不同提取方法对小麦麸皮多糖化学组分及免疫调节活性的影响

不同提取方法对小麦麸皮多糖化学组分及免疫调节活性的影响

论文摘要

目的:以小麦麸皮超微粉为实验材料,分别用酸法、碱法、水提和酶法提取获得多糖,研究不同提取方法对小麦麸皮多糖得率、提取后麸皮残渣微观形态、糖醛酸含量、硫酸根含量、蛋白质含量、单糖组成及免疫调节活性的影响。方法:采用苯酚-硫酸法测定多糖含量,硫酸-间羟基苯酚法测定糖醛酸含量,BaCl2-明胶法测定硫酸根含量,气相色谱法测定单糖组分;采用MTT检测细胞毒性,Griess法测定细胞上清液中NO含量,Western Blot法检测细胞诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)和环氧合酶-2(COX-2)蛋白表达。结果:碱提法获得的粗多糖得率最高,为31.73%,测定提取的粗多糖中多糖含量为57.79%;小麦麸皮多糖中糖醛酸和硫酸根的含量依次为:碱提法>酶提法>酸提法>水提法;不同提取方法的小麦麸皮多糖组分中所含单糖的种类为阿拉伯糖、木聚糖及葡萄糖;MTT法检测四种小麦麸皮多糖对细胞均无毒性,其中水提多糖能促进RAW264.7细胞分泌NO因子并能促进细胞诱导型一氧化氮合成酶和环氧合酶-2蛋白的表达。结论:四种不同提取方法所得到的小麦麸皮多糖的得率、化学组成成分及生物活性各不相同,采用传统水提法工艺提取多糖更利于维持多糖的免疫调节活性。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料与仪器
  •   1.2 实验方法
  •     1.2.1 小麦麸皮多糖的提取
  •       1.2.1.1 酸法提取小麦麸皮多糖
  •       1.2.1.2 碱法提取麸皮多糖
  •       1.2.1.3 水法提取小麦麸皮多糖
  •       1.2.1.4 酶法提取小麦麸皮多糖
  •     1.2.2 多糖含量测定
  •       1.2.2.1 标准曲线的绘制
  •       1.2.2.2 粗多糖含量测定
  •     1.2.3 小麦麸皮多糖糖醛酸含量测定
  •       1.2.3.1 半乳糖醛酸标准曲线的绘制
  •       1.2.3.2 样品测定
  •     1.2.4 SO 4 2- 含量的测定
  •       1.2.4.1 硫酸钾溶液标准曲线绘制
  •       1.2.4.2 样品测定
  •     1.2.5 小麦麸皮多糖蛋白质含量的测定
  •     1.2.6 单糖组分分析
  •       1.2.6.1 单糖衍生物的制备
  •       1.2.6.2 小麦麸皮多糖的水解和衍生化
  •     1.2.7 小麦麸皮残渣的微观形态观察
  •     1.2.8 细胞毒性的检测
  •       1.2.8.1 细胞培养及传代方法
  •       1.2.8.2 细胞存活率实验
  •       1.2.8.3 不同提取方法小麦麸皮多糖对RAW264.7细胞释放一氧化氮 (NO) 的影响
  •       1.2.8.4 不同提取方法小麦麸皮多糖对RAW264.7细胞COX-2和iNOS蛋白表达的影响
  •   1.3 数据分析
  • 2 结果与分析
  •   2.1 不同提取方法小麦麸皮多糖得率比较
  •   2.2 不同提取方法对小麦麸皮多糖糖醛酸、硫酸根含量的影响
  •   2.3 小麦麸皮多糖蛋白质含量的比较
  •   2.4 小麦麸皮粗多糖的单糖组分分析
  •   2.5 小麦麸皮残渣的微观形态
  •   2.6 小麦麸皮多糖对RAW264.7细胞的影响
  •     2.6.1 小麦麸皮多糖的细胞毒性
  •     2.6.2 小麦麸皮多糖对RAW264.7细胞分泌NO的影响
  •     2.6.3 不同提取方法小麦麸皮多糖对RAW264.7细胞COX-2和iNOS蛋白表达的影响
  • 3 结论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 朱翠玲,陈亮,周瑾怡,胡卫成,沈婷,纪丽莲

    关键词: 小麦麸皮多糖,得率,化学组成,免疫活性

    来源: 食品工业科技 2019年07期

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅰ辑

    专业: 轻工业手工业

    单位: 浙江农业商贸职业学院,淮阴师范学院江苏省高校区域现代农业与环境保护协同创新中心

    基金: 国家自然科学基金(31700304),江苏省高校自然科学基金(14KJB550002),江苏省自然科学基金(BK20150414)

    分类号: TS210.9

    DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2019.07.004

    页码: 17-23

    总页数: 7

    文件大小: 2585K

    下载量: 521

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