柱(M-IPG)的平台。在蛋白质药物测定过程中,用M-IPG柱和羟丙基纤维素(HPC)涂层毛细管柱同时对曲托珠单抗和依那西谱的等电点进行了测定。结果表明,两种等电聚焦柱都能够同时分离混合蛋白质样品并测定蛋白质类药物中单抗和融合蛋白质的等电点(pI), M-IPG柱所测的pI值与HPC涂层毛细管柱测定的结果基本一致,表明了该柱在进一步构建多维分离平台进行蛋白质组学研究方面的潜力。(本文来源于《色谱》期刊2019年10期）
武刚,于传飞,王文波,李萌,王兰[2]（2019）在《成像毛细管等电聚焦电泳分析单克隆抗体电荷异质性的方法学验证及系统适用性对照品的制备》一文中研究指出目的:采用成像毛细管等电聚焦电泳(imaging capillary electrofocusing electrophoresis,iCIEF)分析单抗的电荷异质性,组织国内多家质控实验室对该方法进行验证;制备用于iCIEF法的系统适用性对照品。方法:邀请19个质控实验室,应用3种品牌(4种型号)的iCIEF设备进行方法学的预验证,确定该方法的关键试剂、仪器参数设置、数据分析要点等;依据ICH_Q2_R1指导原则、2015年版《中华人民共和国药典》(简称《中国药典》)通则9101制定方法学验证方案,邀请11个质控实验室参加验证;制备基于iCIEF法的系统适用性对照品并利用SEC-HPLC、IEC-HPLC、非还原CE-SDS进行稳定性评价。结果:预验证结果显示:等电点标记物(pI Marker)为关键试剂;不同品牌、型号的iCIEF检测设备参数设置无需统一;数据处理可采用自动积分、手动积分相结合的形式。验证结果:完成了该方法的特异性、准确度、精密度、线性及其范围、耐用性、定量下限的评价;制备了iCIEF法的系统适用性对照品,并进行了加速及长期稳定性评价,制定了相应的合格标准。结论:首次组织了iCIEF的方法学验证,为《中国药典》标准提高提供方法学验证依据,为该方法制备了系统适用性对照品。(本文来源于《药物分析杂志》期刊2019年01期）
武刚,于传飞,王文波,王兰[3]（2018）在《成像毛细管等电聚焦电泳测定单抗等电点的若干影响因素》一文中研究指出目的:评价尿素、聚焦时间、pI标记物3个因素对成像毛细管等电聚焦电泳(iCIEF)测定抗HER2单抗、抗VEGF单抗主峰等电点结果的影响。方法:应用iCIEF技术,通过添加尿素(2 mol·L~(-1)),改变聚焦时间(6、8、10 min)和pI标记物的数量(2个/6个),对2种单抗制品主峰等电点进行测定。结果:抗HER2单抗使用6个pI标记物,添加终浓度2 mol·L~(-1)的尿素,聚焦时间6、8、10 min,主峰等电点分别为9.01±0.00、9.02±0.01、9.06±0.01;使用6个pI标记物,不添加尿素,聚焦时间6、8、10 min,主峰等电点分别为9.07±0.01、9.08±0.01、9.09±0.01;使用2个pI标记物,主峰等电点范围为9.00～9.14(含尿素)、9.04～9.17(不含尿素)。抗VEGF单抗使用6个pI标记物,添加终浓度2 mol·L~(-1)的尿素,聚焦时间6、8、10 min,主峰等电点分别为8.32±0.00、8.35±0.00、8.35±0.07;使用6个pI标记物,不添加尿素,聚焦时间6、8、10 min,主峰等电点分别为8.39±0.01、8.39±0.02、8.41±0.01;使用2个pI标记物,主峰等电点范围为8.26～8.48(含尿素)、8.34～8.49(不含尿素)。结论:使用iCIEF评价所选单抗等电点时,尿素、聚焦时间两因素对等电点的计算结果影响较小,pI标记物的选择对等电点的计算结果影响明显。(本文来源于《药物分析杂志》期刊2018年10期）
