导读:本文包含了衰老标记蛋白论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:衰老,蛋白,标记,晶状体,上皮细胞,白内障,细胞。
衰老标记蛋白论文文献综述
AINT,THU,THU,WIN,李松蔓,韩子豪,陈曦,唐东永[1]（2019）在《急性氧化应激状态下人晶状体上皮细胞株SRA01/04中衰老标记蛋白30、Caspase-3、Ca~(2+)-ATP表达的变化》一文中研究指出目的:探讨在急性氧化应激状态下人晶状体上皮细胞株SRA01/04内衰老标记蛋白30(SMP30)、Caspase-3、Ca~(2+)-ATP表达的变化。方法:通过慢病毒转染建立SMP30过表达(OE)组、过表达空载对照(NC-OE)组、SMP30沉默(KD)组及沉默空载(NC-KD)组SRA01/04细胞,RT-PCR和Western blotting检测SMP30含量鉴定细胞是否转染成功;用300μmol/L H_2O_(2 )作用2 h,构建急性氧化应激状态时,PCR检测各组细胞SMP30基因的表达情况,Western blotting检测各组细胞SMP30、Caspase-30和Ca~(2+)-ATP蛋白的表达量。结果:在正常状态时,OE组SMP30基因及其蛋白表达量高于NC-OE组(P<0.05),KD组的SMP30基因及其蛋白表达量低于NC-KD组(P<0.05)。OE组及KD组细胞SMP30基因表达量均出现增加(P<0.05),与正常状态时相比,急性氧化应激状态时OE组细胞SMP30蛋白表达上调(P<0.05);正常状态时,OE组Caspase-3蛋白表达量低于NC-OE组,KD组Caspase-3蛋白表达量高于NC-KD组(P<0.05)。急性氧化应激状态时,OE组Caspase-3蛋白表达量低于NC-OE组,KD组Caspase-3蛋白表达量低于NC-KD组(P<0.05)。在急性氧化应激状态时OE组Caspase-3蛋白表达量低于正常状态时;KD组的Caspase-3蛋白表达量高于正常状态时KD组(P<0.05)。在正常状态时,OE组Ca~(2+)-ATP蛋白表达量高于NC-OE组,KD组Ca~(2+)-ATP蛋白表达量低于NC-KD组(P<0.05)。在急性氧化应激状态时,OE组Ca~(2+)-ATP蛋白表达量高于NC-OE组,KD组Ca~(2+)-ATP蛋白表达量低于NC-KD组(P<0.05)。在急性氧化应激状态时OE组的Ca~(2+)-ATP蛋白表达量高于正常状态时(P<0.05)。结论:在急性氧化应激状态时,SMP30含量出现反应性增加,过表达SMP30可能对人晶状体上皮细胞株SRA01/04具有抗氧化、抗凋亡、增加钙调节活性的作用。(本文来源于《广西医科大学学报》期刊2019年08期）
AINT,THU,THU,WIN[2]（2019）在《人晶状体上皮细胞株SRA01/04中衰老标记蛋白30的改变在高钙及急性氧化应激状态的反应》一文中研究指出目的:探讨人晶状体上皮细胞株SRA01/04中衰老标记蛋白30(senescence marker protein 30,SMP30)的改变在高钙及急性氧化应激状态下的反应,为进一步研究年龄相关性白内障发病机制提供理论依据,并且在预防白内障的发生发展中提供重要的依据。方法:1.建立SMP30过表达和沉默稳定株:将人晶状体上皮细胞株SRA01/04细胞按5x104/孔接种于6孔板细胞培养板中,待细胞生长到20%时根据MOI=5使用过表达慢病毒(LV-RGN,19544-1)及沉默慢病毒(LV-RGN_RNAi,50743-1)以及相应的空载对照组慢病毒感染细胞,按常规培养方式培养24小时后将培养液更换成正常培养液。培养72小时后在荧光显微镜下观察转染效率。细胞生长到90%时加入2μg/ml嘌呤霉素,筛选出成功转染细胞。将所得转染细胞提取所需RNA及蛋白进行实时定量聚合酶链反应及蛋白质印迹检测细胞株转染效率,确认模型构建成功。2.观察高钙培养状态下SMP30基因及蛋白的变化:将转染细胞培养至80%时加入15mmol/L Ca Cl2作用24小时,再提取所需RNA及蛋白检测SMP30基因及蛋白的表达量。3.观察急性氧化应激培养状态下SMP30基因和蛋白的变化:将转染细胞培养至80%加入300μmol/L H2O2作用2小时后提取RNA及蛋白检测此状态下的SMP30基因和蛋白的表达量。