导读:本文包含了癌细胞诱导分化论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:干细胞,细胞,胃癌,癌细胞,诱导,前列腺,肿瘤。
癌细胞诱导分化论文文献综述
常晓静,周欢娣,薛晓英,李彦格,张歌[1]（2018）在《胃癌细胞中NDRG2的表达及诱导分化研究》一文中研究指出目的:研究分化相关基因NDRG2在胃癌细胞中的表达及与细胞分化的关系。方法:采用RT-PCR及Western blot检测胃永生化粘膜上皮细胞GES1及6株胃癌细胞株中NDRG2的m RNA及蛋白的表达情况,进一步采用分化诱导剂TPA处理胃癌细胞株,分析NDRG2的表达水平及恶性表型是否可逆转。结果:与胃永生化粘膜上皮细胞GES1相比,NDRG2在6株胃癌细胞中有不同程度的表达下调,未分化胃癌细胞株HGC27中表达最低(P <0. 05)。不同浓度的分化诱导剂TPA(0、10、50、100nmol/L)处理胃癌细胞株HGC27后,随TPA浓度升高,NDRG2表达上调,100nmol/L组表达最高(P <0. 05),Transwell实验显示TPA干预组胃癌细胞的侵袭力明显减弱。结论:分化诱导剂干预可上调胃癌细胞NDRG2表达水平,逆转细胞恶性表型,且与细胞分化成正相关,故NDRG2可能是胃癌中一种候选的肿瘤抑制基因。(本文来源于《肿瘤预防与治疗》期刊2018年06期）
陈肖俊[2]（2018）在《硒-甲基硒代半胱氨酸诱导未分化甲状腺癌细胞凋亡及其机制研究》一文中研究指出【目的】甲状腺癌是内分泌系统常见的肿瘤之一,其中未分化甲状腺癌具有生长速度快、易发生转移、恶性程度高、预后差等特点,目前临床上尚无特别有效的药物针对该病进行治疗,因此,迫切需要找到有效治疗未分化甲状腺癌或者能改善其治疗效果的药物。本文着重研究硒-甲基硒代半胱氨酸(MSC)促进未分化甲状腺癌BHT101与8305C细胞凋亡的作用,并探讨其机制,初步构建了该药物诱导未分化甲状腺癌细胞凋亡的实验理论基础,为治疗未分化甲状腺癌提供了新思路。【方法】1、设置空白对照组和不同浓度的MSC实验组,浓度分别为25μM、50μM、100μM、150μM、200μM、400μM。采用CCK-8方法检测不同浓度组MSC对未分化甲状腺癌细胞增殖抑制的影响,挑选有意义浓度组再进行后续研究。2、设置空白组和不同浓度的MSC实验组,浓度分别为50μM、100μM、150μM,运用流式细胞技术检测不同浓度组MSC对未分化甲状腺癌细胞周期、凋亡和线粒体膜电位的影响。3、设置空白组和不同浓度的MSC实验组,浓度分别为50μM、100μM、150μM,采用Hochest 33258染色检测MSC对未分化甲状腺癌细胞核形态变化的影响。4、设置空白组和不同浓度的MSC实验组,浓度分别为50μM、100μM、150μM,运用免疫印迹法检测凋亡相关蛋白的变化及展开分子机制研究。5、采用DCHF-DA荧光探针检测未分化甲状腺癌细胞内ROS的变化。【结果】1、CKK-8实验结果表明MSC可以明显抑制未分化甲状腺癌细胞增殖,MSC在50μM浓度组即可明显抑制细胞的生长;在25μM浓度组第48 h和72 h也可明显抑制细胞生长,上述结果均呈剂量相关性。2、流式细胞检测结果表明MSC能够诱导未分化甲状腺癌细胞出现周期阻滞,呈现一定的剂量相关性。在较高浓度的150μM组可以使G1期细胞数比例明显降低(由62.616%降低为34.085%),S期与G2/M期细胞数比例明显升高(分别由24.871%和12.513%升高为43.037%和22.868%),同时也观察到明显的亚二倍体凋亡峰(sub G1)出现,由50μM组的20%上升到150μM组的60%,呈剂量相关性。3、Hoechst 33258染色结果表明,MSC诱导未分化甲状腺癌细胞出现核固缩,Annexin V-FITC/PI双染法进一步证实了50μM、100μM和150μM浓度组的MSC作用48 h后均能诱导细胞凋亡,BHT101细胞凋亡率由15.3%上升到42.2%,8305C细胞凋亡率由10.8%上升到30.7%,呈剂量相关性。4、用western blot实验分别检测胞浆和线粒体中Cyt c的表达,显示MSC作用后线粒体中Cyt c的表达量降低,而胞浆中Cyt c的表达量升高,提示MSC诱导细胞凋亡与线粒体有关。同时也发现MSC作用后抗凋亡蛋白Bcl-2表达量降低,促凋亡蛋白Bax表达量升高,凋亡相关因子Active-Caspase3和Cleved-PARP的表达量升高,WB灰度值统计结果显示,Bcl-2/Bax比值随着MSC浓度的升高而降低,且呈一定的剂量相关性,表明MSC诱导细胞凋亡是caspase依赖性的。