李响,于雷,郭莹,周勇,饶春明[4]（2018）在《全柱成像毛细管等电聚焦电泳法评价IL-15融和蛋白的电荷异质性》一文中研究指出目的:建立全柱成像毛细管等电聚焦电泳(capillary isoelectric focusing-whole column imaging detection,c IEF-WCID)方法评价白细胞介素-15(IL-15)融和蛋白的电荷异质性。方法:通过比较5种不同的两性电解质,以及不同尿素浓度(0,3,6和8 mol·L-1)对实验结果的影响,优化建立了IL-15融和蛋白的全柱成像毛细管等电聚焦电泳方法。具体方法为采用3 mol·L-1尿素、0.35%甲基纤维素、4%两性电解质混合溶液作为样品缓冲液,聚焦电压为3 k V,预聚焦时间1 min,聚焦时间7 min。结果:利用新建方法测定了IL-15融和蛋白的等电点范围为6.00～6.71,分离检测到12个异构体,重复性实验中各异构体的峰面积百分比RSD为0.7%～7.4%,等电点RSD为0.0%～0.1%;稳定性实验中各异构体峰面积百分比的RSD为1.5%～10.5%,等电点RSD为0.0%～0.3%;3个不同批次IL-15融和蛋白的各异构体峰面积百分比和等电点基本一致。去N-糖基化及去唾液酸化实验结果表明,IL-15融和蛋白的电荷异构体主要是由N-糖基化不同产生,而酸性端异构体是由于唾液酸化程度不同产生的。结论:研究建立的全柱成像毛细管等电聚焦电泳方法可以有效分离IL-15融和蛋白的12种异构体,糖基化尤其是唾液酸化是引起电荷异质性的主要原因,新建方法对IL-15融和蛋白的质量控制有重要意义。(本文来源于《中国新药杂志》期刊2018年19期）
刘振东,韩国华,杨勇,王庆民[5]（2018）在《全柱成像毛细管等电聚焦(iCIEF)技术分析重组人IgG VEGFR:Fc-融合蛋白电荷异质性》一文中研究指出目的:建立全柱成像毛细管等电聚焦法(iCIEF)分析重组人IgG VEGFR:Fc-融合蛋白(血管内皮生长因子受体-抗体Fc融合蛋白)的电荷异质性。方法:首先对全柱成像毛细管等电聚焦方法在蛋白浓度、助溶剂、两性电解质、聚焦时间等方面进行了条件优化。并应用优化的方法进行Fc-融合蛋白的电荷异质性及等电点检测及重复性验证,并将结果与毛细管等电聚焦(cIEF)及平板胶等电聚焦(IEF)结果进行对比分析。结果:在优化的实验条件下,分析Fc-融合蛋白的电荷异质性及等电点具有良好的分离度和重复性,分离效果明显好于cIEF和IEF,且主成分的pI重复测定RSD均小于0.5%。结论:iCIEF作为一种新的技术手段,用于重组蛋白类药物电荷异质性及等电点分析,方法快速、准确,重复性好,能够较好地检测高度糖基化的重组VEGFR:Fc-融合蛋白产品的电荷异质性,为保障Fc-融合蛋白类产品生产工艺的稳定性及质量控制提供了一种快速、可靠的分析方法。(本文来源于《药物分析杂志》期刊2018年03期）
刘振东,韩国华,杨勇,王庆民[6]（2017）在《全柱成像毛细管等电聚焦(iCIEF)技术分析重组人IgG Fc-融合蛋白电荷异质性》一文中研究指出目的:建立全柱成像毛细管等电聚焦(iCIEF)法分析重组人IgG Fc-融合蛋白的电荷异质性。方法:首先对全柱成像毛细管等电聚焦方法在蛋白浓度、助溶剂、两性电解质、聚焦时间等方面进行了条件优化。并应用优化的方法进行Fc-融合蛋白的电荷异质性及等电点检测及重复性验证,并将结果与毛细管等电聚焦(cIEF)及平板胶等电聚焦(IEF)结果进行对比分析。结果:在优化的实验条件下,分析Fc-融合蛋白的电荷异质性及等电点具有良好的分离度和重复性,分离效果明显好于cIEF和IEF,且主成分的pI重复测定RSD均小于0.5%。结论:iCIEF作为一种新的技术手段用于重组蛋白类药物电荷异质性及等电点分析,方法快速、准确、重复性好,能够较好地检测高度糖基化的重组Fc-融合蛋白产品的电荷异质性,为保障Fc-融合蛋白类产品生产工艺的稳定性及质量控制提供了一种快速、可靠的分析方法。(本文来源于《第五届生物技术药物理化特性分析与质量研究技术研讨会资料汇编》期刊2017-07-18）