结果:1.衰老标记蛋白30过表达(Over-expression,OE)及沉默(Knock-down,KD)稳定株的转染效率:RT-PCR结果显示OE组(2.8330±0.201)与NC-OE(Over-expression negative control group,过表达空载组)组(0.987±0.888)相比表达丰度为2.83倍(t=-20.309,p=0.003<0.05);KD组(0.090±0.040)与NC-KD(Knock-down negative control group,沉默空载组)组(1.009±0.006)相比敲减率为91%(t=-0.047,p=0.000<0.05)。WB结果显示:OE组(0.923±0.013)的SMP30蛋白表达量较NC-OE组(0.599±0.013)上调(p=0.000<0.05),KD组(0.610±0.002)较NC-KD组(0.742±0.013)下调(p=0.000<0.05)。2.高钙培养状态下SMP30蛋白及RGN m RNA基因表达量:RT-PCR结果显示OE组(5.234±0.512)RGN m RNA基因表达量较NC-OE组(1.007±0.149)上调(p=0.000<0.05),KD组(0.510±0.023)表达量较NC-KD(1.006±0.137)组下调(p=0.022<0.05);WB结果显示OE组(0.5668±0.0113)的SMP30蛋白表达量相比NC-OE组(1.107±0.006)下调(p=0.000<0.05),KD组(1.266±0.034)表达量较NC-KD组(1.099±0.026)上调(p=0.003<0.05)。与正常状态下的OE组及KD组相比,RGN m RNA基因表达量均出现反应性增加(pOE=0.002<0.05,pKD=0.000<0.05),而SMP30蛋白表达量在OE组中下调(p=0.000<0.05),KD组中上调(p=0.000<0.05)。3.急性氧化应激状态下各组基因与蛋白的表达量:RT-PCR结果显示OE组(4.332±0.264)RGN m RGN基因表达量较NC-OE组(1.001±0.050)上调(p=0.002<0.05),KD组(0.377±0.029)表达量较NC-KD组(1.004±0.112)下调(p=0.001<0.05);WB结果显示OE组(1.103±0.002)的SMP30蛋白表达量较NCOE组(0.876±0.010)上调(p=0.000<0.05),KD组(0.611±0.024)的表达量与NC-KD组(0.591±0.034)相比无统计学意义(p=0.46>0.05)。与正常状态相比OE组及KD组RGN m RGN基因表达量均出现反应性增加(pOE=0.001<0.05,pKD=0.001<0.05),SMP30蛋白表达量在OE组中上调(p=0.000<0.05),KD组表达量无统计学意义(p=0.967>0.05)。结论:构建过表达SMP30及沉默SMP30模型成功,可用于后续研究。在急性氧化应激状态下,与正常状态相比,SMP30过表达组SMP30表达量增加更为明显,提示在急性氧化应激时SMP30出现反应性增加,可能参与HLECs氧化应激的过程。在高钙状态下,SMP30表达量出现反应性改变,提示SMP30与细胞内钙稳态密切相关,发挥其钙调节作用。(本文来源于《广西医科大学》期刊2019-05-01）
韩子豪,李松蔓,李艳玮,陈曦,张鸿侃[3]（2019）在《急性氧化应激初期人晶状体上皮细胞株SRA01/04中衰老标记蛋白30抗氧化作用的研究》一文中研究指出目的初步探讨衰老标记蛋白30(senescence marker protein 30,SMP30)的增加对处于急性氧化应激初期的人晶状体上皮细胞株SRA01/04的保护作用。方法将处于对数生长期的SRA01/04接种于96孔板,分别使用含150μmol·L~(-1)、200μmol·L~(-1)、250μmol·L~(-1)、300μmol·L~(-1)、350μmol·L~(-1)、400μmol·L~(-1)、450μmol·L~(-1)H2O2的培养基作用2 h,CCK-8法选取最佳H2O2浓度;使用慢病毒对SRA01/04进行转染建立SMP30高表达模型,实验分3组:SMP30过表达(overexpression,OE)组、SMP30过表达相应空载(negative control over expression,NCOE)组及对照(control,CON)组。