导读:本文包含了酶催化活力论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:活力,大曲,聚糖,稳定剂,萤火虫,突变,乳液。
酶催化活力论文文献综述
房佩佩[1]（2018）在《定点突变提高萤火虫荧光素酶催化活力的研究》一文中研究指出萤火虫荧光素酶催化的发光反应是一个双底物反应,其基本的生物化学反应过程是虫荧光素酶在氧气和Mg~(2+)参与下,催化荧光素生成氧化荧光素,发射可见光。该反应发光强度与ATP浓度在一定的浓度范围内正相关。ATP广泛且稳定存在于生命体细胞中,其含量可以指示食品及加工环境中微生物的数量,因此萤火虫荧光素酶可以用于食品生产过程及食品成品微生物指标的快速检测。此外,萤火虫荧光素酶也可应用于细胞的代谢研究、生物传感器、药物筛选等领域。因此获得性质稳定、发光性能优良的萤火虫荧光素酶对于实际生产和生活都具有十分重要的意义。本研究旨在构建能够高效表达和纯化的高酶活虫荧光素酶突变体,对突变体酶和野生型酶的酶学性质进行比较,探究酶的稳定剂对酶催化活力的影响,并尝试在枯草芽孢杆菌中表达萤火虫荧光素酶。首先,本研究将野生型北美萤火虫荧光素酶Luc的423位异亮氨酸,436位天冬氨酸,530位亮氨酸分别突变为亮氨酸、甘氨酸、精氨酸,构建突变型萤火虫荧光素酶Luc1.1的表达菌株E.coli BL21(DE3,pET30a-luc1.1)。为研究突变型Luc1.1的性质特点,测定其酶活为野生型Luc的11.62倍,催化发光的最大发射波长相对于野生型红移了6 nm;温度及pH对酶活的影响研究,结果表明野生型和突变型萤火虫荧光素酶在pH 7.5时酶活达到最大值,pH变化时酶催化发光的最大发射波长发生轻微变化:野生型Luc催化发光的最大发射波长随pH变化波动小,突变型Luc1.1在体系为中性或偏碱性时,催化发光的最大发射波长明显红移;保存温度的升高时,两种酶的活力均有所下降,但突变型Luc1.1酶活在30℃后下降速率较慢而表现出稍好的热稳定性。其次,为实现萤火虫荧光素酶在枯草芽孢杆菌中的表达,分别构建枯草芽孢杆菌重组菌B.subtilis WB800(pMA0911-luc)及B.subtilis WB800(pMA0911-luc1.1)表达野生型Luc及突变型Luc1.1。实验测定结果表明萤火虫荧光素酶在枯草芽孢杆菌中的表达量下降55%左右,酶活大小与大肠杆菌工程中表达的酶基本一致。第叁,将突变型萤火虫荧光素酶Luc1.1进行单点饱和突变,突变位点为423位、436位及530位,突变氨基酸残基类型为除突变型Luc1.1以外的其他19种氨基酸,共获得57个虫荧光素酶突变体。分别将各个突变体酶诱导表达、纯化和定量,测定酶活力与野生型Luc酶活进行比较,结果表明:用具有非极性侧链的疏水性氨基酸如Val、Met代替Luc1.1的423位Leu,用具有较小侧链氨基酸如Ala、Cys、Ser替换436位Gly,用带正电的氨基酸如Lys、His替换530位Arg,均能够提高萤火虫荧光素酶的催化效率;通过饱和突变共获得高于野生型Luc酶活10倍以上的虫荧光素酶突变体8个,将Luc1.1的436位Gly替换为Ala、Cys、Ser的突变体酶的活力可达到野生型22.60倍、21.37倍、19.96倍。本实验还将高酶活的萤火虫荧光素酶突变体与市售产品相比较,结果表明突变体酶的催化活力已高于国内多个厂家市售萤火虫荧光素酶。最后,研究了四种稳定剂对于突变型Luc1.2(虫荧光素酶Luc1.1的436位替换为Ala的突变体)的酶活增强作用和催化发光反应的动力学特点改善作用。结果表明,对于Luc1.2的催化反应体系,辅酶A(CoA)、焦磷酸钾(PPiK)、叁磷酸钠(STPP)及5′-叁磷酸肌苷叁钠(ITP)增强发光作用的最适浓度分别为1.0 mmol/L、0.08 mmol/L、1.0 mmol/L、0.8 mmol/L。添加最适浓度的CoA可将突变体Luc1.2催化体系的相对发光强度提高至野生型Luc未添加增强剂反应体系的47.2倍左右,添加最适浓度的STPP可增强至31.6倍左右,PPiK和ITP对Luc1.2催化体系也具有一定的增强相对发光强度的作用。测定添加最适浓度试剂时的虫荧光素酶Luc1.2催化体系的发光体系的动力学特点,结果表明对体系稳定效果最好的为CoA,作用效果为反应开始后15 s内酶活保持80%左右,其他叁种物质STPP、PPiK、ITP可使发光强度在5 s内酶活保持80%左右。(本文来源于《江南大学》期刊2018-06-01）