牛纪成,谢松芳,方芳,吴志勇[7]（2017）在《复杂蛋白混合物在纸基分析装置(PAD)上的等电聚焦(IEF)》一文中研究指出用简便易行且价廉快速的方法在从复杂蛋白样品中快速发现蛋白标志物和对特定蛋白质进行定性定量分析中仍具有现实意义。近些年,纸基分析装置(PAD)因具有便携、价廉和易操作等优点在POCT领域中的应用潜力重新受到了广泛关注[1][2]。如何将蛋白质预分离技术与纸基分析装置结合以实现复杂蛋白质样品的分析仍面临很多问题。等电聚焦(IEF)是在一定pH梯度条件下基于两性分子的等电点进行分离的一种电泳方法。因其具有浓集和分离能力,在蛋白质组研究中具有重要的地位[3]。本文成功展示了一种在简单开放的纸流体通道上进行IEF的方法(Fig.1a),用模型蛋(本文来源于《第21届全国色谱学术报告会及仪器展览会会议论文集》期刊2017-05-19）
周朝明,张高峡[8]（2017）在《全柱成像毛细管等电聚焦电泳法测定4种生物制品等电点》一文中研究指出目的:采用全柱成像毛细管等电聚焦电泳法(WCID-CIEF),测定多肽样品、胰岛素、融合蛋白疫苗和HPV病毒样颗粒的等电点。方法:采用50 mm×100μm石英涂层毛细管。聚焦方法设置:1.5 k V聚焦1 min,3 k V聚焦4 min/8 min;检测波长:280 nm。结果:多肽样品、激素样品胰岛素和融合蛋白疫苗的等电点分别为10.98、5.87和5.86;病毒样颗粒样品HPV 31L1、HPV 33L1、HPV 45L1、HPV 52L1和HPV 58L1的实测等电点分别为8.17、7.86、7.77、7.91和7.69,并且实测等电点与理论等电点基本一致。全柱成像毛细管等电聚焦法测定生物制品专属性和精密度均符合验证要求。结论:该方法可用于生物制品的等电点分析。(本文来源于《药物分析杂志》期刊2017年04期）
孟晓光,甄里,刘悦玫,侯利平,刘丹[9]（2017）在《全柱成像毛细管等电聚焦电泳分析蛋白质药物电荷异质性》一文中研究指出评价了cIEF-WCID检测多肽与蛋白质药物等电点的应用效果。测定标准多肽的等电点,验证了cIEF-WCID具有高的准确度和良好的重复性(相对标准偏差<0.50%)。人血红蛋白的4种主要异构体实现了基线分离;甘赖胰岛素的重复测试均只检出单一特征峰(p I 5.95±0.01);比较重组人生长激素原液和成品,等电点特征峰比例差异明显,且成品有新特征峰出现;对比进口及国产贝伐单抗,发现厂家1、3与原研药基本一致,厂家1的主成分迁移规律与原研药高度一致,厂家2的重链C末端K缺失、N末端焦谷氨酸环化或脱酰胺修饰影响了电荷异质性;通过考察尿素浓度、电解质范围和聚焦时间,优化了检测重组人促卵泡素等电点条件:2 mol/L尿素,两性电解质pH 2.5~5.0与pH 3.0~10.0按1∶1混合,聚焦电压1 000 V(1 min)~1 800 V(4 min)~2 200 V(1 min)。cIEF-WCID可快速、准确测定具有电荷异质性的蛋白类药物等电点,分辨率和重复性好,尤其是可以跟踪聚焦过程中样本的迁移特征,特别适合蛋白类药物复杂电荷异质性的检测。(本文来源于《分析测试学报》期刊2017年03期）
杨兰兰,张银川,吴小丽,张雅婷,桂芳[10]（2016）在《全人源抗人肿瘤坏死因子-α单克隆抗体毛细管等电聚焦鉴别方法的建立及验证》一文中研究指出目的建立用于全人源抗人肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)单克隆抗体鉴别的毛细管等电聚焦(capillary isoelectric focusing,c IEF)方法,并进行验证。方法通过优化c IEF过程中各关键实验参数,如阴极稳定剂浓度、阳极稳定剂浓度、两性电解质浓度、3-10与8-10.5两性电解质比例、聚焦时间、聚焦电压,建立c IEF方法,并对方法的专属性、重复性、中间精密度进行验证。结果确定c IEF方法的实验参数为:阴极稳定剂浓度30 mmol/L,阳极稳定剂浓度3.2 mmol/L,3-10两性电解质在样品溶液中体积比为6.0%,聚焦电压为25 k V,聚焦时间为10 min。