通过超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)定量检测试剂盒、氧化型谷胱甘肽(oxidized glutathione,GSSG)/总谷胱甘肽(total glutathi-one,T-GSH)测定试剂盒测量细胞内SOD活力及GSSG/T-GSH比值的变化。结果经分析,建立模型的最佳H2O2浓度为300μmol·L~(-1)。在此浓度下,与CON组(5. 783±0. 192) U·mg~(-1)及NCOE组(5. 837±0. 182) U·mg~(-1)相比,OE组细胞内SOD活力升高,为(10. 251±0. 110) U·mg~(-1);与CON组(29. 943±0. 241)及NCOE组(30. 037±0. 433)相比,OE组细胞内GSSG/T-GSH比值(20. 990±0. 342)降低;差异均有统计学意义(均为P <0. 05)。结论当SRA01/04处于H2O2诱导的急性氧化应激初期时,SMP30表达的增加可通过增加SOD活力和降低GSSG/T-GSH比值,加强SRA01/04的抗氧化能力。(本文来源于《眼科新进展》期刊2019年02期）
李松蔓,陈曦,韩子豪,THU,THU,WIN,AINT,衷昕[4]（2019）在《高表达衰老标记蛋白30对高钙诱导人晶状体上皮细胞株SRA01/04氧化应激的影响》一文中研究指出【目的】探讨在高钙诱导细胞氧化应激下,高表达衰老标记蛋白30(SMP30)对人晶状体上皮细胞(HLEC)株SRA01/04增殖活力及抗氧化能力的影响。【方法】实验分3组:SMP30高表达组(OE,实验组)、NCOE组(阴性对照组)及SRA01/04组(空白对照组)。用OE及NCOE慢病毒载体分别转染SRA01/04细胞。15 mmol/LCaCl2处理细胞24 h建立高钙诱导模型。BrdU法检测细胞增殖、超氧化物歧化酶(SOD)、氧化型谷胱甘肽(GSSG)/总谷胱甘肽(T-GSH)法检测细胞氧化指标。【结果】荧光显微镜下可见各组转染细胞有大量绿色荧光蛋白(GFP)表达,转染效率接近80%,提示SMP30高表达SRA01/04细胞模型构建成功。在高钙状态下,OE组细胞相对增殖活力(3.89±0.20)和SOD活力(U/mg,47.5±4.3)均高于NCOE组(2.82±0.34、30.6±4.2)及SRA01/04组(2.96±0.25、26.8±1.5),OE组GSSG/T-GSH比值(2.36±0.51)低于NCOE组(16.36±2.48)及SRA01/04组(20.12±2.54),上述差异均有统计学意义(n=3,P<0.05),NCOE组与SRA01/04组相比差异均无统计学意义(n=3,P>0.05)。【结论】高表达SMP30增加SRA01/04(HLEC)细胞增殖活力、SOD活力及下降GSSG/T-GSH水平,提示SMP30在一定程度上可缓解高钙诱导细胞氧化损伤的进程,可能对HLEC有保护作用。(本文来源于《中山大学学报(医学版)》期刊2019年01期）
陈曦[5]（2018）在《衰老标记蛋白30对人晶状体上皮细胞株SRA01/04增殖和凋亡的影响》一文中研究指出目的:观察调控衰老标记蛋白30(Senescence Marker Protein 30,SMP30)含量的改变对人晶状体上皮细胞株(Human Lens Epithelial Cells,HLEC)SRA01/04增殖和凋亡的影响,为白内障病因和预防机制的研究提供新的思路。方法:(1)预感染实验确定SRA01/04细胞是否易于被慢病毒感染及其最佳感染条件:将处于对数生长期的SRA01/04细胞按2×10~3/孔的密度接种96孔板,待细胞密度增至20%时,用慢病毒GV115-NC(pGcsil-004)在四种培养液(完全培养基、含5μg/ml助感染试剂的完全培养基、感染增强液、含5μg/ml助感染试剂的感染增强液)及叁种复感染指数(1、10、100)的培养条件下感染SRA01/04细胞,每组叁个样本、所有实验至少重复叁次。