气肿疽梭菌NanA基因核酸疫苗的免疫效果评价

论文摘要

为了检测气肿疽梭菌NanA基因核酸疫苗的免疫效果,在成功构建pVAX1-NanA真核表达重组质粒的基础上将其转染至Vero细胞,通过间接免疫荧光鉴定其表达,并将成功构建的pVAX1-NanA质粒大量提取后免疫Balb/c小鼠,设置pVAX1-NanA核酸疫苗组、pVAX1空载体组和PBS对照组。对小鼠采血并分离血清,用ELISA测定血清中的IgG、IgG1、IgG2a抗体水平和IFN-γ、IL-4细胞因子水平;第3次免疫2周后,用流式细胞仪测定小鼠脾脏中的CD4+和CD8+T细胞水平。结果表明,pVAX1-NanA核酸疫苗免疫Balb/c小鼠后,小鼠血清中IgG、IgG1、IgG2a的抗体水平极显著高于pVAX1空载体组和PBS对照组（P<0.01）;IFN-γ和IL-4细胞因子水平极显著高于pVAX1空载体组和PBS对照组（P<0.01）;CD4+、CD8+T细胞分析表明, pVAX1-NanA免疫组的CD4+和CD8+T细胞水平显著高于pVAX1组和PBS对照组（P<0.05）,pVAX1-NanA核酸疫苗组的CD4+/CD8+T细胞比值高于pVAX1空载体组与PBS对照组（P<0.05）,pVAX1空载体组和PBS对照组之间无显著差异（P>0.05）。试验成功制备了pVAX1-NanA核酸疫苗,且pVAX1-NanA核酸疫苗可刺激Balb/c小鼠产生体液免疫和细胞免疫。

论文目录

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 实验动物

1.1.2 试剂

1.1.3 仪器设备

1.2 方法

1.2.1 pVAX1-NanA质粒的表达鉴定

1.2.1.1 pVAX1-NanA质粒转染

1.2.1.2 NanA基因表达鉴定

1.2.2 动物免疫

1.2.3 免疫水平检测

1.2.3.1 IgG水平检测

1.2.3.2 IgG1、IgG2a、IFN-γ、IL-4水平检测

1.2.3.3 CD4+、CD8+T淋巴细胞测定

2 结果

2.1 NanA基因的表达鉴定

2.2 免疫效果评价

2.2.1 血清中IgG的水平

2.2.2 血清中IgG1水平

2.2.3 血清中IgG2a水平

2.2.4 血清中IFN-γ水平

2.2.5 血清中IL-4水平

2.2.6 CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群测定

3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 陈竞,张皓,马玉腾,于成东,齐强,金鑫

关键词: 气肿疽梭菌,基因,核酸疫苗,免疫原性

来源: 动物医学进展 2019年12期

年度: 2019

分类: 农业科技

专业: 畜牧与动物医学

单位: 延边大学农学院,延边大学珲春校区

分类号: S852.4

DOI: 10.16437/j.cnki.1007-5038.2019.12.014

页码: 68-73

总页数: 6

文件大小: 1826K

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气肿疽梭菌NanA基因核酸疫苗的免疫效果评价

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