5、PI3K/Akt信号通路检测显示MSC是通过抑制PI3K/Akt信号通路而发挥诱导细胞凋亡作用的。MSC能够抑制PI3K、Akt和m TOR的磷酸化,同时使其相应的原型表达升高,p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt和p-m TOR/m TOR的比值随着MSC浓度的升高而降低,上述结果均呈一定的剂量相关性,GS3Kβ的原型和活性形式GSK-3β(p-Tyr216)的表达升高,而其失活形式GSK-3β(p-Ser9)水平降低,而Mcl-1的表达水平下降,MSC作用之后survivin的表达降低,Bad的原型升高而其磷酸化随着MSC浓度的升高而降低,表明MSC是通过调控PI3K/Akt信号通路来抑制癌细胞的生长并促进其凋亡。6、采用DCHF-DA荧光探针检测到MSC能够诱导肿瘤细胞产生大量的ROS,ROS在细胞内将DCHF-DA氧化成带荧光的DCF,MSC处理后未分化甲状腺癌细胞内DCF明显升高,荧光强度随着MSC浓度的升高而增强,呈现一定的剂量相关性,表明MSC诱导的凋亡和ROS有着密切的关系。【结论】MSC能够明显抑制未分化甲状腺癌细胞BHT101与8305C的增殖,并使细胞出现周期阻滞,MSC诱导肿瘤细胞内产生大量的ROS,进而抑制PI3K/Akt信号通路,引起线粒体膜通透性增加、线粒体膜电位下降以及凋亡相关因子释放,从而诱发caspase级联反应,最终导致凋亡的发生。MSC能诱导未分化甲状腺癌细胞BHT101与8305C凋亡,有望成为治疗未分化甲状腺癌的药物之一,值得进一步深入研究,本文为未分化甲状腺癌的治疗提供了新思路。(本文来源于《苏州大学》期刊2018-05-01）
孔令凯[3]（2018）在《重组新城疫病毒诱导未分化甲状腺癌细胞死亡机制的研究》一文中研究指出背景:未分化甲状腺癌(ATC)是死亡率较高的内分泌恶性肿瘤之一,由于其不稳定的遗传特性及复杂的基因改变,一直缺少有效的治疗手段。常规手段如手术切除、放化疗效果都不理想。目前,一系列新的治疗方法如基因治疗、诱导分化治疗、蛋白抑制剂治疗等远不够成熟。基因治疗尚处于起步阶段;诱导分化治疗还没有经过大规模的临床试验,治疗效果有待验证;而蛋白抑制剂治疗存在口服利用率低、特异性不高、副作用大等弊端,还需要进一步研究。已有报道,溶瘤新城疫病毒(NDV)能够感染并诱导多种肿瘤细胞死亡,但对正常细胞无杀伤作用,因此溶瘤病毒作为一种新颖的治疗手段具有广泛的应用前景。但是,溶瘤新城疫病毒是否感染未分化甲状腺癌细胞还未见报道。本次研究探讨重组新城疫病毒(r FMW/GFP)对未分化甲状腺癌细胞的溶瘤能力。方法:本次研究在体内、体外两种途径验证了重组新城疫病毒r FMW/GFP对未分化甲状腺癌细胞THJ-16T和THJ-29T的溶瘤能力。体外实验,重组新城疫病毒r FMW/GFP感染未分化甲状腺癌细胞,通过生物化学和形态学实验方法研究病毒溶瘤机制;体内实验,重组新城疫病毒r FMW/GFP尾静脉注射成瘤小鼠,研究重组病毒抗肿瘤能力。结果:(1)构建表达GFP荧光蛋白的重组新城疫病毒r FMW/GFP。(2)重组新城疫病毒r FMW/GFP与亲本新城疫病毒(NDV/FMW)都能感染未分化甲状腺癌细胞,且病毒复制能力无明显差异。(3)在2D培养条件下,重组新城疫病毒r FMW/GFP感染ATC细胞THJ-16T和THJ-29T,诱导细胞发生早期及晚期凋亡,蛋白印迹法检测到Caspase-3及PARP(ADP-ribose)裂解条带;在3D培养条件下,r FMW/GFP抑制ATC细胞的成球能力。(4)重组新城疫病毒r FMW/GFP感染ATC细胞后活化p38 MAPK信号通路;ATC细胞经p38 MAPK通路的特异性抑制剂SB203580预处理后,抑制r FMW/GFP诱导的p38 MAPK的活化并减少了Caspase-3及PARP裂解。(5)重组新城疫病毒r FMW/GFP与亲本NDV/FMW都能抑制THJ-16T诱导的小鼠成瘤。结论:本次研究中,我们鉴定出重组报告病毒r FMW/GFP通过p38 MAPK通路诱导未分化甲状腺癌细胞发生凋亡,提示溶瘤新城疫病毒可作为一种新颖的手段治疗未分化甲状腺癌。(本文来源于《大连医科大学》期刊2018-02-01）