(2)SMP30过表达和沉默稳定株构建:确定好感染条件和最佳病毒滴度后,将处于对数生长期的SRA01/04细胞按5×10~4/孔接种6孔板,待细胞密度增至20%时采用两组RGN(Regucalcin,SMP30)慢病毒LV-RGN(Lentivirus-Regucalcin)和LV-RGN-RNAi(Lentivirus-Regucalcin-RNA interference)以及相应的阴性对照组病毒感染细胞,24h后将感染溶液换成正常完全培养基,感染后72h在荧光显微镜下观察荧光强度。当细胞密度达到90%时,加入2μg/ml嘌呤霉素(Puromycin)杀死未感染细胞,后续细胞传代培养中维持1μg/ml嘌呤霉素持续筛除未被慢病毒感染的细胞。转染成功后,运用WB(Western Blot,蛋白质印迹)和q-PCR(Real-time Quantitative Polymerase Chain Reaction,实时定量聚合酶链反应)检测SMP30/RGN过表达和沉默效率,以明确细胞株构建成功。(3)细胞增殖和凋亡检测:使用细胞计数试剂盒Kit-8(Cell Counting Kit-8,CCK-8)测量细胞活力,运用5-溴脱氧尿苷(BrdU)测定各组细胞增殖;通过PI FACS周期试剂盒测量细胞周期,并运用流式细胞术通过膜联蛋白-V APC测定细胞凋亡;运用western印迹测定SRA01/04中caspase-3的含量,间接反映细胞凋亡率。结果:(1)通过转染预实验,确定Normal Medium+Polybrene(5μg/ml)(含5μg/ml助感染试剂的完全培养基)和病毒滴度MOI=5为SRA01/04细胞的最佳转染条件。(2)使用q-PCR和WB技术来确定SMP30过表达(Overexpression,OE)和沉默(Knock Down,KD)SRA01/04细胞系的转染效率,OE组(19.373±1.445)的RGN表达量为NC-OE(Overexpression Negative Control Group)组(1.023±0.253)的19.373倍(t=-21.659,p<0.01),相对于NC-KD(Knock Down Negative Control Group)组(1.003±0.1),KD组(0.039±0.003)的沉默效率为96%(t=16.729,p<0.01)。与相应空载组相比,OE组SMP30蛋白表达量(1.338±0.186)显着增高(t=-9.039,p<0.01),KD组SMP30蛋白表达量(0.137±0.048)下降(t=13.006,p<0.01)。(3)通过CCK-8测定,与NC-KD(0.398±0.011)相比,KD组(0.355±0.008)细胞活力下降(t=7.466,p<0.01),OE组(0.415±0.01)与NC-OE组(0.402±0.009)相比没有差异(t=-2.189,p>0.05);Brdu增殖实验显示,与NC-OE组(0.682±0.006)相比,OE组(0.857±0.023)的细胞增殖有所增加(t=6.49,p<0.05),KD组(0.664±0.01)和NC-KD组(0.676±0.008)相比没有差异(t=1.61,p>0.05);PI FACS细胞周期测定结果显示,与相应空载组相比,KD组S期细胞减少(t=11.18,p<0.01)、G1期细胞增多(t=-12.97,p<0.01)、G2/M期细胞无明显变化(t=0.288,p>0.05),OE组S期细胞减少(t=12.643,p<0.01)、G1期细胞增多(t=-11.849,p<0.01)、G2/M期细胞增多(t=-12.447,p<0.01);膜联蛋白V APC信号染色检测显示,与相应空载组比较,KD组细胞凋亡率较高(t=-5.986,p<0.01),OE组细胞凋亡率降低(t=13.181,p<0.05)。通过Western Blot检测发现,与各自对照组相比,OE组caspase-3的表达显着增加,KD组caspase-3的表达明显下降。结论:SRA01/04细胞易于被慢病毒感染,最佳感染条件为用病毒滴度等于5的病毒液在含5μg/ml助感染试剂的完全培养基中感染细胞。慢病毒转染SRA01/04细胞的沉默和过表达效率佳,成功构建的稳定株可以用于后续实验。衰老标记蛋白30含量的增加可以促进人晶状体上皮细胞SRA01/04增殖并抑制其凋亡,增加SMP30的表达量或许可以保护HLEC SRA01/04免受凋亡引起的白内障。(本文来源于《广西医科大学》期刊2018-05-01）