保护剂在样品出峰时间无紫外吸收峰,阳性对照阿达木单抗与样品出峰时间及峰形一致,阴性对照利妥昔单抗生物类似药、贝伐珠单抗、曲妥珠单抗生物类似药、西妥昔单抗与样品出峰时间及峰形均不一致,且对样品无干扰;样品制备重复性主峰等电点的相对标准差(relative standard deviation,RSD)为0.114%,中间精密度RSD为0.837%。结论建立的c IEF方法 p H梯度和精密度良好,专属性较强,适用于制品的批放行鉴别试验。(本文来源于《中国生物制品学杂志》期刊2016年12期）
等电聚焦论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:采用成像毛细管等电聚焦电泳(imaging capillary electrofocusing electrophoresis,iCIEF)分析单抗的电荷异质性,组织国内多家质控实验室对该方法进行验证;制备用于iCIEF法的系统适用性对照品。方法:邀请19个质控实验室,应用3种品牌(4种型号)的iCIEF设备进行方法学的预验证,确定该方法的关键试剂、仪器参数设置、数据分析要点等;依据ICH_Q2_R1指导原则、2015年版《中华人民共和国药典》(简称《中国药典》)通则9101制定方法学验证方案,邀请11个质控实验室参加验证;制备基于iCIEF法的系统适用性对照品并利用SEC-HPLC、IEC-HPLC、非还原CE-SDS进行稳定性评价。结果:预验证结果显示:等电点标记物(pI Marker)为关键试剂;不同品牌、型号的iCIEF检测设备参数设置无需统一;数据处理可采用自动积分、手动积分相结合的形式。验证结果:完成了该方法的特异性、准确度、精密度、线性及其范围、耐用性、定量下限的评价;制备了iCIEF法的系统适用性对照品,并进行了加速及长期稳定性评价,制定了相应的合格标准。结论:首次组织了iCIEF的方法学验证,为《中国药典》标准提高提供方法学验证依据,为该方法制备了系统适用性对照品。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
等电聚焦论文参考文献
[1].刘让东,许歆瑶,王薇薇,王彦,闫超.固化pH梯度毛细管等电聚焦整体柱的制备及在蛋白质等电点分析中的应用[J].色谱.2019
[2].武刚,于传飞,王文波,李萌,王兰.成像毛细管等电聚焦电泳分析单克隆抗体电荷异质性的方法学验证及系统适用性对照品的制备[J].药物分析杂志.2019
[3].武刚,于传飞,王文波,王兰.成像毛细管等电聚焦电泳测定单抗等电点的若干影响因素[J].药物分析杂志.2018
[4].李响,于雷,郭莹,周勇,饶春明.全柱成像毛细管等电聚焦电泳法评价IL-15融和蛋白的电荷异质性[J].中国新药杂志.2018
[5].刘振东,韩国华,杨勇,王庆民.全柱成像毛细管等电聚焦(iCIEF)技术分析重组人IgGVEGFR:Fc-融合蛋白电荷异质性[J].药物分析杂志.2018
[6].刘振东,韩国华,杨勇,王庆民.全柱成像毛细管等电聚焦(iCIEF)技术分析重组人IgGFc-融合蛋白电荷异质性[C].第五届生物技术药物理化特性分析与质量研究技术研讨会资料汇编.2017
[7].牛纪成,谢松芳,方芳,吴志勇.复杂蛋白混合物在纸基分析装置(PAD)上的等电聚焦(IEF)[C].第21届全国色谱学术报告会及仪器展览会会议论文集.2017
[8].周朝明,张高峡.全柱成像毛细管等电聚焦电泳法测定4种生物制品等电点[J].药物分析杂志.2017
[9].孟晓光,甄里,刘悦玫,侯利平,刘丹.全柱成像毛细管等电聚焦电泳分析蛋白质药物电荷异质性[J].分析测试学报.2017
[10].杨兰兰,张银川,吴小丽,张雅婷,桂芳.全人源抗人肿瘤坏死因子-α单克隆抗体毛细管等电聚焦鉴别方法的建立及验证[J].中国生物制品学杂志.2016
论文知识图