李健森[4]（2017）在《软木肟酸激活Notch-1信号通路通过P53诱导甲状腺未分化癌细胞凋亡》一文中研究指出目的:甲状腺未分化癌(anaplastic thyroid carcinoma,ATC)是甲状腺癌中发病率较低但恶性度很高预后极差的恶性肿瘤,目前治疗的方法主要有传统手术和放化疗结合手术的方式,但效果都不理想。随着ATC遗传和分子发病机制研究的不断深入,基因靶向治疗也逐渐兴起,并有望成ATC治疗的发展方向之一。Notch信号通路在进化上高度保守,通过相邻细胞之间的相互作用调节细胞、组织、器官的分化和发育。软木肟酸(Suberoyl bis-hydroxamic acid,SBHA)属于第二代异羟肟酸类组蛋白乙酰化酶抑制剂,它可以诱导激活Notch1信号通路,在神经内分泌肿瘤中起到抑癌作用。本研究探讨在甲状腺未分化癌细胞中应用软木肟酸激活Notch1信号通路,是否可以抑制肿瘤细胞增殖诱导细胞凋亡,在此基础上探讨Notch1信号通路是否通过P53通路发挥作用。方法:1.收集天津医科大学肿瘤医院甲状腺未分化癌组织标本16例,应用免疫组织化学染色检测Notch1和P53蛋白表达情况。应用Western blot技术检测正常甲状腺细胞系、甲状腺乳头状癌系和甲状腺未分化癌细胞系中Notch1蛋白的表达情况。2.应用不同浓度SBHA作用于甲状腺未分化癌细胞系,应用MTT实验判断SBHA对甲状腺未分化癌细胞增殖情况的影响,应用流式细胞术判断SBHA对甲状腺未分化癌细胞促凋亡效应,应用Western blot技术检测Notch1、cleaved caspase3、cleaved PRAP和Bax蛋白的表达情况,来验证细胞凋亡情况。应用Real-time PCR技术检测Notch1和Hes1的m RNA水平,来判断Notch1信号通路的激活情况。应用siRNA干扰细胞系Notch1的表达,再应用SBHA激活该信号通路,判断SBHA是否作用于Notch1通路。3.应用不同浓度SBHA作用于甲状腺未分化癌细胞系,应用Western blot技术检测P53和P21蛋白的表达情况,来判断细胞凋亡是否通过该通路完成,并分析和Notch1通路是否有关。应用Real-time PCR技术检测P53和P21的mRNA情况验证P53和P21激活情况。应用免疫共沉淀实验检测Notch1蛋白和P53蛋白是否存在联系。应用shRNA干扰细胞系P53的表达,再应用SBHA激活Notch1通路,验证Notch1和P53两者的关系。结果:1.免疫组织化学结果显示,16例组织切片中仅有1例切片呈现Notch1和P53阳性结果,且为同一患者组织。Western blot检测结果显示正常甲状腺细胞系中有Notch1蛋白表达,甲状腺乳头状癌系中Notch1蛋白低表达而甲状腺未分化癌细胞系中Notch1蛋白不表达。2.应用不同浓度SBHA作用于甲状腺未分化癌细胞系,可以诱导Notch1mRNA和蛋白的表达,活化Notch1信号通路,有效的抑制细胞的增殖,诱导促凋亡蛋白的表达,促进细胞凋亡,并且呈时间和剂量双重依赖性。3.在甲状腺未分化癌细胞系中应用不同浓度SBHA可以诱导P53和P21蛋白和mRNA时间和剂量依赖性的表达,这与Notch1一致。免疫共沉淀实验提示两者存在关联,shRNA干扰实验提示SBHA激活Notch1信号通路是通过P53通路诱导细胞凋亡的。结论:1.Notch1和P53蛋白在甲状腺未分化癌组织中处于低表达状态,Notch1蛋白在甲状腺未分化癌细胞系中低表达或不表达。2.SBHA在甲状腺未分化癌细胞系中可以激活Notch1信号通路,抑制细胞的增殖,并且呈时间和剂量双重依赖诱导细胞凋亡。3.在甲状腺未分化癌细胞系中,Notch1和P53两者存在联系,SBHA激活Notch1信号通路是通过P53通路诱导细胞凋亡的。(本文来源于《天津医科大学》期刊2017-05-01）
刘欣跃,张尚弟,李婧,刘倩,刘泽菁[5]（2017）在《倍半萜化合物Chabranol诱导低分化胃癌细胞凋亡的分子机制》一文中研究指出目的探讨倍半萜化合物Chabranol诱导低分化胃癌细胞BGC-823发生凋亡可能的分子机制。方法采用透射电镜观察凋亡细胞超微结构的变化;实时荧光定量PCR法检测Chabranol处理前后各组细胞中凋亡相关基因p53、Bcl-2、Bax、Survivin、Caspase-3的转录表达水平。结果在高倍透射电镜下,Chabranol处理组BGC-823细胞出现早期凋亡现象,细胞核中异染色质明显增多,髓样体增多,而对照组BGC-823细胞结构完整。实时荧光定量PCR结果显示:与对照组比较,Chabranol处理后的BGC-823细胞p53、Bcl-2和Survivin降低,Bax和Caspase-3增加,均P<0.05,差异有统计学意义;GES-1、MKN28、SGC-7901细胞各基因的相对表达量与对照组比较,P>0.05,差异无统计学意义。结论倍半萜化合物Chabranol具有潜在的抗胃癌活性,有可能成为治疗低分化胃癌的新药物,其致低分化胃癌细胞凋亡的分子机制与p53、Bcl-2、Bax、Survivin、Caspase-3基因的异常转录表达相关。(本文来源于《兰州大学学报(医学版)》期刊2017年01期）
