导读:本文包含了转甲基酶论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:甲基,层析,半胱氨酸,尼克,基因,蛋白,肾癌。
转甲基酶论文文献综述
杨一芬,王天菊,卿之驹[1](2011)在《同型半胱氨酸转甲基酶的制备及纯化》一文中研究指出目的建立同型半胱氨酸转甲基酶(BHMT)的制备及纯化方法,为临床应用提供基础。方法采用大肠埃希菌表达体系获得BHMT蛋白,然后应用Sephadex CL-6B、DEAE Sepharose Fast Flow、Sephadex G-75层析柱纯化BHMT,并行Western blot验证。分别用商品化同型半胱氨酸试剂盒和提纯的BHMT测定20份血清的同型半胱氨酸浓度,初步判断纯化的BHMT活性。结果 (1)BHMT在大肠埃希菌体系中成功表达,并经Sepha-dex CL-6B、DEAE Sepharose Fast Flow、Sephadex G-75层析柱纯化后在Western blot上显示为单一条带,分子量为45 kD。(2)采用纯化的BHMT检测20例标本,与商品化试剂盒检测结果差异无统计学意义[(17.19±4.10)μmol/L vs(16.48±3.48)μmol/L,P>0.05],且结果呈高度正相关(r=0.92,P<0.05)。结论建立的BHMT的制备及纯化方法切实可行,有望应用于同型半胱氨酸浓度的检测。(本文来源于《广东医学》期刊2011年19期)
王天菊[2](2010)在《同型半胱氨酸转甲基酶的提纯和活性测定》一文中研究指出目的1.对含有同型半胱氨酸转甲基酶外源性基因的大肠埃希氏菌培养、收集含有同型半胱氨酸转甲基酶的母液。2.分离提纯同型半胱氨酸转甲基酶。3.判断提纯的同型半胱氨酸转甲基酶是否有活性,初步确定其活性的大小。方法1.将含有同型半胱氨酸转甲基酶外源性基因的大肠埃希氏菌接种至血平板,37℃培养过夜后接种于含氨苄青霉素的LB培养液中,37℃在摇床上培养至对数中期,加入IPTG诱导8小时之后离心弃上清留沉淀。用缓冲液混匀沉淀后用电动搅拌机5000转/分钟以破坏细菌,冰浴匀浆2分钟,15000g离心15分钟,弃沉淀取上清。上清液经过Sephadex CL-6B层析柱,DEAE Sepharose Fast Flow层析柱,Sephadex G-75层析柱之后得到提纯的同型半胱氨酸转甲基酶。2.用Western Blot和考马斯亮蓝染色验证层析后的蛋白峰是否含有同型半胱氨酸转甲基酶,根据Mark的条带大概判断其kD值。3.用金斯尔G系列同型半胱氨酸检测试剂盒测定20份血清的同型半胱氨酸浓度,再用提纯的同型半胱氨酸转甲基酶与谷氨酸脱氢酶组成的混合液替换试剂2,重新检测相同的20份血清同型半胱氨酸的浓度,根据两种试剂盒检测的数值来判断提纯的同型半胱氨酸转甲基酶是否有活性以及活性的大小。结果1.将提纯后的酶做Western Blot验证,证明是所需要的同型半胱氨酸转甲基酶。2.与Western Blot和考马斯亮蓝染色上Mark的条带相比较,同型半胱氨酸转甲基酶单体的分子量为45kD。3.利用原试剂盒和替换试剂2后的试剂盒分别测定相同的20份标本,对两组数据进行统计,用配对t检验,原试剂盒测定的均数为16.48±3.47,标准误为0.77;试剂2替换后的测定的均数为17.19±4.10,标准误为0.92。原试剂盒和试剂2替换之后的试剂盒测定值的相关系数为0.92,两种方法相关系数假设检验的P值<0.05,表明试剂2替换前后同型半胱氨酸的检测高度相关。配对t检验的P值>0.05,无统计学意义,说明替换前后两种试剂盒检测同型半胱氨酸无差异。结论1.成功提纯出了同型半胱氨酸转甲基酶,并建立了一整套提纯同型半胱氨酸转甲基酶的方案,可供科研、生产使用。2.提纯同型半胱氨酸转甲基酶单体为45kD。3.提纯的同型半胱氨酸转甲基酶有活性,可用于同型半胱氨酸浓度的检测。(本文来源于《中南大学》期刊2010-05-01)
艾纯芝,杨凌[3](2007)在《应用CoMFA方法和CoMSIA方法研究儿茶酚转甲基酶抑制剂的叁维定量构效关系》一文中研究指出AIM: Inhibitors of catechol-O-methyltransferase (COMT) have always been administered to improve the bioavailability of L-Dopa in the treatment of Parkinson disease (PD). A new three-dimensional quantitative structure-activity relationship (3D-QSAR) analysis is performed to correlate the molecular fields with percent inhibition values. METHODS: Three predictive models were derived based on 36 previously