Orexin-A对脊髓腹角神经元基本电生理参数及尼古丁电流的作用

Orexin-A对脊髓腹角神经元基本电生理参数及尼古丁电流的作用

论文摘要

目的:研究orexin-A对脊髓腹角神经元基本电生理参数及烟碱型乙酰胆碱受体(nAChR)的作用。方法:使用7~12 d的新生SD大鼠。麻醉后,将含有腰骶膨大的脊髓分离并切片。用木瓜蛋白酶(papain,0.18 g/30 mL人工脑脊液消化切片并孵育40 min。显微镜下选取腹角,使用抛光的巴斯德吸管进行神经元的急性机械分离。对贴壁的健康神经元进行穿孔膜片钳记录。结果:①急性分离的脊髓腹角神经元状态良好,具有形状多样的胞体和完整的突起;②9个急性分离的脊髓腹角神经元有自发动作电位;③持续灌流orexin-A(OXA) 2 min后,在5例细胞记录到4个脊髓腹角神经元的自发动作电位放电频率增加了(63.64±5.25)%,幅度等参数无明显变化;④在15个神经元,有12例细胞给予0.3 mmol/L尼古丁诱导出内向电流,幅度为(142.97±75.02)pA,用100 nmol/L OXA进行2 min的预处理,可显著抑制电流幅度至(69.07±61.07)pA(P<0.001),抑制率为(54.75±22.62)%;⑤在9个神经元中有7例细胞给予尼古丁诱导的电流幅度为(129.31±69.38)pA,将100 nmol/L OXA共同施用于神经元,尼古丁诱导的电流幅度降为(68.61±34.98)pA,在此基础上,通过施用orexin-1受体(OX1R)拮抗剂SB334867(10μmol/L)2 min后可阻断OXA对尼古丁诱导电流的抑制作用,电流幅值为(93.46±56.45)pA。因此,SB334867可完全取消OXA对尼古丁电流的抑制作用。但对于另两例神经元,SB334867并未阻断OXA的抑制作用。结论:Orexin-A可能通过OX1R对脊髓大部分腹角神经元的尼古丁电流具有抑制作用,但不能排除orexin-2受体(OX2R)也参与OXA作用的可能性。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 实验动物
  •   1.2 药品与溶液
  •   1.3 急性分离脊髓腹角神经元
  •   1.4 穿孔膜片钳记录
  •   1.5 数据采集与分析
  • 2 结果
  •   2.1 形态学观察
  •   2.2 急性分离脊髓腹角神经元的自发放电
  •   2.3 Orexin-A对脊髓腹角神经元自发动作电位的影响
  •   2.4 Orexin-A对脊髓腹角神经元尼古丁电流的作用
  •   2.5 SB334867对orexin-A抑制尼古丁电流的影响
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 黄艳,高凌云,朱苏月,张环环,汪萌芽,郑超

    关键词: 脊髓腹角神经元,型乙酰胆碱受体,穿孔膜片钳记录

    来源: 皖南医学院学报 2019年03期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技,基础科学

    专业: 生物学,基础医学

    单位: 皖南医学院细胞电生理研究室

    基金: 国家自然科学基金项目(31200828,31271155),安徽省高校优秀青年人才支持计划项目(gxyqZD2016175,gxyq2017034),安徽省高校自然科学研究项目(KJ2018A0266),皖南医学院博士科研启动基金(rcqd201609)

    分类号: R338

    页码: 205-210

    总页数: 6

    文件大小: 1129K

    下载量: 70

    相关论文文献

    • [1].急性分离的脊髓腹角神经元膜片钳记录技术[J]. 皖南医学院学报 2017(06)
    • [2].脊髓全横断后腹角神经元NT-3的表达[J]. 中国煤炭工业医学杂志 2011(06)

    标签:;  ;  ;  

    Orexin-A对脊髓腹角神经元基本电生理参数及尼古丁电流的作用
    下载Doc文档

    猜你喜欢