导读:本文包含了虎纹捕鸟蛛论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:毒素,胰蛋白酶,因子,活性,肿瘤,蜘蛛,突变体。
虎纹捕鸟蛛论文文献综述
罗玉娇,舒衡平,李滨,蒋立平[1]（2016）在《虎纹捕鸟蛛Kunitz型毒素基因的分子改造和表达》一文中研究指出目的构建HW11c40突变体,寻找合适的表达系统表达HW11c40突变体和HWTX-XI(虎纹捕鸟蛛毒素-XI),解决HWTX-XI来源问题和HW11c40改造后毒素难于获取的难题,为合适HW11c40突变体的筛选和治疗急性胰腺炎高效新药的研制奠定基础。方法用PCR定点突变的方法突变HW11c40相关氨基酸残基,构建HW11c40突变体。HW11c40突变体和HWTX-XI基因经PCR扩增后插入到pET-40b(+)载体,基因5'端插入肠激酶切割位点,再重组到大肠埃希菌BL21(DE3)进行原核周质表达,获得相应的融合蛋白并进行SDS-PAGE鉴定,用镍柱纯化融合蛋白。融合蛋白用肠激酶酶切,释放出的目的蛋白用Tricine-SDS-PAGE进行鉴定,用镍柱分离目的蛋白,进行高效液相色谱进行进一步分离纯化后作质谱鉴定。对HW11c40突变体和HWTX-XI的表达时间、温度和IPTG浓度进行优化。结果成功获得HW11c40的4个突变体,并正确构建HW11c40突变体和HWTX-XI的原核表达载体。经SDS-PAGE和Tricine-SDS-PAGE鉴定,重组质粒转化菌在无IPTG诱导的情况下成功表达所有HW11c40突变体和HWTX-XI的融合蛋白,经肠激酶酶切均获得对应的目的蛋白,其中HWTX-XI表达量为3.4mg/L。结论成功构建出HW11c40突变体和HWTX-XI的重组质粒并在原核细胞内高效表达出相应的目的蛋白,开辟了基因工程表达HWTX-XI的新途径,同时解决了HW11c40改造后毒素获取难题,突破了整个系列研究的瓶颈,为突变体的筛选及治疗急性胰腺炎高效新药的研制奠定了基础。(本文来源于《中国病原生物学杂志》期刊2016年08期）
蒋立平,章洁,李先耀,唐雅琴[2]（2016）在《虎纹捕鸟蛛毒素-XVⅡa的基因克隆及在酿酒酵母中的表达》一文中研究指出目的基因克隆和表达虎纹捕鸟蛛毒素-XVⅡa,并进行纯化和质谱鉴定。方法通过随机测序虎纹捕鸟蛛(Ornithoctonus huwena)毒腺cDNA文库,获得编码多肽毒素HWTX-XVⅡa的基因,对其进行生物信息学分析;构建HWTX-XVⅡa基因真核表达质粒,利用S78株酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)表达系统进行分泌表达,表达产物经离子交换、反相高效液相色谱分离纯化和质谱鉴定。结果克隆得到虎纹捕鸟蛛毒素-XVⅡa的基因,构建的真核表达质粒表达产物纯化后进行质谱鉴定,为分子质量单位为3.250 004ku的虎纹捕鸟蛛毒素-XVⅡa。结论获得虎纹捕鸟蛛毒素-XVⅡa的基因及其表达产物,为研究其生物学功能奠定了基础。(本文来源于《中国病原生物学杂志》期刊2016年07期）