reported COMT inhibitors employing comparative molecular field analysis (CoMFA) and comparative molecular similarity indices analysis (CoMSIA) methodologies. RESULTS: The CoMFA model and CoMSIA model with steric and electrostatic field yielded cross-validated rcv2 0.585 and 0.528 respectively, whereas the conventional rncv2 were 0.979 and 0.891. The CoMSIA model with hydrophobic field exhibited rcv2 0.544 and rncv2 0.930. CONCLUSION: The derived models from CoMFA and CoMSIA all exhibit good prediction for both internal and external validations. The individual inspection of 3D contours generated from these models helps in understanding the possible region for structural modification of molecules to improve the inhibitory bioactivity. The 3D-QSAR models may be useful in designing and predicting novel COMT inhibitors.(本文来源于《中国临床药理学与治疗学》期刊2007年10期)
符芳芳[4](2006)在《1.尼克酰胺转甲基酶(NNMT)在人肾癌组织中表达情况的研究 2.针对PLK1的SiRNA对结肠癌细胞Sw480作用的研究》一文中研究指出我们以往用基因芯片技术对肾癌进行研究时发现,一种本来只有在肝脏中以较高水平表达的尼克酰胺转甲基酶(nicotinamide N-methyltransferase NNMT)在肾癌组织中有着极高的表达,而在癌旁组织中表达较低,两者的差别高达100倍:该酶在肾癌组织中的表达水平之高可与肿瘤细胞的看家基因GAPDH的表达水平相当。 为了进一步探讨此酶在在肾癌中高表达的意义,本课题针对NNMT mRNA的结构和表达量作了研究,由于我们基因芯片所用的探针序列仅为NNMT cDNA序列的5′端部分,所以我们设计了可以扩增NNMT cDNA全长的引物,构建了含NNMT cDNA全长片段的T—A克隆,证明了肾癌组织中存在着完整的NNMT(本文来源于《浙江大学》期刊2006-05-01)
董彩文,张奇亚,杜昌生,李正秋,桂建芳[5](2004)在《牙鲆精氨酸转甲基酶基因的克隆与原核表达》一文中研究指出蛋白质的甲基化如同磷酸化,在RNA加工中,涉及到翻译后的调控,mRNA成熟,转移和稳定,也是细胞因子受体的一种重要的信号传导机制。根据抑制性差减杂交方法建立的牙鲆正常囊胚细胞和受灭活弹状病毒诱导的囊胚细胞之间的差减文库,利用斑点杂交方法筛选出牙鲆精氨酸转甲基酶基因的480bp大小片段,根据该序列设计合成特异引物,应用RACE-PCR方法分别扩增该基因的5’末端和3’末端,经过序列拼接得到全长基因。序列分析表明:所克隆的牙鲆精氨酸转甲基酶基因cDNA长1671bp,编码341个氨基酸。与已(本文来源于《湖北省遗传学会第七次代表大会暨学术讨论会论文摘要集》期刊2004-05-01)
马国建[6](1994)在《结肠癌病变进程中胞嘧啶DNA-转甲基酶活性增加》一文中研究指出人类结肠癌及其它肿瘤演进过程中,多存在DNA甲基化调节的改变,包括全基因组低甲基化,局部区域高甲基化的变化,以及胞嘧啶DNA-转甲基酶(DNA-MTase)mRNA水平的升高。DNA-MTase催化CpG(胞嘧啶-磷酸乌嘌呤)位点的DNA甲基化,如果伴随DNA-MTase活性增加,这(本文来源于《国外医学.临床生物化学与检验学分册》期刊1994年06期)
戴仁鸣,巫爱珍,孙玉昆[7](1986)在《家蚕细胞质多角体病毒(CPV)双链RNA为模板的RNA多聚酶和转甲基酶的蛋白亚基组成》一文中研究指出本文以家蚕CPV的基因与酶复合物为材料进一步研究了家蚕CPV-的RNA多聚酶和转甲基酶的蛋白亚基组成,一种方法是直接用~(125)Ⅰ-标记的基因与复合物中的蛋白质分析。其中含有叁种不同分子量的蛋白质即结构蛋白P1(分子量33,000),P2(分子量67,000)和P4(分子量142,000),这叁种结构蛋白在SDS-等电聚焦电泳中都表现了二种以上分子量相同而电荷不同的蛋白。第二种方法是分别应用CPV的5种结构蛋白的抗体抑制CPV RNA多聚酶和转甲基酶的能力进行判断,结果表明CPV RNA多聚酶合有结构蛋白P1(33,000),P2(67,000)和P4(142,000),而转甲基酶主要由结构蛋白P1组成。(本文来源于《中国科学(B辑 化学 生物学 农学 医学 地学)》期刊1986年07期)