梁炜,朱梦楚,袁潇,田伊卿,王梅[6]（2015）在《胃癌细胞诱导脐带MSCs向癌相关MSCs转分化研究》一文中研究指出该文探讨了胃癌细胞培养液上清对人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,huc MSCs)向癌相关MSCs转分化的作用及转分化后的MSCs对胃癌细胞增殖和迁移的影响。收集胃癌细胞HGC-27的培养液上清,与等体积的低糖DMEM混合后培养huc MSCs 48 h,检测处理后huc MSCs中癌相关MSCs蛋白及mi R-221表达的改变。用诱导后的huc MSCs培养液上清与等体积的高糖DMEM混合后培养HGC-27 48 h,检测处理前后HGC-27的增殖和迁移能力的变化。将huc MSCs和HGC-27共培养,检测共培养后HGC-27增殖和迁移能力。结果发现,胃癌细胞培养液上清处理后,huc MSCs中波形蛋白(vimentin)和成纤维细胞活化蛋白(fibroblast activation protein,FAP)表达增强,mi R-221表达上调。用处理后的huc MSCs培养液上清培养HGC-27,细胞增殖以及迁移能力增强。共培养后HGC-27的增殖及迁移能力显着增强。以上结果表明,胃癌细胞培养液上清可诱导huc MSCs获得癌相关MSCs样表型和促进胃癌细胞增殖和迁移的功能,为肿瘤微环境细胞的重塑性和脐带MSCs应用的安全性评估提供实验依据。(本文来源于《中国细胞生物学学报》期刊2015年09期）
张礼荣[7]（2015）在《HIF-1a诱导胰腺癌细胞去分化及转移作用及其靶向成像研究》一文中研究指出胰腺癌(Pancreatic cancer)在肿瘤导致死亡中位居第四位,具有进展迅速、转移早、放化疗抵制等特点。目前,胰腺癌基础及临床相关研究虽然获得了一些进展,但五年生存率仍维持在5%左右。针对胰腺癌的有效诊疗手段仍然任重而道远。探索胰腺癌发生、发展的过程及其确切机制,仍然是当前胰腺癌基础及临床研究的重点、难点。研究表明:应激(缺氧、乏养、放化疗)诱导的肿瘤微环境在肿瘤发生、发展过程中起着关键作用。病理研究显示:作为一种乏血供肿瘤组织,胰腺癌组织中存在大面积的低氧乏氧区。近年来,低氧诱导因子-1(Hyopxia induced factor-1)在实体瘤发生、发展过程中的作用引起了越来越多的关注。针对胰腺癌的大规模临床标本检测发现:HIF-1a表达水平与胰腺癌预后呈高度负相关,是诱导肿瘤增殖、血管生成、转移、免疫逃逸的关键分子。然而,其确切机制尚未完全阐明。本研究目的:(1)明确低氧条件下,HIF-1a诱导自噬在胰腺癌非干细胞去分化中的作用及其确切机制;(2)明确低氧条件下,HIF-1a诱导自噬在胰腺癌干细胞转移中的作用及其确切机制;(3)筛选能与HIF-1a特异性配对结合的DNA寡核苷酸短链,合成多功能纳米粒子,初步探讨其应用于胰腺癌干细胞体内外磁共振靶向成像效果。研究内容和方法:(1)采用改良的Transwell分离实验方法,筛选人胰腺癌细胞系(Panc-1)中胰腺癌干细胞以及胰腺癌非干细胞;并利用流式细胞仪、成球实验、免疫荧光、Western Blot及体内致瘤实验检测分选出的胰腺癌细胞的干性;(2)将分选出的胰腺癌非干细胞培养在间歇性低氧条件下(1%氧气、94%氮气环境中培养12 h后,再在20%氧气培养12 h,如此反复4次),利用干扰和沉默技术,给予以下分组:(1)对照组;(2)胰腺癌非干细胞+HIF-1a si RNA;(3)胰腺癌非干细胞+3-MA(自噬抑制剂);(4)胰腺癌非干细胞+HIF-1a si RNA+3-MA。在以下时间点(24h,48h,72h),采用显微镜观测细胞成球能力及形态,流式细胞技术检测细胞内CD133+细胞比例,RT-PCR及Western-blot分析细胞相关基因及蛋白表达水平变化(Oct-4、c-MYC、CD44、HIF-1a、LC3-I、LC3-II、Beclin 1)。(3)将分选的胰腺癌干细胞培养在间歇性低氧条件下(1%氧气、94%氮气环境中培养12 h后,再在20%氧气培养12 h,如此反复4次),利用干扰和沉默技术,给予以下分组:(1)对照组;(2)胰腺癌干细胞+HIF-1a si RNA;(3)胰腺癌干细胞+3-MA(自噬抑制剂);(4)胰腺癌干细胞+HIF-1a si RNA+3-MA。