王一蓉,毛海峰,陈嘉勤[3]（2014）在《虎纹捕鸟蛛毒素对脑缺血模型大鼠海马肿瘤坏死因子凋亡通路的影响》一文中研究指出背景:虎纹捕鸟蛛毒素经离子通道分析技术证明是一种作用于突触前膜的N型钙离子通道阻断剂。目的:观察新型钙通道拮抗剂虎纹捕鸟蛛毒素对全脑缺血再灌注损伤模型大鼠海马组织肿瘤坏死因子凋亡通路中肿瘤坏死因子α、肿瘤坏死因子受体Ⅰ、肿瘤坏死因子受体相关死亡结构域、Fas相关死亡结构域蛋白、Caspase 8表达的影响。方法:采用Pulsinelli"四血管阻断法"构建全脑缺血结合蛛网膜下腔置管大鼠模型,通过留置的PE10管注入虎纹捕鸟蛛毒素或生理盐水。应用电镜、RT-PCR实验技术检测全脑缺血再灌注损伤大鼠海马CA1区锥体细胞超微结构和胞内线粒体形态变化及对海马组织中肿瘤坏死因子α、肿瘤坏死因子受体Ⅰ、肿瘤坏死因子受体相关死亡结构域、Fas相关死亡结构域蛋白、Caspase 8等肿瘤坏死因子凋亡通路相关因子基因表达。结果与结论:虎纹捕鸟蛛毒素能维持全脑缺血再灌注脑损伤大鼠线粒体基本形态且能不同程度降低肿瘤坏死因子凋亡通路中促凋亡因子肿瘤坏死因子α、肿瘤坏死因子受体Ⅰ、肿瘤坏死因子受体相关死亡结构域、Fas相关死亡结构域蛋白、Caspase 8 mRNA表达。提示天然活性多肽虎纹捕鸟蛛毒素作为一种新型N-型电压依赖性钙通道阻断剂,能有效阻断胞外Ca2+的大量内流,使细胞内游离钙降低,减少由于细胞内钙超载而引起的一系列病理损害,从而保护神经细胞,减轻缺血缺氧海马神经细胞的损伤。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2014年36期）
刘圆圆,黄新,谢赛华,谭芳,张峥峥[4]（2014）在《广西虎纹捕鸟蛛毒成分的氨基酸测定及红外光谱定性分析》一文中研究指出目的通过质量分析的方法初步鉴定蛛毒的毒素化学成分。方法采用氨基酸自动分析仪对蛛毒的多种氨基酸成分进行定性及定量的研究,并且辅以红外光谱法进行定性研究。结果通过氨基酸测定法从虎纹捕鸟蛛中鉴定到谷氨酸、胱氨酸、赖氨酸含量较多,分别为8.15%、7.86%、7.64%,氨基酸总量为55.93%;从样品粉末的红外光谱可知:该化合物可能含-C-H,-OH,NH,-CO-N-H,苯环等主要氨基酸基团。结论结果表明该鉴别方法操作简便、专属性强,可用于蛛毒的定性鉴别和含量测定,初步建立了虎纹蛛毒成分的定性鉴定研究方法。(本文来源于《环球中医药》期刊2014年02期）
廖业,夏嫱,朱伟,吴启仙[5]（2013）在《虎纹捕鸟蛛毒素对人结肠癌SW480细胞体外增殖的影响》一文中研究指出目的探讨虎纹捕鸟蛛毒素对结肠癌SW480细胞体外增殖的影响。方法以体外培养的人结肠癌SW480细胞株为实验模型,以不同浓度的虎纹捕鸟蛛毒素对SW480细胞进行体外干预,通过MTT药物敏感实验检测其抑制率及计算IC50;镜下观察经Hoechst 33342染色后的细胞形态变化;流式细胞仪观测经AnnexinⅤ-FITC/PI双染的细胞状态的变化;分光光度法测定Caspase-3的相对活化倍数的变化。结果 MTT药物敏感实验显示,5～100 mg/ml虎纹捕鸟蛛粗毒对人结肠癌SW480细胞有抑制作用,且呈一定剂量效应关系。其48 h半抑制浓度(IC50)为43.68 mg/ml;显微镜下可见虎纹捕鸟蛛粗毒干预后的SW480细胞数量明显减少,细胞形态各异,并出现细胞碎片;流式细胞结果显示:10 mg/ml虎纹捕鸟蛛粗毒诱导的SW480细胞凋亡率最高,达(57.66±20.44)%;50 mg/ml虎纹捕鸟蛛粗毒干预后,SW480细胞坏死率最高,达(25.36±15.03)%;100 mg/ml虎纹捕鸟蛛粗毒干预后Caspase-3活化最明显。结论虎纹捕鸟蛛粗毒对人结肠癌SW480细胞体外增殖具有抑制作用。(本文来源于《肿瘤防治研究》期刊2013年11期）