LF,Agnati,K,Fuxe,于肇英[8](1986)在《大鼠下丘脑室傍核内促皮质激素释放素,糖皮质激素受体与苯乙醇胺转甲基酶的免疫反应性组织结构的分布的形态计量分析(摘要)》一文中研究指出应用接免疫过氧化物酶技术研究了促皮质激素释放素(CRF),糖皮质激素受体(GR)的免疫反应性神经细胞和苯乙醇胺转甲基酶(PNMT)免疫反应性神经末梢在大鼠下丘脑室旁核的分布。采月Vibratome振动切片,组织片早30μm。形态计量分析应用半自动图象分析仪,对室旁核CRF,GR及PNMT的免疫反应性的结构的密度进行了分析。通过相关系数等统计学分析证明PNMT免疫反应神经末梢(代表肾上腺素能)支配大多数CRF免疫反应性神经细胞,而GR则分布在大多数CRF免疫反应性神经元内。(本文来源于《白求恩医科大学学报》期刊1986年03期)
转甲基酶论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
目的1.对含有同型半胱氨酸转甲基酶外源性基因的大肠埃希氏菌培养、收集含有同型半胱氨酸转甲基酶的母液。2.分离提纯同型半胱氨酸转甲基酶。3.判断提纯的同型半胱氨酸转甲基酶是否有活性,初步确定其活性的大小。方法1.将含有同型半胱氨酸转甲基酶外源性基因的大肠埃希氏菌接种至血平板,37℃培养过夜后接种于含氨苄青霉素的LB培养液中,37℃在摇床上培养至对数中期,加入IPTG诱导8小时之后离心弃上清留沉淀。用缓冲液混匀沉淀后用电动搅拌机5000转/分钟以破坏细菌,冰浴匀浆2分钟,15000g离心15分钟,弃沉淀取上清。上清液经过Sephadex CL-6B层析柱,DEAE Sepharose Fast Flow层析柱,Sephadex G-75层析柱之后得到提纯的同型半胱氨酸转甲基酶。2.用Western Blot和考马斯亮蓝染色验证层析后的蛋白峰是否含有同型半胱氨酸转甲基酶,根据Mark的条带大概判断其kD值。3.用金斯尔G系列同型半胱氨酸检测试剂盒测定20份血清的同型半胱氨酸浓度,再用提纯的同型半胱氨酸转甲基酶与谷氨酸脱氢酶组成的混合液替换试剂2,重新检测相同的20份血清同型半胱氨酸的浓度,根据两种试剂盒检测的数值来判断提纯的同型半胱氨酸转甲基酶是否有活性以及活性的大小。结果1.将提纯后的酶做Western Blot验证,证明是所需要的同型半胱氨酸转甲基酶。2.与Western Blot和考马斯亮蓝染色上Mark的条带相比较,同型半胱氨酸转甲基酶单体的分子量为45kD。3.利用原试剂盒和替换试剂2后的试剂盒分别测定相同的20份标本,对两组数据进行统计,用配对t检验,原试剂盒测定的均数为16.48±3.47,标准误为0.77;试剂2替换后的测定的均数为17.19±4.10,标准误为0.92。原试剂盒和试剂2替换之后的试剂盒测定值的相关系数为0.92,两种方法相关系数假设检验的P值<0.05,表明试剂2替换前后同型半胱氨酸的检测高度相关。配对t检验的P值>0.05,无统计学意义,说明替换前后两种试剂盒检测同型半胱氨酸无差异。结论1.成功提纯出了同型半胱氨酸转甲基酶,并建立了一整套提纯同型半胱氨酸转甲基酶的方案,可供科研、生产使用。2.提纯同型半胱氨酸转甲基酶单体为45kD。3.提纯的同型半胱氨酸转甲基酶有活性,可用于同型半胱氨酸浓度的检测。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
转甲基酶论文参考文献
[1].杨一芬,王天菊,卿之驹.同型半胱氨酸转甲基酶的制备及纯化[J].广东医学.2011
[2].王天菊.同型半胱氨酸转甲基酶的提纯和活性测定[D].中南大学.2010
[3].艾纯芝,杨凌.应用CoMFA方法和CoMSIA方法研究儿茶酚转甲基酶抑制剂的叁维定量构效关系[J].中国临床药理学与治疗学.2007
[4].符芳芳.1.尼克酰胺转甲基酶(NNMT)在人肾癌组织中表达情况的研究2.针对PLK1的SiRNA对结肠癌细胞Sw480作用的研究[D].浙江大学.2006
[5].董彩文,张奇亚,杜昌生,李正秋,桂建芳.牙鲆精氨酸转甲基酶基因的克隆与原核表达[C].湖北省遗传学会第七次代表大会暨学术讨论会论文摘要集.2004
[6].马国建.结肠癌病变进程中胞嘧啶DNA-转甲基酶活性增加[J].国外医学.临床生物化学与检验学分册.1994
[7].戴仁鸣,巫爱珍,孙玉昆.家蚕细胞质多角体病毒(CPV)双链RNA为模板的RNA多聚酶和转甲基酶的蛋白亚基组成[J].中国科学(B辑化学生物学农学医学地学).1986
[8].LF,Agnati,K,Fuxe,于肇英.大鼠下丘脑室傍核内促皮质激素释放素,糖皮质激素受体与苯乙醇胺转甲基酶的免疫反应性组织结构的分布的形态计量分析(摘要)[J].白求恩医科大学学报.1986