流感病毒生产的维持培养基开发及细胞代谢特征分析

流感病毒生产的维持培养基开发及细胞代谢特征分析

论文摘要

采用Simplex Lattice设计开发出适于流感病毒在MDCK细胞中高效扩增的维持培养基,同时以细胞生长培养基作为对照组,研究该培养基下病毒感染后的细胞代谢特征。通过统计学方法,确定维持培养基由A和F培养基以0.586∶0.432比例混合组成,在2 L生物反应器中其所支持的最大病毒滴度为214.062 HAU/100μL,较对照组提高了59.55%。代谢分析表明,在葡萄糖初始浓度一致的条件下,维持培养基组增强了细胞对葡萄糖的摄取及糖酵解途径,对于利于病毒增殖的组分,如丝氨酸、精氨酸、异亮氨酸等,细胞的消耗速率显著增强;对于抑制病毒扩增的组分,如丙氨酸,细胞的生成速率大幅度下降。该研究方法和所得的关键细胞代谢特征对于其他病毒疫苗培养基的开发和优化提供了方法借鉴和理论指导。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •     1.1.1 细胞株与病毒株
  •     1.1.2 培养基
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 细胞培养
  •     1.2.2 病毒感染
  •     1.2.3 Simplex Lattice实验设计
  •     1.2.4 细胞取样及样品分析
  •     1.2.5 细胞计数
  •     1.2.6 流感病毒滴度检测
  •     1.2.7 代谢物浓度检测
  •     1.2.8 代谢物比消耗或比生成速率及转化率计算
  •     1.2.9 统计学分析
  • 2 结果
  •   2.1 高产流感病毒维持培养基的筛选
  •   2.2 生物反应器验证
  •   2.3 维持培养基下的细胞代谢
  • 3 讨论
  • 4 结论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 谢盼,叶倩,刘旭平,谭文松

    关键词: 流感病毒,维持培养基,细胞,代谢

    来源: 生物技术通报 2019年05期

    年度: 2019

    分类: 基础科学,农业科技,医药卫生科技

    专业: 生物学,基础医学

    单位: 华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室

    基金: 国家自然科学基金项目(201206040,21406066),国家科技重大专项(2013ZX10004003-003-003)

    分类号: R373.13

    DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2019-0056

    页码: 133-139

    总页数: 7

    文件大小: 1590K

    下载量: 109

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