周丹,刘平,赵德海,隋春杰[6]（2017）在《衰老标记蛋白-30和β-半乳糖苷酶的表达与晶状体上皮细胞凋亡相关性研究》一文中研究指出目的探讨衰老标记蛋白-30和与衰老相关的β-半乳糖苷酶在老年性白内障患者的晶状体上皮细胞凋亡表达的相关性。方法 248例年龄相关性白内障患者(其中126例皮质性白内障154只眼,122例核性白内障有142眼),对每个患者进行晶状体前囊中心部的环形撕囊。TUNEL法观察晶状体上皮细胞凋亡,免疫组织化学染色和实时PCR检测蛋白与mRNA的表达水平。分析衰老标记蛋白-30和β-半乳糖苷酶蛋白表达水平与晶状体上皮细胞凋亡的关系。结果衰老标记蛋白-30在晶状体前囊中心部比晶状体前囊周边有较低的蛋白表达水平,而衰老相关的β-半乳糖苷酶的表达在中央部分明显高于周边部分。与核性白内障患者相比,皮质性白内障患者的衰老标志物蛋白-30和mRNA的表达水平降低了,而衰老相关的β-半乳糖苷酶的表达升高了。TUNEL检测结果显示,两组晶状体上皮细胞的前囊中心部凋亡率明显高于周围部分。在晶状体前囊区中心或周围,皮质性白内障比核性白内障晶状体上皮细胞凋亡明显增高。结论在核性白内障和皮质性白内障,衰老标记蛋白-30和衰老相关的β-半乳糖苷酶的表达均与晶状体上皮细胞的凋亡有相关性。(本文来源于《哈尔滨医科大学学报》期刊2017年05期）
李舒凝,陈曦,张鸿侃,蒋林志,梁皓[7]（2017）在《过氧化氢诱导的急性氧化应激对人晶状体上皮细胞形态、生存率及衰老标记蛋白30(SMP30)表达的影响》一文中研究指出目的探讨过氧化氢诱导的急性氧化应激对人晶状体上皮细胞形态、生存率及衰老标记蛋白30(senescence marker protein30,SMP30)表达的影响。方法采用不同浓度过氧化氢(0μmol·L~(-1)、100μmol·L~(-1)、200μmol·L~(-1)、300μmol·L~(-1))处理人晶状体上皮细胞24 h,建立不同浓度急性氧化应激模型,通过光镜观察、MTT分析细胞形态、生存率,Western blot检测SMP30蛋白的表达情况。结果不同浓度过氧化氢处理细胞24 h后,100μmol·L~(-1)处理组和200μmol·L~(-1)处理组细胞密度、生长活力下降,细胞形态改变,开始出现变圆变大的细胞,胞体拉长,边界不清;300μmol·L~(-1)处理组细胞密度明显降低,细胞出现破碎,溃解。随着过氧化氢浓度的增高,细胞生存率逐渐下降,各处理组与对照组(0μmol·L~(-1))间相比,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。在对照组及100μmol·L~(-1)处理组、200μmol·L~(-1)处理组晶状体上皮细胞SMP30蛋白相对表达量分别为0.273±0.055、0.464±0.058、0.442±0.050,100μmol·L~(-1)处理组、200μmol·L~(-1)处理组SMP30蛋白的表达均较对照组提高,差异均有统计学意义(均为P<0.05),100μmol·L~(-1)处理组和200μmol·L~(-1)处理组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论在急性氧化应激状态下人晶状体上皮细胞形态改变,生存率下降,SMP30蛋白表达上调,SMP30蛋白可能参与晶状体上皮细胞急性氧化应激损伤过程。(本文来源于《眼科新进展》期刊2017年04期）
