结蛋白相关心肌病论文_黄为,马文珠,WANG,Xue-jun

导读:本文包含了结蛋白相关心肌病论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:蛋白,心肌病,小鼠,转基因,心肌,疾病,论文。

结蛋白相关心肌病论文文献综述

黄为,马文珠,WANG,Xue-jun^[1]（2003）在《结蛋白相关心肌病转基因小鼠闰盘重塑》一文中研究指出目的　探讨结蛋白相关心肌病 (DRC)闰盘相关蛋白表达和分布的变化。方法　以 1个月DRC转基因小鼠为模型 ,采用Western印迹和免疫标记共聚焦显微镜观察闰盘相关蛋白在心室中的表达和分布。结果　与野生型结蛋白转基因小鼠和非转基因小鼠相比 ,突变型结蛋白小鼠 pan cadherin、α catenin、β catenin总蛋白升高 (P <0 0 5 ) ;α catenin和 β catenin以胞浆部分显着 (P <0 0 5 ) ;pan cadherin膜蛋白部分和胞浆部分升高 (P <0 0 5 ) ,而细胞骨架蛋白 (TIF)部分降低 ;Cx4 3总蛋白和TIF则明显降低 (P <0 0 5 ) ,存在着再分布。野生型结蛋白小鼠与非转基因小鼠比较 ,各蛋白均无显着变化。免疫标记证实这一结果。结论　DRC早期已发生闰盘重塑 ,闰盘蛋白表达和分布改变可能促进心律失常和心功能衰竭的发生。(本文来源于《中华心血管病杂志》期刊2003年11期）

黄为,马文珠,汪学军^[2]（2003）在《结蛋白相关心肌病转基因小鼠桥粒相关蛋白表达和分布的变化(英文)》一文中研究指出目的通过观察结蛋白相关心肌病(desmin-relatedcardiomyopa-thy,DRC)转基因小鼠桥粒相关蛋白表达和分布的变化,以探讨其发病机制。方法应用Western印迹和免疫标记共聚焦显微镜观察桥粒斑蛋白(desmoplakin,DP)和plakoglobin(PG)在1个月小鼠心室肌组织中的表达和分布。结果突变型结蛋白转基因小鼠(D7-des)较野生型结蛋白转基因小鼠(WT-des)和非转基因小鼠(NTG)DP总蛋白和细胞骨架蛋白部分(TIF)明显升高,免疫标记心肌组织DP分布在细胞的两端、侧面和胞质,且密度显着增加,而WT-des与NTG比较无明显变化;3组动物之间,PG没有变化;免疫标记显示D7-des结蛋白排列紊乱,失去正常的结构。结论该研究首次发现突变结蛋白破坏了结蛋白和桥粒结构的完整性,影响了心肌细胞机械耦联,可能与DRC舒缩功能异常和心力衰竭的发生有关。(本文来源于《中国临床康复》期刊2003年15期）

