阿魏菇乙酸乙酯相三萜类化合物对食管癌Eca109细胞的增殖抑制及机制

阿魏菇乙酸乙酯相三萜类化合物对食管癌Eca109细胞的增殖抑制及机制

论文摘要

目的:探讨阿魏菇乙酸乙酯相三萜类化合物(ethyl acetate fraction of Pleurotus ferulatus triterpenoid,PFTP-E)对食管癌Eca109细胞的生长抑制作用及可能机制。方法:采用3-(4,5-二甲基噻-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐法检测PFTP-E体外抑制Eca109细胞的增殖活性;Hoechst 33258染色观察细胞凋亡;流式细胞术检测PFTP-E对Eca109细胞的增殖、周期、凋亡、线粒体膜电位以及胞内活性氧水平变化的影响;免疫印迹法检测PFTP-E对细胞凋亡相关蛋白Bcl2、Bax、聚腺苷二磷酸-核糖聚合酶(poly ADP-ribose polymerase,PARP)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(cysteinyl aspartate specific proteinase,Caspase)3、Caspase9、细胞周期相关蛋白Cyclin B1、内质网应激相关蛋白真核起始因子2α(eukaryotic initiation factor 2α,e IF2α)、CHOP以及丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated proteinkinase,MAPK)信号通路相关蛋白表达的影响。结果:PFTP-E以时间和剂量依赖性抑制Eca109细胞的增殖,并将细胞周期阻滞在G2/M期,进而诱导Eca109细胞凋亡。PFTP-E可引起Eca109细胞线粒体膜电位崩溃并导致胞内活性氧水平升高。PFTP-E可上调细胞色素c、Bax、p-e IF2α、CHOP表达,下调Bcl2、Cyclin B1表达,显著增强剪切型PARP、Caspase3及Caspase9表达,同时诱导内质网应激,激活MAPK/JNK信号通路。结论:PFTP-E能有效诱导Eca109细胞凋亡,其抗肿瘤机制与线粒体损伤途径、周期阻滞、内质网应激等有关。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料与试剂
  •   1.2 仪器与设备
  •   1.3 方法
  •     1.3.1 阿魏菇三萜类化合物的制备
  •     1.3.2 细胞培养
  •     1.3.3 MTT法检测细胞增殖能力
  •     1.3.4 Hoechst 33258染色观察细胞凋亡
  •     1.3.5 流式细胞术分析细胞凋亡、周期、胞内ROS水平和线粒体膜电位
  •     1.3.6 Western blot法检测相关蛋白表达量
  •   1.4 数据统计与分析
  • 2 结果与分析
  •   2.1 PFTP对肿瘤细胞的增殖抑制作用
  •   2.2 PFTP对Eca109细胞凋亡的影响
  •   2.3 PFTP各萃取相对Eca109细胞增殖的影响
  •   2.4 PFTP-E对Eca109细胞周期的阻滞作用
  •   2.5 PFTP-E对Eca109细胞凋亡的影响
  •   2.6 PFTP-E对Eca109细胞线粒体膜电位的影响
  •   2.7 PFTP-E对Eca109细胞胞内ROS水平的影响
  •   2.8 PFTP-E对Eca109细胞凋亡相关因子表达量的影响
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 王磊,张富春,刘军

    关键词: 阿魏菇,三萜类,细胞,细胞凋亡

    来源: 食品科学 2019年23期

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅰ辑

    专业: 轻工业手工业

    单位: 新疆大学生命科学与技术学院新疆生物资源基因工程重点实验室

    基金: 新疆大学纵向科研项目(61287),国家自然科学基金青年科学基金项目(31500752)

    分类号: TS201.4

    页码: 189-198

    总页数: 10

    文件大小: 7559K

    下载量: 209

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