田黎明,彭圆,胡荣毅,张平,姜红浩[8]（2016）在《衰老标记蛋白30对过氧化氢所致人皮肤成纤维细胞衰老表型的影响》一文中研究指出目的观察高表达的衰老标记蛋白30(SMP30)对过氧化氢(H_2O_2)所致的正常人皮肤成纤维细胞(NHSF)衰老表型的影响。方法实验分为转染H_2O_2处理组(NHSF+SMP30+H_2O_2组)、转空载体H_2O_2处理组(NHSF+空载体+H_2O_2组)和转空载体组(NHSF+空载体组)。NHSF细胞分别转染人SMP30 c DNA或空载体pc DNA3.1(分别命名为NHSF+SMP30、NHSF+空载体),然后150μmol·L-1H_2O_2处理2 h。应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白印迹法分析SMP30的表达,显微镜观察细胞形态,并检测与衰老相关的β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)、细胞活性氧(ROS)及超氧化物歧化酶(SOD)的活性。结果人SMP30 c DNA明显上调了NHSF中SMP30的表达。NHSF+空载体+H_2O_2组SMP30 mRNA和蛋白表达水平明显低于NHSF+空载体组(P<0.05);NHSF+SMP30+H_2O_2组SMP30 mRNA和蛋白表达水平高于NHSF+空载体+H_2O_2组(P<0.05)。NHSF+空载体+H_2O_2组较NHSF+空载体组SA-β-gal染色率明显增高(P<0.05);NHSF+SMP30+H_2O_2组较NHSF+空载体+H_2O_2组SA-β-gal染色率明显下降(P<0.05)。NHSF+空载体+H_2O_2组较NHSF+空载体组ROS活性明显增高(P<0.05),而SOD水平明显降低(P<0.05);NHSF+SMP30+H_2O_2组较NHSF+空载体+H_2O_2组ROS活性明显下降,而SOD水平明显上升(P<0.05)。结论高表达的SMP30能够抑制细胞SA-β-gal和ROS的表达,同时上调SOD的活性。(本文来源于《新乡医学院学报》期刊2016年06期）
田黎明,彭圆,许斌,胡荣毅,姜红浩[9]（2016）在《衰老标记蛋白30对H_2O_2所致人皮肤成纤维细胞衰老表型的影响》一文中研究指出目的:观察高表达的衰老标记蛋白30(SMP30)对H_2O_2所致的正常人皮肤成纤维细胞(NHSF)衰老表型的影响。方法:NHSF细胞分别转染human SMP30 cDNA或空载体pcDNA3.1(分别命名为NHSF+SMP30、NHSF+空载体),然后150μmol/L H_2O_2处理2 h。用RT PCR和Western印迹来分析SMP30的表达,显微镜观察细胞形态,试剂盒检测衰老相关的β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)、细胞活性氧(ROS)以及超氧化物歧化酶(SOD)的活性。实验分为转染H_2O_2处理组(NHSF+SMP30+H_2O_2)、转空载体H_2O_2处理组(NHSF+SMP30+H_2O_2)以及转空载体组(NHSF+空载体)。结果human SMP30 cDNA明显上调了NHSF中SMP30的表达。NHSF+空载体+H_2O_2组SMP30 mRNA和蛋白水平(与GAPDH mRNA和蛋白的比值分别为0.157±0.003和0.277±0.013)明显低于NHSF+空载体组(分别为0.343±0.004和0.637±0.013),两组比较,均P<0.05;NHSF+SMP30+H_2O_2组SMP30表达水平(0.286±0.020和0.557±0.015)高于NHSF+空载体+H_2O_2组(P<0.05)。SA-β-gal染色率在NHSF+空载体、NHSF+空载体+H_2O_2、NHSF+SMP30+H_2O_2分别是(2.925±0.195)%、(76.994±3.002)%、(31.945±4.371)%,各组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。ROS活性在NHSF+空载体、NHSF+空载体+H_2O_2、NHSF+SMP30+H_2O_2分别是(104.736±6.992)%、(263.187±6.118)%、(193.088±6.960)%;SOD水平在NHSF+空载体、NHSF+空载体+H_2O_2、NHSF+SMP30+H_2O_2分别是(90.809±2.361)U/mg、(30.809±3.082)U/mg、(61.604±1.3813)U/mg,各组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论高表达的SMP30能够抑制细胞衰老相关β-半乳糖甘酶(SA-β-gal)和细胞活性氧(ROS)的表达,同时上调了SOD的活性。(本文来源于《2016全国中西医结合皮肤性病学术年会论文汇编》期刊2016-04-21）