段志贵,王美迟,胡朝暾,刘珍[6]（2013）在《雌性和雄性虎纹捕鸟蛛粗毒蛋白质含量比较分析》一文中研究指出自然界虎纹捕鸟蛛雌蛛数量远多于雄蛛数量,为了探究雌、雄蛛粗毒的差异,用不同方法比较了单个虎纹捕鸟蛛雌、雄蛛粗毒的特征.雌蛛单次螫毒量为(26.5±2.47)μL,冻干后粗毒质量为(5.01±0.78)mg,明显高于雄蛛单次螫毒量(10.83±1.35)μL,冻干后粗毒质量(2.05±0.17)mg;用Lowry法和Bradford法测定雌蛛和雄蛛粗毒的蛋白质含量,两种方法均表明雄蛛粗毒中蛋白含量高于雌蛛.用反相高效液相色谱分离雌蛛和雄蛛粗毒蛋白,并215 nm检测色谱图,发现大部分洗脱峰重迭,而雄蛛色谱图中多两个主峰.Tricine SDS-PAGE电泳分析表明雌蛛粗毒相对分子质量小于10 kD的蛋白质含量较高;而Tris SDS-PAGE电泳分析表明雌蛛粗毒相对分子质量大于10 kD的蛋白质含量较低,基于雌蛛和雄蛛粗毒蛋白含量的差异,有必要对虎纹捕鸟蛛雌、雄蛛粗毒进行独立研究.(本文来源于《生命科学研究》期刊2013年02期）
邓梅春,罗旋,陈汉春,王军,梁宋平[7]（2013）在《Thr28突变对虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅳ钠通道活性的影响》一文中研究指出虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅳ(HWTX-Ⅳ)是从虎纹捕鸟蛛粗毒中分离纯化到的一种新型多肽类神经毒素,能明显抑制表达于大鼠背根神经节细胞的河豚毒素敏感型(TTX-S)钠通道.为了更好地研究该毒素的结构与功能之间的关系,采用芴甲氧羰基(Fmoc)固相多肽化学合成法合成了用谷氨酸(Glu)替代HWTX-Ⅳ第28位苏氨酸残基的突变体T28D-HWTX-Ⅳ,线性多肽合成产物经反相高效液相色谱(HPLC)分离纯化后进行谷胱甘肽氧化复性.复性产物采用基质辅助激光解析飞行时间质谱(MALDI-TOF/TOF MS)技术鉴定分子质量,通过全细胞膜片钳电生理技术测定其电压门控钠通道药理学活性.当第28位Thr残基被Glu取代后,突变体T28D-HWTX-Ⅳ对表达于大鼠DRG细胞膜上的TTX-S钠通道的IC50值约为362 nmol/L,对TTX-S钠通道的抑制活性比天然HWTX-Ⅳ(IC50值=30 nmol/L)下降了约12倍,显示第28位的Thr残基是HWTX-Ⅳ与TTX-S型钠通道相互作用的关键活性残基.目前的研究为进一步探索HWTX-Ⅳ的结构与功能关系及新型镇痛药物的研发奠定了基础.(本文来源于《生命科学研究》期刊2013年02期）
张野妹,刁均艳,张敏,裔婷婷,潘志娟[8]（2013）在《虎纹捕鸟蛛丝——一种可人工养殖的蜘蛛丝》一文中研究指出结圆网蜘蛛大囊状腺分泌的牵引丝纤维被认为是世界上综合力学性能最优异的天然蛋白质纤维,同时具有良好的生物降解性和生物相容性,但是结圆网蜘蛛具有互相蚕食性,无法进行规模化人工养殖。虎纹捕鸟蛛作为目前众多种类蜘蛛中唯一可人工养殖的蜘蛛,其蛛丝纤维同样具有良好的生物学特性,在生物医用材料领域具有潜在的应用前景。本文概要介绍虎纹捕鸟蛛丝纤维的组成、结构与性能,并在此基础上阐述了静电纺再生捕鸟蛛丝纤维的形态结构及细胞增殖粘附性能,分析其在生物医用材料领域的潜在应用价值。(本文来源于《中国纤检》期刊2013年Z1期）