张浩,胡智慧,刑爽,李镇江,谢彪[2]（2017）在《酸浓度和pH值对浓香型大曲酯化酶催化活力的影响》一文中研究指出研究了己酸、乳酸、丁酸、乙酸的浓度以及pH值对浓香型大曲酯化酶催化合成四种酯(己酸乙酯、乳酸乙酯、丁酸乙酯、乙酸乙酯)的影响。结果表明,大曲酯化酶催化合成四种酯的最适酸质量浓度分别为己酸8 g/L,乳酸1 g/L,丁酸9 g/L,乙酸12 g/L;在同一酸浓度条件下,大曲酯化酶催化合成己酸乙酯、丁酸乙酯、乙酸乙酯最适pH值均为4.5,乳酸乙酯最适pH值为6.0;大曲酯化酶催化相同物质的量浓度混合酸的试验结果表明,己酸乙酯的合成以酯化酶催化反应为主,而乳酸乙酯和丁酸乙酯的合成以化学反应为主。(本文来源于《中国酿造》期刊2017年05期）
薛鲁燕,黄锡荣[3]（2011）在《适宜漆酶催化活力表达的新型离子液体微乳液的构建》一文中研究指出用疏水性离子液体取代挥发性有机溶剂配制适宜于酶活力表达的离子液体基微乳液是一个很有意义的尝试。我们观察到,借助非离子表面活性剂Triton X-100,AOT可以与疏水性离子液体[Bmim][PF_6]混溶并形成较大区域的单相微乳液。通过探针K_3Fe(CN)_6在单相微乳液相区中扩散系数随含水量的显着变化,区分出了water-in-[Bmim][P_6](W/IL)微乳液相区。紫外可见光谱证实了该微乳液相区可以增溶无机盐CoCl_2。结合W/IL微乳液各组分的红外光谱特征,我们用重水取代普通水,首次用FTIR证明了W/IL微乳液中本体水的存在。研究还观察到,通过调节微乳液界面组成,可以提高增溶在该微乳液中漆酶的催化活力。(本文来源于《中国化学会第十叁届胶体与界面化学会议论文摘要集》期刊2011-07-20）
杨树林,孟广荣,曾亮亮[4]（2006）在《pH值对纤维素酶系内切β-葡聚糖苷酶活力影响的酶催化动力学模型》一文中研究指出pH值是影响酶催化反应速率的重要因素之一,建立动力学模型有助于定量分析酶解反应。经典的“叁状态”动力学模型未考虑pH值对底物解离状态的影响及产物抑制的作用,该文对“叁状态”动力学模型进行改进。在一系列假设基础上提出绿色木霉产纤维素酶水解羧甲基纤维素钠(CMC-Na)的反应机理,建立了pH值对纤维素酶系内切β-葡聚糖苷酶活力影响的动力学模型,推导出反应速率表达式。Lineweaver-Burk作图法求得内切β-葡聚糖苷酶水解CMC-Na在不同pH的动力学参数:K′m和V′max,试验最佳初始pH值与模型计算pH值符合,从而模型得以验证。(本文来源于《南京理工大学学报(自然科学版)》期刊2006年01期）
酶催化活力论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
研究了己酸、乳酸、丁酸、乙酸的浓度以及pH值对浓香型大曲酯化酶催化合成四种酯(己酸乙酯、乳酸乙酯、丁酸乙酯、乙酸乙酯)的影响。结果表明,大曲酯化酶催化合成四种酯的最适酸质量浓度分别为己酸8 g/L,乳酸1 g/L,丁酸9 g/L,乙酸12 g/L;在同一酸浓度条件下,大曲酯化酶催化合成己酸乙酯、丁酸乙酯、乙酸乙酯最适pH值均为4.5,乳酸乙酯最适pH值为6.0;大曲酯化酶催化相同物质的量浓度混合酸的试验结果表明,己酸乙酯的合成以酯化酶催化反应为主,而乳酸乙酯和丁酸乙酯的合成以化学反应为主。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
酶催化活力论文参考文献
[1].房佩佩.定点突变提高萤火虫荧光素酶催化活力的研究[D].江南大学.2018
[2].张浩,胡智慧,刑爽,李镇江,谢彪.酸浓度和pH值对浓香型大曲酯化酶催化活力的影响[J].中国酿造.2017
[3].薛鲁燕,黄锡荣.适宜漆酶催化活力表达的新型离子液体微乳液的构建[C].中国化学会第十叁届胶体与界面化学会议论文摘要集.2011
[4].杨树林,孟广荣,曾亮亮.pH值对纤维素酶系内切β-葡聚糖苷酶活力影响的酶催化动力学模型[J].南京理工大学学报(自然科学版).2006
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