高炜,王玉洁,蒋昕钰,姚欣[10]（2015）在《衰老标记蛋白30在慢性阻塞性肺疾病患者中的表达及意义》一文中研究指出目的初步探索衰老标记蛋白30(SMP-30)在人肺组织中的表达以及在慢性阻塞性肺疾病(慢阻肺)发病中的意义。方法纳入2012年1月至6月在江苏省人民医院因肺部肿瘤行肺叶切除术的患者20例。肺组织标本从江苏省人民医院组织库申请获得,为距离癌组织>5 cm的相对正常组织。根据患者肺功能及吸烟情况,将患者分为健康对照组7例,吸烟对照组7例,以及慢阻肺组6例。采用免疫组织化学和蛋白免疫印迹法检测SMP-30在各组肺组织中的细胞定位及含量。结果 SMP-30在人肺组织中主要分布于肺泡巨噬细胞胞浆,慢阻肺组肺泡巨噬细胞及SMP-30阳性细胞数量均明显增多。蛋白免疫印迹法显示肺组织SMP-30蛋白在吸烟非慢阻肺组的含量明显高于健康对照组(2.16±0.23比1.10±0.14,P<0.01)。相较于吸烟非慢阻肺组,慢阻肺组SMP-30蛋白表达进一步增加(4.62±0.97比2.16±0.23,P<0.05)。结论 SMP-30的表达增加可能与肺泡巨噬细胞寿命延长、数量增多有关,有可能是慢阻肺发生发展的一个病理环节。(本文来源于《中国呼吸与危重监护杂志》期刊2015年04期）
衰老标记蛋白论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:探讨人晶状体上皮细胞株SRA01/04中衰老标记蛋白30(senescence marker protein 30,SMP30)的改变在高钙及急性氧化应激状态下的反应,为进一步研究年龄相关性白内障发病机制提供理论依据,并且在预防白内障的发生发展中提供重要的依据。方法:1.建立SMP30过表达和沉默稳定株:将人晶状体上皮细胞株SRA01/04细胞按5x104/孔接种于6孔板细胞培养板中,待细胞生长到20%时根据MOI=5使用过表达慢病毒(LV-RGN,19544-1)及沉默慢病毒(LV-RGN_RNAi,50743-1)以及相应的空载对照组慢病毒感染细胞,按常规培养方式培养24小时后将培养液更换成正常培养液。培养72小时后在荧光显微镜下观察转染效率。细胞生长到90%时加入2μg/ml嘌呤霉素,筛选出成功转染细胞。将所得转染细胞提取所需RNA及蛋白进行实时定量聚合酶链反应及蛋白质印迹检测细胞株转染效率,确认模型构建成功。2.观察高钙培养状态下SMP30基因及蛋白的变化:将转染细胞培养至80%时加入15mmol/L Ca Cl2作用24小时,再提取所需RNA及蛋白检测SMP30基因及蛋白的表达量。3.观察急性氧化应激培养状态下SMP30基因和蛋白的变化:将转染细胞培养至80%加入300μmol/L H2O2作用2小时后提取RNA及蛋白检测此状态下的SMP30基因和蛋白的表达量。结果:1.衰老标记蛋白30过表达(Over-expression,OE)及沉默(Knock-down,KD)稳定株的转染效率:RT-PCR结果显示OE组(2.8330±0.201)与NC-OE(Over-expression negative control group,过表达空载组)组(0.987±0.888)相比表达丰度为2.83倍(t=-20.309,p=0.003<0.05);KD组(0.090±0.040)与NC-KD(Knock-down negative control group,沉默空载组)组(1.009±0.006)相比敲减率为91%(t=-0.047,p=0.000<0.05)。WB结果显示:OE组(0.923±0.013)的SMP30蛋白表达量较NC-OE组(0.599±0.013)上调(p=0.000<0.05),KD组(0.610±0.002)较NC-KD组(0.742±0.013)下调(p=0.000<0.05)。2.