罗玉娇[9]（2012）在《虎纹捕鸟蛛Kunitz型毒素基因的分子改造和表达》一文中研究指出研究背景虎纹捕鸟蛛是我国特有的大型有毒蜘蛛。HWTX-XI(虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅺ)是从虎纹捕鸟蛛粗毒中提取的一种Kunitz型多肽毒素,具有很强的胰蛋白酶抑制作用,研究表明可用于治疗急性胰腺炎,但它同时具有阻断钾离子通道的作用,在动物身上表现出较弱的神经毒性。其胰蛋白酶抑制活性和钾离子通道阻断活性的功能区域相互独立,非常有利于毒素改造。HW11c40是从虎纹捕鸟蛛毒腺中克隆到的一种新型基因,它所编码的Kunitz型多肽毒素和HWTX-XI具有相似的空间结构以及胰蛋白酶抑制关键活性残基K14,但其不具有钾离子通道抑制的关键活性残基R25。推测,HW11c40和HWTX-XI一样具有强大的胰蛋白酶抑制活性,而其钾离子通道阻断活性会更低。有希望通过对HW11c40进行基因改造,消除其钾离子通道阻断活性,研制出治疗急性胰腺炎的高效药物。然而从天然毒液中分离的蜘蛛毒素远远不能满足研究和开发的需要,蜘蛛毒素的获取一直是限制其研究的难题。目前,通过基因工程表达蜘蛛毒素是一种有效的人工获取毒素的方法。研究目的1、探索出适合HWTX-XI表达的表达系统,解决HWTX-XI研究来源问题。2、对HW11c40进行分子改造,以期消除神经毒副作用,提高多肽稳定性,获得专一高效的胰蛋白酶抑制剂。找到适合HW11c40突变体表达的表达系统,为筛选出合适的突变体进而研制出高效的治疗急性胰腺炎及其胰蛋白酶相关性药物奠定基础。研究方法1、PCR克隆出HWTX-XI的片段重组到载体pET-40b(+)中,构建出重组载体,将重组载体转入至大肠杆菌BL21(DE3)进行周质表达,获得HWTX-XI的融合蛋白,通过肠激酶酶切融合蛋白释放出HWTX-XI的目的蛋白、再经镍柱和色谱进一步分离纯化、最终用质谱鉴定。并对表达的条件进行了优化。2、通过PCR定点突变法对HW11c40进行分子改造后,分别转入载体pVT102U/a和pET40b(+)中,构建出其四个突变体[Y35C]、[Y35CD39N]、[RLY56(35) LEC]及[RLY56(10)(35) LETC]的重组载体,再分别通过酿酒酵母S78真核表达系统和大肠杆菌BL21(DE3)原核周质表达系统中进行表达,接着进行分离纯化,最终用质谱鉴定。研究结果1、原核周质表达系统表达出了HWTX-XI融合蛋白,经肠激酶酶切成功释放出目的蛋白,再经质谱鉴定验证其表达成功,样品冻干后最高量达3.4mg/L。HWTX-XI最优表达条件是无IPTG诱导,30度,培养15-20小时。2、对HW11c40进行了成功的突变,并构建出相应的突变体重组载体。酿酒酵母S78真核表达系统只表达出HW11c40的一种突变体[Y35CD39N](HW11c40M2)。BL21(DE3)原核周质表达系统表达出了所有的突变体的融合蛋白,经肠激酶酶切后,Trince SDS PAGE鉴定证实都获得了对应的目的蛋白。其中[Y35C](KpnIHW11c40M1)又经进一步的分离纯化和质谱鉴定,验证其获得表达。研究结论1、首次用该原核周质表达系统高效表达出HWTX-XI,并对表达条件进行了优化,探索出HWTX-XI表达的新途径。2、对HW11c40成功的进行了分子改造,并用原核周质表达系统表达出了以增强多肽稳定性,降低钾离子通道阻断活性,提高胰蛋白酶抑制活性为目的HW11c40的4种突变体多肽毒素,证实此原核周质表达是适合的表达系统。为后期活性研究,筛选出有意义的突变体,继而研制高效治疗急性胰腺炎药物奠定基础。(本文来源于《中南大学》期刊2012-05-01）