作用不同时间(24h,48h,72h)点,观察以下指标:Tranwell观察细胞转移情况;Western-blot检测细胞内相关蛋白的表达含量变化(HIF-1a、CD133、CD44、E-Ca、Vementin、MMP-9、LC3-II、Beclin 1)。(4)γ-Fe3O4@DMSA-DNA寡核苷酸短链纳米颗粒合成和制备;分析其稳定性及毒性。(5)胰腺癌干细胞、胰腺癌非干细胞与γ-Fe3O4@DMSA-DNA寡核苷酸短链纳米颗粒共浴,MTT及流式技术检测纳米粒子对肿瘤细胞增殖及凋亡的影响;普鲁士蓝染色及3.0T磁共振观察纳米粒子与胰腺癌干细胞、胰腺癌非干细胞结合的特异性及体外成像靶向性。(6)构建胰腺癌裸鼠皮下瘤模型,尾静脉注射γ-Fe3O4@DMSA及γ-Fe3O4@DMSA-DNA纳米颗粒,注射后30min、1.5h、2h、24h等不同时间点,采用3.0T磁共振观察瘤体信号改变,测量T2弛豫时间。研究结果:(1)改良的Transwell分离实验可以作为分选肿瘤干细胞实验手段之一,且该方法具有简单易行、经济、可重复性强等特点。(2)间歇性缺氧条件下,HIF-1a可以通过诱导自噬,促进胰腺癌非干细胞去分化而获得干细胞的表型和功能。(3)作为缺氧诱导的核心分子之一,HIF-1a在缺氧应激条件下是促进胰腺癌干细胞转移的关键调控分子,而其主要通过诱导胰腺癌干细胞EMT转化及自噬来实现这一过程。(4)与HIF配对的DNA寡核苷酸短链偶联氧化铁纳米磁粒子可以特异性结合到胰腺癌干细胞,并且随着时间的延长,结合效率逐渐增高。胰腺癌非干细胞可以结合少量的DNA寡核苷酸短链偶联氧化铁纳米磁粒子,但即使共育时间延长,结合效率也无明显增高。同时胰腺癌干细胞结合纳米磁粒子的时间明显要早于胰腺癌非干细胞,这一时间梯度差,为临床MRI检测胰腺癌干细胞增加了可行性。(5)裸鼠皮下胰腺癌模型中,能特异结合HIF-1a的DNA寡核苷酸短链偶联氧化铁纳米磁粒子能在瘤体内聚集,其与单纯氧化铁纳米粒子在注射30min、1.5h、2h及24h后瘤体的T2弛豫时间有统计学差异。结论:(1)在缺氧应激条件下,HIF-1a通过自噬维持胰腺癌干细胞和胰腺癌非干细胞之间的动态平衡;并可以诱导胰腺癌干细胞通过EMT转化而转移。(2)氧化铁纳米粒偶联能特异结合HIF-1a的DNA寡核苷酸短链(γ-Fe3O4@DMSA-DNA寡核苷酸短链)较单纯氧化铁纳米粒在体外能相对特异性的结合HIF高表达的胰腺癌干细胞;能特异性聚集在胰腺癌肿瘤组织内,并且能有效的改变相应MR成像信号强度及T2豫驰时间。(本文来源于《江苏大学》期刊2015-04-17）
李逸仙,孙保存,刘志勇,赵秀兰,张艳辉[8]（2014）在《血管内皮诱导培养基促进结肠癌细胞向血管内皮细胞方向分化的研究》一文中研究指出目的:探讨结肠癌细胞在血管内皮诱导环境下向血管内皮细胞方向分化的潜能。方法:将3种不同分化程度的结肠癌细胞HCT116、SW480和HT29分别置于含有内皮细胞诱导因子的条件培养基中培养15 d后,利用Western blot检测血管内皮特异性指标白细胞分化抗原31(cluster of differentiation 31,CD31)和白细胞分化抗原34(cluster of differentiation 34,CD34)的表达变化;利用细胞免疫荧光检测HCT116细胞在内皮诱导培养基及普通培养基中CD31、CD34的表达变化;通过叁维培养观察内皮诱导培养基对HCT116细胞体外成管能力的影响。结果:Western blot显示诱导培养15 d后的3种细胞中低分化HCT116细胞的CD31、CD34表达增强最明显,而中分化的SW480细胞和高分化的HT29变化不显着。细胞免疫荧光显示与普通培养基相比,内皮诱导培养基中HCT116细胞的CD31、CD34表达显着增强。体外叁维培养发现经内皮诱导培养后的HCT116细胞较对照细胞成管能力显着增强。结论:血管内皮诱导培养基促进具有较强干细胞样特性的结肠癌细胞向血管内皮细胞方向分化。(本文来源于《中国肿瘤临床》期刊2014年10期）