黄为^[3]（2003）在《结蛋白相关心肌病发病机制的研究》一文中研究指出背景：如同其它的真核细胞，心肌细胞的结构和功能完整有赖于由微丝、微管和中间丝组成的分布广泛的骨架蛋白。结蛋白(desmin，des)是心肌主要的中间丝蛋白。结蛋白表达上调常见于心肌肥厚和充血性心力衰竭等疾病，而结蛋白突变则可引起结蛋白相关心肌病(desmin-related cardiomyopathy，DRC)和扩张性心肌病。 DRC是结蛋白相关肌病(desmin-related myopathies，DRM)在心脏上的表现。DRM为一散发、家族性的有不同临床表现的神经肌肉疾病，其特点为肌细胞内结蛋白病理性增加。心脏损害主要表现为传导异常、心律失常和充血性心力衰竭。尽管DRM可牵涉到横纹肌和平滑肌，但通常仅心肌或心肌和骨骼肌受到影响，而且心肌病往往是死亡的主要原因。到目前为止，结蛋白基因和α-B-Crystallin(CryAB)的突变被认为与DRM有关。CryAB作为晶状体主要的结构蛋白，具有分子伴侣活性，在其它蛋白质处于易感状态时，可保护其免受损伤，主要表现为抑制各种蛋白质的凝聚和酶的失活。由于在DRM的结蛋白异常聚积物中常伴有CryAB和泛素(ubiquitin，Ub)，因此泛素蛋白酶体系统(ubiquitin-proteasome system，UPS)可能参与了DRM的发病机制。UPS是细胞内ATP依赖的非溶酶体蛋白降解机制，可高效并高度选择性地降解细胞内蛋白质，在应激状态下也降解细胞内结构蛋白。在Alzheimer、Parkinson、Huntington和Creutzfeldt-Jakob等几乎所有的神经退化性疾病的细胞内都可见到Ub化聚积物，UPS功能抑制。UPS突变与神经退化性疾病和先天性心脏病有关。然而DRC的异常蛋白聚积物是否损害USP功能，以及它们之间的因果关系目前尚不清楚。闰盘是心肌电、机械和代谢耦联的结构基础。它是由非特化肌膜、粘合膜、桥粒和缝隙连接组成的特殊结构。粘合膜和桥粒与心肌机械耦联有关，而缝隙连接参与了心肌的化学耦联和电耦联。在粘合膜，肌动蛋白(actin)通过结合α-actinin、Vinculin、α-catenin(α-cat)、β-Catenin(β-Cat)和γ-catenin(γ-cat)，与N-Cadherin(N-cad)相连接，从而强化细胞间的粘附。由于肌原纤维附着在粘合膜，这使收缩信号可沿胞浆膜扩布。桥粒由Cadherins、Armodilla家族和plakins叁种超家族组成，在心肌和表皮上广泛存在。南京医科大学博士学位论文Cadherin:家族的desmoglein和desmocolin通过桥粒斑蛋白(desmoPlakin，DP)和Plakoglobin(PG，also named as犷ea tenin，丫一cat)与中间丝如结蛋白(desmin)相连接，提供心肌结构支持。缝隙连接允许相邻细胞间离子、代谢物和其它信号分子通过由connex ins(Cxs)组成膜通道转运，调节着细胞与细胞之间的电流的扩布。成年心肌组织主要含有connex in40(Cx40)、Cx43和Cx45。由于结蛋白丝在闰盘纵向插入桥粒，因此DRC紊乱的结蛋白网可能会破坏桥粒结构和功能的完整并进而影响闰盘的其它结构，导致闰盘重塑。目的:1.研究突变结蛋白(D7一des)转基因小鼠心脏UPs功能，以及异常的蛋白积聚物与UPS损害之间的关系。2.研究R120G一aB一crys ta川n(RlzoG一eryAa)转基因小鼠心脏uPS功能，以及异常的蛋白积聚物与uPS损害之间的关系。3.研究CryAB是否可减少突变结蛋白引起的蛋白积聚和改善UPS功能.4.研究D7一des转基因小鼠的闰盘重塑。5.研究R120G一CryAB转基因小鼠的闰盘重塑。方法:1.取07一des转基因小鼠和R120G一CryAB转基因小鼠的心肌，提取蛋白，通过We 5 t e r n b 1 ots观察心室Ub化蛋白并测定蛋白酶体肤酶活性。2.PCR扩增野生型和突变型结蛋白(WT一des和D7一des)cDNA以及野生型和突变型CryAB(WT一CryAB和R120G一CryAB)cDNA，将它们首先克隆到ToPoTA载体，胶切纯化后，再亚克隆到PEGFP一c1质粒，构建真核细胞结蛋白和CryAB表达载体。3.将含有UPS底物GFPu质粒稳定转染HEK293细胞，筛选细胞，建立稳定表达GFPu的GFPu一1细胞系。4.用限制性内切酶切割WT一cryAB质粒和G FPu质粒，T4DNA连接酶连接，构建含有WT一CryAB和GFPu的融合表达质粒(CryAB一GFPu)。5.将CryAB一GFPu转染HEK293细胞，建立稳定表达wT一eryAB和eFPu的GFPu一2细胞系。6.将WT一des或D7一des质粒短暂转染GFPu一细胞，通过Western bl。ts和免疫标记共聚焦显微镜观察蛋白积聚和GFPu关系。7.将wT一CryAB或R120G一CryAB质粒短暂转染GFPu一细胞，通过Wes tern blots和免疫标记共聚焦显微镜观察蛋白积聚和GFPu关系。8.将wT一des或D7一des质拉短暂转染GFPu一细胞，通过Wes tern blots和免疫标记共聚焦显微镜观察蛋白积聚和GFpu关系。9.提取 D7一des转基因小鼠和R12oe一eryAB南京医科大学博士学位论文转基因小鼠心室组织蛋白，通过Wes t e r n b 1 0 ts和免疫标记共聚焦显微镜观察闰盘相关蛋白分布和表达的变化。结果:1.D7一des(l)D7一des转基因小鼠心肌组织有Ub化蛋白积聚，在1个月时就开始升高，6个月达到峰值;使用荧光底物n和m检测体外的D7一des和WT一des的蛋白酶体肤酶活性。与WT一des和非转基因动物(NTG)比较，D7一des心肌匀浆可溶性蛋白部分蛋白酶体肤酶活性没有改变，进一步(本文来源于《南京医科大学》期刊2003-04-01）

结蛋白相关心肌病论文开题报告

（1）论文研究背景及目的

此处内容要求：

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例：

目的通过观察结蛋白相关心肌病(desmin-relatedcardiomyopa-thy,DRC)转基因小鼠桥粒相关蛋白表达和分布的变化,以探讨其发病机制。方法应用Western印迹和免疫标记共聚焦显微镜观察桥粒斑蛋白(desmoplakin,DP)和plakoglobin(PG)在1个月小鼠心室肌组织中的表达和分布。结果突变型结蛋白转基因小鼠(D7-des)较野生型结蛋白转基因小鼠(WT-des)和非转基因小鼠(NTG)DP总蛋白和细胞骨架蛋白部分(TIF)明显升高,免疫标记心肌组织DP分布在细胞的两端、侧面和胞质,且密度显着增加,而WT-des与NTG比较无明显变化;3组动物之间,PG没有变化;免疫标记显示D7-des结蛋白排列紊乱,失去正常的结构。结论该研究首次发现突变结蛋白破坏了结蛋白和桥粒结构的完整性,影响了心肌细胞机械耦联,可能与DRC舒缩功能异常和心力衰竭的发生有关。

（2）本文研究方法

调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。