七台河市食品药品检验检测与认证中心
摘要：本文采用高效液相法（HPLC）测定硝苯地平片含量均匀度。十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂AgilentC18（4.6mm×150mm，5μm）分析柱，以甲醇-水（70：30）为流动相，流速1mL/min；进样量20μL，检测波长为235nm，理论板数按硝苯地平峰计算为2282。在此色谱条件下可得到较宽线性范围和较高的回收率，其分解产物亦可得到良好的分离。
关键词：高效液相色谱法；硝苯地平片；含量均匀度
1前言
硝苯地平片作为一种选择性钙拮抗药物，能同时舒张正常供血区和缺血区的冠状动脉，拮抗自发的或麦角新碱诱发的冠状动脉痉挛，增加冠状动脉痉挛病人心肌氧的递送，解除和预防冠状动脉痉挛，抑制心肌收缩，降低心肌代谢，减少心肌耗氧量，舒张外周阻力血管，降低外周阻力，可使收缩血压和舒张血压降低，减轻心脏后负荷，临床上广泛应用于心血管病人的治疗，对于心绞痛（变异型心绞痛；不稳定型心绞痛；慢性稳定型心绞痛）以及高血压有很好的临床疗效。本文在避光的条件下采用高效液相色谱法测定硝苯地平片的含量均匀度，结果令人满意，从而可有效地对硝苯地平片的质量加以控制，捍卫百姓用药安全。
2实验部分
2.1仪器
Waters2695型高效液相色谱仪、Waters2998型紫外可见检测器。
2.2试药
硝苯地平，来源中检所，批号100358-200502；甲醇，优级纯；三乙胺、醋酸均为分析纯；水为自制PC水，硝苯地平片。
2.3色谱条件
采用外标法：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂AgilentC18（4.6mm×150mm，5μm）分析柱，色谱柱温25℃，甲醇-水（70：30）为流动相，检测波长为235nm，理论板数按硝苯地平峰计算不低于2282，流速：1ml/min；进样量：20μL。
2.4对照溶液配置
取硝苯地平对照品0.02088g，置50ml量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，精取5ml置100ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，用0.45μm微孔滤膜（有机膜）滤过，即得。
2.5线性关系
精密取对照溶液2ml，3ml，4ml，5ml，6ml，分别置5ml的棕色容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，用0.45μm微孔滤膜滤过，配置成5种不同浓度的溶液，依次注入液相色谱仪，同天进行试验，计算回收率和精密度。
2.6样品制定
取硝苯地平片10片，除去包衣，分别置10个乳钵中，研细，加甲醇分次转移至50ml的棕色容量瓶中，加甲醇适量超声处理使硝苯地平溶解，放冷，用甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取10ml置50ml棕色容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，用0.45μm微孔滤膜（有机膜）滤过，即得。
3结果
3.1线性与稳定性
根据对照品储备液的5种不同浓度的高效液相色谱分析，以峰面积对硝苯地平的质量浓度（X，mg/L）进行线性回归，得方程Y=0.6932X+0.0073，r=0.9999。实验证明，硝苯地平在8.352～25.056mg/L范围内线性关系良好。取供试品溶液，在严格避光的条件下于0，6，12，24小时分别精密量取20μl注入液相色谱仪，记录色谱峰，结果硝苯地平相对标准偏差（RSD）为1.23%，表明供试品溶液在24h内稳定。
3.2回收率与重复性
取已知含量的本品，精密称取适量，加入硝苯地平对照品适量，按2.6样品制定成所需溶液，注入液相色谱仪计算回收率，5份样品的平均回收率为99.14％，取同一批号的硝苯地平片即本次试验样品5份，分别为0.20084g，0.20090g，0.20078g，0.20096g，0.20104g，分别置50ml棕色容量瓶中，加甲醇适量超声处理使硝苯地平溶解，放冷，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml置50ml的棕色容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，制成供试品溶液，进样20μl注入液相色谱仪测定含量，结果硝苯地平片平均含硝苯地平为标示量的103.2%，相对标准偏差（RSD）0.3%。
3.3含量均匀度
对硝苯地平片进行含量均匀度试验，结果如图和表：
4结论
硝苯地平的化学性质不稳定，遇光条件下分子内部会发生光化学歧化作用，产生分解产物，当试样置于无色量瓶中，室内光线为1000lx时，放置1h，即产生明显的分解产物。因此，在对硝苯地平片的含量均匀度的试验时要进行避光，甲醇易挥发，实验人员要注意实验室的通风，甲醇-水（70：30）为流动相，检测波长235nm，理论板数按硝苯地平峰计算为2282。在此色谱条件下可得到较宽线性范围和较高的回收率，其分解产物亦可得到良好的分离。
参考文献：
[1]邢玉仁，王杰.高效液相色谱法测定硝苯地平片含量及其含量均匀度[J].色谱，1999，17（3）：308-309.
[2]国家药典委员会.中华人民共和国药典（二部）[S].北京：化学工业出版社，2010：944.