何苗[9]（2014）在《对映—贝壳杉烷型二萜Leukamenin E诱导人宫颈癌细胞Hela的分化及骨架的重排》一文中研究指出癌症是威胁人类健康的重大疾病之一，化疗和手术治疗是治疗癌症的主要手段。诱导肿瘤细胞分化成为新型的肿瘤治疗手段。与传统的肿瘤治疗方式相比，具有用药剂量小，毒副作用低等优势。香茶菜属植物在我国分布广泛，种类繁多，其中有30多种作为民间药用植物；香茶菜属植物中对映-贝壳杉烷型二萜化合物的含量极为丰富，为主要次生代谢产物。据报道，它们均具有良好的抗肿瘤作用。目前，有关Leukamenin E诱导Hela细胞分化，Leukamenin E对人宫颈癌细胞Hela骨架的影响研究尚未见文献报道。本文以对映-贝壳杉烷型二萜Leukamenin E(甘肃产拟缺香茶菜中分离得到)为受试药物，以人宫颈癌Hela细胞为受试对象。用台盼蓝排染法检测了该化合物对Hela细胞的生长抑制作用，并对该化合物对细胞周期的影响进行了研究；同时，利用平板集落形成，测定碱性磷酸酶、吉姆萨染色法研究Leukamenin E对Hela细胞的分化诱导情况；最后，利用间接免疫荧光和荧光染色法，观察该化合物对Hela细胞微丝、微管和角蛋白中间纤维骨架重组及含量的影响。主要结果如下：（1）台盼蓝排染法结果显示：Leukamenin E对Hela细胞有较明显的生长抑制作用，并且表现出浓度和时间依赖性。在同一时间，不同浓度下，随着浓度的升高，生长抑制作用逐渐增强。（2）平板集落形成能力的检测：Leukamenin E对Hela细胞集落形成能力有明显抑制作用，并且在不同浓度之间存在显着差异。（3）倒置显微镜观察细胞形态的变化：对照组细胞形态正常，无明显改变，排列密集，仅见少许漂浮的细胞。随着药物浓度的升高，细胞数量依次减少并呈现出时间和浓度依赖性，细胞排列稀疏，形状变的不规则，伸出长的不规则的突起，培养液中有许多漂浮的呈桑葚样细胞。（4）吉姆萨染色法结果显示：Leukamenin E对细胞核形态有明显影响，细胞核形态类似肾形，同时，与对照相比，细胞核的体积变小，核浆比值下降，并且随着药物浓度的升高和时间的延长，此现象愈加越明显，同时胞质中出现可见的小空泡。（5）流式细胞术检测结果显示：Leukamenin E对Hela细胞的周期有阻滞作用。在48h和72h后以G1期阻滞为主，S期细胞含量略有下降。（6）活性氧的变化：随着Leukamenin E浓度的升高，细胞内活性氧(ROS)含量增加，说明活性氧增加是启动细胞分化的事件之一。（7）碱性磷酸酶活性的变化：Hela细胞经不同浓度Leukamenin E处理之后，碱性磷酸酶活性显着升高，与对照组相比，存在显着差异。（8）划痕法观察Hela细胞迁移的结果显示：Leukamenin E对Hela细胞的迁移有明显的抑制作用，且浓度越高，抑制作用越明显。在最高浓度时，细胞的迁移已经完全被抑制。（9）罗丹明标记的鬼笔环肽对微丝染色结果显示：Leukamenin E对Hela细胞中微丝骨架具有解聚作用，并且具有浓度依赖性。对照组细胞胞质中应力纤维含量丰富，平行的应力纤维束排布杂乱。在较低浓度时，应力纤维的排布与对照相比变得整齐，成为平行的束状纤维，沿细胞纵轴平行排列。随着浓度的升高，应力纤维的分布变得不均匀，并且含量明显减少，在最高浓度时，应力纤维基本消失。（10）免疫荧光技术观察微管骨架结果显示：Leukamenin E对Hela细胞中微管骨架在细胞中的排布有明显的影响。微管在对照组细胞中均匀分布，加药处理后，总体趋势是向核周聚集，并且时间越长，浓度越高，聚集现象越明显，在核周形成荧光强度较强的斑状区域，微管从核周开始，向四周发射。（11）免疫荧光技术观察角蛋白中间纤维骨架结果显示：Leukamenin E对Hela细胞中角蛋白中间纤维骨架在细胞中的排布有明显的影响。角蛋白中间纤维在对照组细胞中均匀分布，在低浓度条件下，没有发生变化。在较高浓度条件下，角蛋白中间纤维在细胞中发生了重排，总体趋势是向核周聚集，并且时间越长，浓度越高，聚集现象越明显，在核周聚集形成荧光亮斑，角蛋白中间纤维从核周开始，向四周发射，明显发生了重排。（12）流式细胞术检测细胞中叁种骨架含量的结果显示：Leukamenin E对Hela细胞的叁种骨架含量都有不同的影响。随着药物浓度的升高，微丝的含量明显减少，微管和角蛋白的含量增多。(本文来源于《西北师范大学》期刊2014-05-01）