[10]（2011）在《虎纹捕鸟蛛水平面运动行为的研究》一文中研究指出动物对环境有着高度适应性,并且不同种类的动物形成了与其生存环境相适应的运动方式,其运动的平稳性、灵活性、健壮性、环境适应性及能源利用率等方面远远优于现有的机器人.通过研究动物的运动行为,将动物高超的运动能力融入到机器人的设计中,研制出相应的仿生机器人,是长期以来人们所追求的目标.蜘蛛高超的稳定越障能力历来引人注目,但蜘蛛运动中的冗余支撑与稳定性的关系,以及多个步足间如何相互协调运动等问题尚不清楚,有待解决。最近,南京航空航天大学仿生结构与防护研究所戴振东和(本文来源于《科技传播》期刊2011年18期）
虎纹捕鸟蛛论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的基因克隆和表达虎纹捕鸟蛛毒素-XVⅡa,并进行纯化和质谱鉴定。方法通过随机测序虎纹捕鸟蛛(Ornithoctonus huwena)毒腺cDNA文库,获得编码多肽毒素HWTX-XVⅡa的基因,对其进行生物信息学分析;构建HWTX-XVⅡa基因真核表达质粒,利用S78株酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)表达系统进行分泌表达,表达产物经离子交换、反相高效液相色谱分离纯化和质谱鉴定。结果克隆得到虎纹捕鸟蛛毒素-XVⅡa的基因,构建的真核表达质粒表达产物纯化后进行质谱鉴定,为分子质量单位为3.250 004ku的虎纹捕鸟蛛毒素-XVⅡa。结论获得虎纹捕鸟蛛毒素-XVⅡa的基因及其表达产物,为研究其生物学功能奠定了基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
虎纹捕鸟蛛论文参考文献
[1].罗玉娇,舒衡平,李滨,蒋立平.虎纹捕鸟蛛Kunitz型毒素基因的分子改造和表达[J].中国病原生物学杂志.2016
[2].蒋立平,章洁,李先耀,唐雅琴.虎纹捕鸟蛛毒素-XVⅡa的基因克隆及在酿酒酵母中的表达[J].中国病原生物学杂志.2016
[3].王一蓉,毛海峰,陈嘉勤.虎纹捕鸟蛛毒素对脑缺血模型大鼠海马肿瘤坏死因子凋亡通路的影响[J].中国组织工程研究.2014
[4].刘圆圆,黄新,谢赛华,谭芳,张峥峥.广西虎纹捕鸟蛛毒成分的氨基酸测定及红外光谱定性分析[J].环球中医药.2014
[5].廖业,夏嫱,朱伟,吴启仙.虎纹捕鸟蛛毒素对人结肠癌SW480细胞体外增殖的影响[J].肿瘤防治研究.2013
[6].段志贵,王美迟,胡朝暾,刘珍.雌性和雄性虎纹捕鸟蛛粗毒蛋白质含量比较分析[J].生命科学研究.2013
[7].邓梅春,罗旋,陈汉春,王军,梁宋平.Thr28突变对虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅳ钠通道活性的影响[J].生命科学研究.2013
[8].张野妹,刁均艳,张敏,裔婷婷,潘志娟.虎纹捕鸟蛛丝——一种可人工养殖的蜘蛛丝[J].中国纤检.2013
[9].罗玉娇.虎纹捕鸟蛛Kunitz型毒素基因的分子改造和表达[D].中南大学.2012
[10]..虎纹捕鸟蛛水平面运动行为的研究[J].科技传播.2011
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