高钙培养状态下SMP30蛋白及RGN m RNA基因表达量:RT-PCR结果显示OE组(5.234±0.512)RGN m RNA基因表达量较NC-OE组(1.007±0.149)上调(p=0.000<0.05),KD组(0.510±0.023)表达量较NC-KD(1.006±0.137)组下调(p=0.022<0.05);WB结果显示OE组(0.5668±0.0113)的SMP30蛋白表达量相比NC-OE组(1.107±0.006)下调(p=0.000<0.05),KD组(1.266±0.034)表达量较NC-KD组(1.099±0.026)上调(p=0.003<0.05)。与正常状态下的OE组及KD组相比,RGN m RNA基因表达量均出现反应性增加(pOE=0.002<0.05,pKD=0.000<0.05),而SMP30蛋白表达量在OE组中下调(p=0.000<0.05),KD组中上调(p=0.000<0.05)。3.急性氧化应激状态下各组基因与蛋白的表达量:RT-PCR结果显示OE组(4.332±0.264)RGN m RGN基因表达量较NC-OE组(1.001±0.050)上调(p=0.002<0.05),KD组(0.377±0.029)表达量较NC-KD组(1.004±0.112)下调(p=0.001<0.05);WB结果显示OE组(1.103±0.002)的SMP30蛋白表达量较NCOE组(0.876±0.010)上调(p=0.000<0.05),KD组(0.611±0.024)的表达量与NC-KD组(0.591±0.034)相比无统计学意义(p=0.46>0.05)。与正常状态相比OE组及KD组RGN m RGN基因表达量均出现反应性增加(pOE=0.001<0.05,pKD=0.001<0.05),SMP30蛋白表达量在OE组中上调(p=0.000<0.05),KD组表达量无统计学意义(p=0.967>0.05)。结论:构建过表达SMP30及沉默SMP30模型成功,可用于后续研究。在急性氧化应激状态下,与正常状态相比,SMP30过表达组SMP30表达量增加更为明显,提示在急性氧化应激时SMP30出现反应性增加,可能参与HLECs氧化应激的过程。在高钙状态下,SMP30表达量出现反应性改变,提示SMP30与细胞内钙稳态密切相关,发挥其钙调节作用。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
衰老标记蛋白论文参考文献
[1].AINT,THU,THU,WIN,李松蔓,韩子豪,陈曦,唐东永.急性氧化应激状态下人晶状体上皮细胞株SRA01/04中衰老标记蛋白30、Caspase-3、Ca~(2+)-ATP表达的变化[J].广西医科大学学报.2019
[2].AINT,THU,THU,WIN.人晶状体上皮细胞株SRA01/04中衰老标记蛋白30的改变在高钙及急性氧化应激状态的反应[D].广西医科大学.2019
[3].韩子豪,李松蔓,李艳玮,陈曦,张鸿侃.急性氧化应激初期人晶状体上皮细胞株SRA01/04中衰老标记蛋白30抗氧化作用的研究[J].眼科新进展.2019
[4].李松蔓,陈曦,韩子豪,THU,THU,WIN,AINT,衷昕.高表达衰老标记蛋白30对高钙诱导人晶状体上皮细胞株SRA01/04氧化应激的影响[J].中山大学学报(医学版).2019
[5].陈曦.衰老标记蛋白30对人晶状体上皮细胞株SRA01/04增殖和凋亡的影响[D].广西医科大学.2018
[6].周丹,刘平,赵德海,隋春杰.衰老标记蛋白-30和β-半乳糖苷酶的表达与晶状体上皮细胞凋亡相关性研究[J].哈尔滨医科大学学报.2017
[7].李舒凝,陈曦,张鸿侃,蒋林志,梁皓.过氧化氢诱导的急性氧化应激对人晶状体上皮细胞形态、生存率及衰老标记蛋白30(SMP30)表达的影响[J].眼科新进展.2017
[8].田黎明,彭圆,胡荣毅,张平,姜红浩.衰老标记蛋白30对过氧化氢所致人皮肤成纤维细胞衰老表型的影响[J].新乡医学院学报.2016
[9].田黎明,彭圆,许斌,胡荣毅,姜红浩.衰老标记蛋白30对H_2O_2所致人皮肤成纤维细胞衰老表型的影响[C].2016全国中西医结合皮肤性病学术年会论文汇编.2016
[10].高炜,王玉洁,蒋昕钰,姚欣.衰老标记蛋白30在慢性阻塞性肺疾病患者中的表达及意义[J].中国呼吸与危重监护杂志.2015
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