余泉峰[10]（2014）在《小鼠前列腺癌细胞对骨髓间充质干细胞诱导分化作用的初步研究》一文中研究指出目的在体外共培养环境中小鼠前列腺癌细胞对骨髓间充质干细胞诱导分化其机制进行初步探讨,补充并完善骨髓间充质干细胞在前列腺癌发生发展中的作用的小鼠模型,从而为前列腺癌细胞通过自分泌/融合机制诱导骨髓间充质干细胞向前列腺癌细胞方向分化奠定了一定的理论基础,并提出了一种崭新的癌细胞来源理论,为当代肿瘤的临床治疗和科学研究提供了一个新的方向。方法解剖标记有绿色荧光蛋白的小鼠,获得双下肢股骨和腓骨,冲洗骨髓腔得到全骨髓,应用贴壁培养筛选方法,选取10%胎牛血清、适当的细胞接种密度等条件进行细胞培养,对小鼠骨髓间充质干细胞的鉴定,则通过倒置相差光学显微镜观察光镜下细胞形态,通过脂肪诱导分化试剂培养骨髓间充质干细胞,并使用油红O染色来鉴定其干细胞特性,最后采用流式细胞学检测CD90、CD105、CD34和CD45指标染色结果对骨髓间充质干细胞进行细胞表型鉴定,分离和扩增则待细胞分裂贴壁90%以上即进行细胞传代。在体外环境中进行MSC与小鼠前列腺癌细胞的非接触式共培养,共培养72小时后,在倒置相差光学显微镜下观察MSC的形态变化,后通过文献筛查选取特异性较高的前列腺干细胞抗原(PSCA)指标作为小鼠前列腺癌细胞的标记物,并对非接触式共培养的MSC进行免疫组化染色观察,进而对于前列腺癌细胞是否可以诱导MSC向其分化的结果进行初步的判断。结果通过贴壁筛选方法进行分离和扩增,得到稳定传代的成纤维细胞型、长梭型、星型等多型性细胞形态,并对T3传代细胞进行脂肪诱导分化后得到明显有脂肪分化倾向的MSC,另还通过流式细胞学检查进行细胞表型鉴定,结果提示CD90阳性,CD105阳性,CD34阴性,CD45阴性。在体外环境中进行MSC与小鼠前列腺癌细胞非接触式共培养后72小时,观察结果提示：1、共培养后观察光镜下MSC细胞形态依然为多形性,边界清晰,与单独培养结果无明显异常。2、T3传代细胞进行脂肪诱导分化结果显示油红O染色呈现粉红色阳性结果。3、选取小鼠前列腺癌细胞特异性高的PSCA指标对共培养后的MSC进行免疫组织化学染色,提示有弱阳性结果。结论1、本实验通过贴壁筛选方法和适当的细胞培养条件,成功分离和扩增培养得到稳定传代的符合克隆样生长和成纤维样细胞等形态特征,并且通过油红0染色、流式细胞学检查验证了具有干细胞特性的贴壁生长的小鼠骨髓间充质干细胞。2、本研究通过体外环境非接触式共培养小鼠前列腺癌细胞与MSC,初步证实了经过72小时共培养后,MSC中的部分细胞表型发生了改变,表达了具有特异性较高的PSCA标记物,以此可以得到一个初步推测,即小鼠前列腺癌细胞在共培养体系中分泌的多种细胞因子可以通过旁分泌机制而非融合来促进MSC向前列腺上皮分化的作用。因此,本实验可以推测在体外环境中MSC受到肿瘤分泌的多种细胞因子的诱导,分化成为前列腺癌上皮细胞的肿瘤诱导MSC分化理论,肿瘤诱导MSC分化理论的提出,让我们重新认识了MSC在肿瘤形成中的作用,为以后肿瘤的基因靶向治疗等多方面提供更加有力的理论支持。(本文来源于《天津医科大学》期刊2014-05-01）
癌细胞诱导分化论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
【目的】甲状腺癌是内分泌系统常见的肿瘤之一,其中未分化甲状腺癌具有生长速度快、易发生转移、恶性程度高、预后差等特点,目前临床上尚无特别有效的药物针对该病进行治疗,因此,迫切需要找到有效治疗未分化甲状腺癌或者能改善其治疗效果的药物。本文着重研究硒-甲基硒代半胱氨酸(MSC)促进未分化甲状腺癌BHT101与8305C细胞凋亡的作用,并探讨其机制,初步构建了该药物诱导未分化甲状腺癌细胞凋亡的实验理论基础,为治疗未分化甲状腺癌提供了新思路。【方法】1、设置空白对照组和不同浓度的MSC实验组,浓度分别为25μM、50μM、100μM、150μM、200μM、400μM。采用CCK-8方法检测不同浓度组MSC对未分化甲状腺癌细胞增殖抑制的影响,挑选有意义浓度组再进行后续研究。2、设置空白组和不同浓度的MSC实验组,浓度分别为50μM、100μM、150μM,运用流式细胞技术检测不同浓度组MSC对未分化甲状腺癌细胞周期、凋亡和线粒体膜电位的影响。3、设置空白组和不同浓度的MSC实验组,浓度分别为50μM、100μM、150μM,采用Hochest 33258染色检测MSC对未分化甲状腺癌细胞核形态变化的影响。4、设置空白组和不同浓度的MSC实验组,浓度分别为50μM、100μM、150μM,运用免疫印迹法检测凋亡相关蛋白的变化及展开分子机制研究。5、采用DCHF-DA荧光探针检测未分化甲状腺癌细胞内ROS的变化。【结果】1、CKK-8实验结果表明MSC可以明显抑制未分化甲状腺癌细胞增殖,MSC在50μM浓度组即可明显抑制细胞的生长;在25μM浓度组第48 h和72 h也可明显抑制细胞生长,上述结果均呈剂量相关性。2、流式细胞检测结果表明MSC能够诱导未分化甲状腺癌细胞出现周期阻滞,呈现一定的剂量相关性。