干扰foxM1基因表达可增强骨髓间充质干细胞的成骨分化能力

干扰foxM1基因表达可增强骨髓间充质干细胞的成骨分化能力

论文摘要

背景:foxM1基因被认为参与了干细胞分化命运的调控,但其对间充质干细胞成骨分化的影响尚未见报道,关于foxM1基因的研究也主要集中于肿瘤领域。目的:探索干扰foxM1基因表达水平对骨髓间充质干细胞成骨分化能力的影响。方法:全骨髓贴壁法培养SD大鼠(中山大学实验动物中心提供)骨髓间充质干细胞,构建含嘌呤霉素抗性基因的foxM1 shRNA重组慢病毒载体并转染大鼠骨髓间充质干细胞,经嘌呤霉素筛选建立foxM1稳定敲低细胞株,另设置空病毒载体组以及未转染组。使用骨髓间充质干细胞成骨诱导分化培养基诱导培养并行茜素红染色检测其成骨分化能力,使用定量RT-PCR检测成骨相关基因的表达水平,同时提取胞核蛋白,Western blot检测β-catenin蛋白表达水平。结果与结论:(1)与空病毒载体组以及未转染组比较,foxM1敲低的大鼠骨髓间充质干细胞经成骨诱导分化后形成的骨结节数量明显增多,成骨相关基因col1a1和runx2表达水平均显著升高,但胞核β-catenin蛋白水平无明显改变;(2)干扰foxM1基因表达可增强骨髓间充质干细胞的成骨能力。

论文目录

  • 文章快速阅读:
  • 文题释义:
  • 缩略语:
  • 0引言Introduction
  • 1 材料和方法Materials and methods
  •   1.1 设计
  •   1.2 时间及地点
  •   1.3 材料
  •     1.3.1 实验仪器
  •     1.3.2 实验药品与试剂
  •     1.3.3 实验动物
  •   1.4 实验方法
  •     1.4.1 大鼠BMSCs的分离培养
  •     1.4.2 大鼠BMSCs的鉴定
  •     1.4.3 重组慢病毒载体转染BMSCs
  •     1.4.4 Western blot检测foxM1干扰效果
  •     1.4.5 各组BMSCs增殖能力
  •     1.4.6 BMSCs诱导分化成骨
  •     1.4.7 定量RT-PCR检测相关基因表达水平
  •     1.4.8 Western blot检测胞核蛋白中β-catenin蛋白水平
  •   1.5 主要观察指标
  •   1.6 统计学分析
  • 2 结果Results
  •   2.1 BMSCs相关表面标志物表达及多向分化能力
  •   2.2 重组慢病毒载体转染后各组BMSCs中Fox M1蛋白表达水平
  •   2.3 各组BMSCs诱导成骨水平
  •   2.4 各组BMSCs成骨诱导后成骨相关基因m RNA表达水平
  •   2.5 各组BMSCs成骨诱导后核内β-catenin蛋白水平
  • 3 讨论Discussion
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 陈钦桂,曾勉,何婉媚,张莉珊,郑海崇

    关键词: 叉头转录因子类,干扰,骨髓,间质干细胞,细胞分化,成骨细胞,组织工程,骨髓间充质干细胞,成骨,诱导分化,慢病毒载体,基因,基因干扰,国家自然科学基金

    来源: 中国组织工程研究 2019年05期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技,基础科学

    专业: 生物学,基础医学

    单位: 中山大学附属第一医院内科重症监护病房

    基金: 国家自然科学基金(81670066),项目负责人:曾勉,广东省省级科技计划项目(2016A020216009),项目负责人:曾勉,贝朗蛇牌学院重症科学研究基金资助项目(2017),项目负责人:曾勉~~

    分类号: R329.2

    页码: 673-679

    总页数: 7

    文件大小: 1544K

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