柠檬UBE2I同源基因的克隆及表达模式分析

柠檬UBE2I同源基因的克隆及表达模式分析

论文摘要

前期从香水柠檬自交不亲和花的转录组数据中筛选到一个上调表达的泛素结合酶UBE2I同源基因片段,为了弄清该基因的特性,开展了本研究。以香水柠檬(自交不亲和)和白花柠檬(自交亲和)为试材,根据从香水柠檬花转录组中获得的UBE2I基因片段设计引物,采用同源克隆方法获得了香水柠檬和白花柠檬这2个品种中UBE2I同源基因的ORF全长和DNA全长,对其序列进行生物信息学分析,再对其表达模式进行探讨。结果显示UBE2I基因在香水柠檬和白花柠檬中的ORF长度均为483 bp,二个品种ORF全长仅有一个核苷酸的差异,编码160个氨基酸,但其氨基酸序列无差异;DNA全长为2 267 bp,拥有有5个外显子和4个内含子,在第2个和第4个内含子序列中存在2个类似于启动子(TATAA)框的结构。UBE2I泛素连接酶蛋白理论等电点为7.64,分子量为17 981.474 44 Da,三级结构中有4个α螺旋、7个β折叠和10个无规卷曲,不是分泌蛋白,没有跨膜结构,肽链呈现疏水性。时空表达分析表明,UBE2I基因在香水柠檬的不同组织中均表达,但在不同组织中的表达存在差异,其中在花粉中的表达量明显高于其它组织,UBE2I在自交(香水柠檬♀×香水柠檬♂)后柱头中的表达量均比(香水柠檬♀×白花柠檬♂)杂交后柱头中的表达量高。本研究为进一步探索发现自交不亲和过程的泛素结合酶UBE2基因奠定基础。

论文目录

  • 1 结果与分析
  •   1.1 柠檬UBE2I基因cDNA全长的克隆
  •   1.2 柠檬UBE2I基因的DNA全长克隆
  •   1.3 香水柠檬UBE2I基因的生物信息学分析
  • 2 讨论
  • 3 材料与方法
  •   3.1 实验材料
  •   3.2 主要试剂
  •   3.3 柠檬UBE2I基因c DNA全长的克隆
  •     3.3.1 总RNA的提取和c DNA第一链的合成
  •     3.3.2 香水柠檬和白花柠檬UBE2I基因c DNA全长的PCR扩增
  •   3.4 柠檬UBE2I基因DNA全长的扩增
  •     3.4.1 香水柠檬和白花柠檬DNA的提取
  •     3.4.2 香水柠檬和白花柠檬UBE2I基因DNA全长的扩增
  •   3.5 柠檬UBE2I基因的生物信息学分析与系统进化树构建
  •   3.6 柠檬UBE2I基因的时空表达特性分析
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 王青,何新华,林蔚,苏玲,李彬,杜明富,罗聪,张树伟

    关键词: 柠檬,自交不亲和,生物信息学分析

    来源: 基因组学与应用生物学 2019年08期

    年度: 2019

    分类: 基础科学,医药卫生科技,农业科技

    专业: 生物学,园艺

    单位: 广西大学农学院,亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室

    基金: 国家自然科学基金项目(31460508),国家现代农业(柑橘)产业技术体系广西柑橘创新团队南宁综合试验站项目(nycytxgxcxtd-05-08)共同资助

    分类号: S666.5;Q943.2

    DOI: 10.13417/j.gab.038.003629

    页码: 3629-3636

    总页数: 8

    文件大小: 1905K

    下载量: 70

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