耐热嗜碱蛋白酶基因的克隆、表达及其酶学性质分析

论文摘要

碱性蛋白酶是一类重要的工业酶制剂。为进一步提高碱性蛋白酶在高温碱性条件下的活力,增强其工业应用价值,本文从地衣芽胞杆菌CCTCC M2018539中首先通过PCR扩增获得碱性蛋白酶编码基因apr E539并克隆入表达载体pND-113中,在枯草芽胞杆菌WB600中实现碱性蛋白酶AprE539的表达;重组酶AprE539经硫酸铵沉降（30%～70%）、透析、DEAE阴离子交换和超滤获得纯酶,并以SDS-PAGE电泳测定AprE539的分子量大小。结果表明,AprE539的分子量大小为30 kDa。进一步对其酶学性质研究表明:AprE539的最适作用pH为11.0,最适作用温度为65～70℃;在pH6.0～12.0范围内具有较好的稳定性;在60℃保温1 h后酶活剩余70%; Cu2+、Mn2+、Ca2+和Mg2+对酶活有明显促进作用。AprE539在氨基酸序列上仅有2个氨基酸残基与碱性蛋白酶2709存在差异,但其酶学特征差异明显,为后续进一步探究其酶学性质差异性奠定基础。

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文章来源

类型: 期刊论文

作者: 谢爱连,林碧瑜,牛丹丹,NOKUTHULA Peace Mchunu,叶秀云

关键词: 地衣芽胞杆菌,耐热嗜碱性蛋白酶,克隆与表达,酶学性质

来源: 食品工业科技 2019年20期

年度: 2019

分类: 工程科技Ⅰ辑,基础科学

专业: 生物学

单位: 福州大学生物科学与工程学院福建省海洋酶工程重点实验室,Department of Biotechnology and Food Technology,Faculty of Applied Sciences,Durban University of Technology

基金: 国家自然科学基金(31601407),海洋生物酶工程创新服务平台(2014FJPT02)

分类号: Q78;Q55

DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2019.20.017

页码: 101-106

总页数: 6

文件大小: 2207K

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