P[9]轮状病毒受体结合特征及其人群抗体水平与HBGA相关性研究

P[9]轮状病毒受体结合特征及其人群抗体水平与HBGA相关性研究

论文摘要

目的表达P[9]轮状病毒(rotaviruses,RV)GST-VP8*蛋白,研究其与组织血型抗原(histo-blood group antigen,HBGA)受体的结合方式。了解广东省汕尾市人群P[9]RV特异性抗体水平,并分析其与HBGA受体的相关性。方法构建pGEX-4T-1-VP8*重组质粒,利用原核表达系统表达纯化VP8*蛋白,目的蛋白经Western bolt确定其特异性,采用酶联免疫吸附试验检测GST-VP8*蛋白与唾液HBGA受体结合方式。利用VP8*蛋白检测广东省汕尾市人群P[9]RV抗体,并检测该人群HBGA受体表型,分析P[9]RV抗体与HBGA的相关性。结果成功表达了P[9]RV VP8*蛋白,并发现其与A型分泌型HBGA受体特异结合,不结合B、O型分泌型及非分泌型HBGA受体。A型、Leb+/Ley+和分泌型HBGA个体配对的血清中P[9]RV特异性IgG阳性率明显较高。结论 P[9]RV识别A型分泌型HBGA受体,这将有助于理解RV的流行病学,为RV进一步防控提供试验依据。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •     1.1.1 样本采集
  •     1.1.2 试剂
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 P[9]RV VP8*基因序列合成
  •     1.2.2 pGEX-4T-1-VP8*重组表达载体的构建
  •     1.2.3 重组pGEX-4T-1-VP8*蛋白的诱导表达与纯化
  •     1.2.4 VP8*蛋白的Western blot鉴定分析
  •     1.2.5 各型唾液HBGA受体与GST-VP8*蛋白结合的梯度试验
  •     1.2.6 唾液样本与P[9]RV结合试验
  •     1.2.7 血清中P[9]RV特异性IgG的检测
  •     1.2.8 唾液HBGA表型鉴定
  •     1.2.9 统计分析
  • 2 结 果
  •   2.1 pGEX-4T-1-VP8*表达载体的构建
  •   2.2 P[9]RVVP8*蛋白的表达与纯化
  •   2.3 P[9]RV GST-VP8*蛋白与唾液HBGA受体
  •   2.4 血清P[9]RV IgG抗体与唾液HBGA表型的关系
  • 3 讨 论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 侯玉珍,龙艳,郭伦爱,陈俊锐,张绪富,戴迎春

    关键词: 轮状病毒,原核表达系统,组织血型抗原

    来源: 中国人兽共患病学报 2019年08期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技,基础科学

    专业: 生物学,基础医学

    单位: 南方医科大学公共卫生学院流行病学系,南方医科大学中医药学院

    基金: 国家自然科学基金面上项目(No.31771007,No.81773975和No.81473402),广州市科技计划项目产学研协同创新重大专项民生科技研究专题(No.201604020111)联合资助~~

    分类号: R373.25

    页码: 688-693

    总页数: 6

    文件大小: 1425K

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