在较高浓度的150μM组可以使G1期细胞数比例明显降低(由62.616%降低为34.085%),S期与G2/M期细胞数比例明显升高(分别由24.871%和12.513%升高为43.037%和22.868%),同时也观察到明显的亚二倍体凋亡峰(sub G1)出现,由50μM组的20%上升到150μM组的60%,呈剂量相关性。3、Hoechst 33258染色结果表明,MSC诱导未分化甲状腺癌细胞出现核固缩,Annexin V-FITC/PI双染法进一步证实了50μM、100μM和150μM浓度组的MSC作用48 h后均能诱导细胞凋亡,BHT101细胞凋亡率由15.3%上升到42.2%,8305C细胞凋亡率由10.8%上升到30.7%,呈剂量相关性。4、用western blot实验分别检测胞浆和线粒体中Cyt c的表达,显示MSC作用后线粒体中Cyt c的表达量降低,而胞浆中Cyt c的表达量升高,提示MSC诱导细胞凋亡与线粒体有关。同时也发现MSC作用后抗凋亡蛋白Bcl-2表达量降低,促凋亡蛋白Bax表达量升高,凋亡相关因子Active-Caspase3和Cleved-PARP的表达量升高,WB灰度值统计结果显示,Bcl-2/Bax比值随着MSC浓度的升高而降低,且呈一定的剂量相关性,表明MSC诱导细胞凋亡是caspase依赖性的。5、PI3K/Akt信号通路检测显示MSC是通过抑制PI3K/Akt信号通路而发挥诱导细胞凋亡作用的。MSC能够抑制PI3K、Akt和m TOR的磷酸化,同时使其相应的原型表达升高,p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt和p-m TOR/m TOR的比值随着MSC浓度的升高而降低,上述结果均呈一定的剂量相关性,GS3Kβ的原型和活性形式GSK-3β(p-Tyr216)的表达升高,而其失活形式GSK-3β(p-Ser9)水平降低,而Mcl-1的表达水平下降,MSC作用之后survivin的表达降低,Bad的原型升高而其磷酸化随着MSC浓度的升高而降低,表明MSC是通过调控PI3K/Akt信号通路来抑制癌细胞的生长并促进其凋亡。6、采用DCHF-DA荧光探针检测到MSC能够诱导肿瘤细胞产生大量的ROS,ROS在细胞内将DCHF-DA氧化成带荧光的DCF,MSC处理后未分化甲状腺癌细胞内DCF明显升高,荧光强度随着MSC浓度的升高而增强,呈现一定的剂量相关性,表明MSC诱导的凋亡和ROS有着密切的关系。【结论】MSC能够明显抑制未分化甲状腺癌细胞BHT101与8305C的增殖,并使细胞出现周期阻滞,MSC诱导肿瘤细胞内产生大量的ROS,进而抑制PI3K/Akt信号通路,引起线粒体膜通透性增加、线粒体膜电位下降以及凋亡相关因子释放,从而诱发caspase级联反应,最终导致凋亡的发生。MSC能诱导未分化甲状腺癌细胞BHT101与8305C凋亡,有望成为治疗未分化甲状腺癌的药物之一,值得进一步深入研究,本文为未分化甲状腺癌的治疗提供了新思路。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
癌细胞诱导分化论文参考文献
[1].常晓静,周欢娣,薛晓英,李彦格,张歌.胃癌细胞中NDRG2的表达及诱导分化研究[J].肿瘤预防与治疗.2018
[2].陈肖俊.硒-甲基硒代半胱氨酸诱导未分化甲状腺癌细胞凋亡及其机制研究[D].苏州大学.2018
[3].孔令凯.重组新城疫病毒诱导未分化甲状腺癌细胞死亡机制的研究[D].大连医科大学.2018
[4].李健森.软木肟酸激活Notch-1信号通路通过P53诱导甲状腺未分化癌细胞凋亡[D].天津医科大学.2017
[5].刘欣跃,张尚弟,李婧,刘倩,刘泽菁.倍半萜化合物Chabranol诱导低分化胃癌细胞凋亡的分子机制[J].兰州大学学报(医学版).2017
[6].梁炜,朱梦楚,袁潇,田伊卿,王梅.胃癌细胞诱导脐带MSCs向癌相关MSCs转分化研究[J].中国细胞生物学学报.2015
[7].张礼荣.HIF-1a诱导胰腺癌细胞去分化及转移作用及其靶向成像研究[D].江苏大学.2015
[8].李逸仙,孙保存,刘志勇,赵秀兰,张艳辉.血管内皮诱导培养基促进结肠癌细胞向血管内皮细胞方向分化的研究[J].中国肿瘤临床.2014
[9].何苗.对映—贝壳杉烷型二萜LeukameninE诱导人宫颈癌细胞Hela的分化及骨架的重排[D].西北师范大学.2014
[10].余泉峰.小鼠前列腺癌细胞对骨髓间充质干细胞诱导分化作用的初步研究[D].天津医科大学.2014
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