导读:本文包含了甲胎蛋白启动子论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:蛋白,基因,基因治疗,肝细胞,细胞,烷基化,疗法。
甲胎蛋白启动子论文文献综述
董学妍[1]（2015）在《血清RASSF1A基因启动子甲基化联合甲胎蛋白检测在HBV相关的肝细胞癌中的临床诊断价值》一文中研究指出目的:研究乙型肝炎病毒(HBV)相关的肝细胞癌(HCC)患者血清RASSF1A基因启动子甲基化状态及其临床诊断价值。方法:190例HCC患者为病例组,114例乙肝后肝硬化(LC)、120例慢性乙型病毒性肝炎(CHB)患者及160例健康体检者分别为疾病对照组和健康对照组。采用MethyLight法测定血清RASSF1A启动子甲基化,用甲基化比值(PMR)表示,PMR≥4为阳性。此外,对43例不能实施手术切除治疗的HCC患者成功进行了24个月生存情况追踪。结果:血清RASSF1A启动子甲基化阳性率在HCC、LC及CHB患者分别为64.2%(122/190)、17.5%(20/114)、5.0%(6/120),健康体检者未检出;甲基化阳性率在HCC、LC、CHB患者及健康体检者间比较均有显着性差异(P<0.05)。血清RASSF1A启动子甲基化阳性时,其从CHB患者中鉴别HCC的敏感性为64.2%,特异性为89.8%,AUCRASSF1A=0.796(95%CI=0.746-0.842);血清RASSF1A甲基化阳性联合AFP(≥20 ng/L)来鉴别,敏感性为80.9%,特异性为93.4%,AUCRASSF1A+AFP=0.876(95%CI=0.836-0.917)。血清RASSF1A启动子甲基化阳性与HCC患者组织学分级、TNM分期及远端转移相关(P<0.05),与其它临床病理特点无关。此外,血清RASSF1A启动子甲基化阳性患者总体生存率(OS)显着低于阴性患者(P<0.05)。结论:血清RASSF1A启动子甲基化对HBV相关的HCC可能具有较高的诊断价值,同时可预测HCC临床进展阶段和预后。因此,血清RASSF1A启动子甲基化联合AFP有希望成为HCC无创筛查指标。(本文来源于《2015浙江省检验医学学术年会论文汇编》期刊2015-08-19）
张晓龙,杨铭,范冬梅,李真真,鲍世琦[2]（2014）在《脐带间充质干细胞运载甲胎蛋白启动子驱动的IST-sTRAIL与5-FU联合应用对HepG2肝癌原位移植瘤的治疗作用》一文中研究指出目的基于MSCs可向肿瘤部位归巢及在特定微环境下向肝细胞分化过程中AFP启动子活性变化的特点,笔者利用脐带组织Wharton's Jelly(WJ)来源的MSCs运载AFP启动子驱动的凋亡诱导基因IST-sTRAIL,并与5-FU联合应用,研究其对HepG2肝癌原位移植瘤的治疗作用。方法二步法体外诱导脐带WJ来源的间充质干细胞(HUMSCs)向肝脏细胞分化,通过real time PCR和Western blot分别在不同时间点检测HUMSCs中AFP及白蛋白(albumin,ALB)基因和蛋白水平的变化。以克隆载体pUpAFP、报告基因载体pGL3basic及慢病毒表达载体pLenR.CMVLuc(pLentR.Luc)、pLenR.IST-sTRAIL、pLenR.CopGFP为基础,采用PCR、酶切、连接的方法构建AFP启动子特异性驱动报告基因firefly lucifease(fLuc)表达的载体pGL3 AFP、pLenR.AFPLuc,APF启动子特异性驱动TNF相关凋亡诱导配体(TRAIL)表达的(本文来源于《天津市生物医学工程学会第叁十四届学术年会论文集》期刊2014-04-01）
叶景佳,陈萍,贾振宇,李春春,陈丽红[3]（2013）在《巨细胞病毒增强子提高人甲胎蛋白启动子效率的研究》一文中研究指出人巨细胞病毒(CMV)早期转录增强子能够提高其他基因启动子的转录启动效率。CMV早期转录增强子对人甲胎蛋白(AFP)启动子的转录增强的作用及特异性的影响,将决定其是否适用于肝癌靶向性基因治疗。作者利用PCR法分别克隆了人AFP增强子、启动子和CMV早期转录增强子,构建了相应的pGL4.10荧光素酶报告基因载体,与内参照pGL4.74质粒共转染人肝癌细胞Hep3B、HepG2、SMMC7721和人宫颈癌细胞HeLa、乳腺癌细胞Bcap37,利用双荧光素酶检测系统检测分析了这些细胞中AFP增强子—启动子的效率。结果表明,CMV早期转录增强子能够明显增强AFP增强子—启动子在肝癌细胞中的效率(在Hep3B、HepG2和SMMC7721细胞中分别提高33.07、134.22和465.18倍),但是也能提高AFP增强子—启动子在非肝癌细胞中的效率(在HeLa和Bcap37细胞中分别提高335.73和1096.81倍)。因此,CMV增强子虽然可以大大提高AFP增强子—启动子的效率,但无特异性,直接将其用于靶向AFP的肝癌基因治疗时可能会产生由于治疗基因在正常组织中的非特异表达而引起的副作用。(本文来源于《中国细胞生物学学报》期刊2013年04期）
王萍,刘保清,李卫红,董凌月,尤红[4]（2011）在《利用甲胎蛋白启动子活力筛选人胚胎肝脏前体细胞》一文中研究指出目的利用甲胎蛋白启动子活力筛选人胚肝脏前体细胞克隆。方法经聚合酶链反应(PCR)扩增及酶切后连接,将甲胎蛋白启动子片段构建于pGL3载体中并测序鉴定,将其与pRL-TK质粒共转染到HepG2、A549和HeLa细胞中,通过相对荧光素酶活力分析甲胎蛋白启动子活力的特异性。采用克隆化培养法获得人胚胎肝脏细胞克隆,检测各克隆的甲胎蛋白启动子活力,并应用间接免疫荧光染色方法检测甲胎蛋白表达情况。结果经PCR、酶切分析及DNA序列测定证实pGL3-AFP质粒克隆成功。将其与pRL-TK质粒共转染到表达甲胎蛋白的HepG2细胞和不表达甲胎蛋白的A549、HeLa细胞中,仅在表达甲胎蛋白的HepG2细胞中检测到了较高的甲胎蛋白启动子活力,胚胎肝脏细胞中也检测到了甲胎蛋白启动子活力,表明其中含有表达甲胎蛋白的细胞。利用克隆培养法获得5个胚胎肝脏细胞克隆,将其分别共转染pGL3-AFP和pRL-TK质粒,发现其中1个克隆的甲胎蛋白启动子活力与HepG2细胞接近,且免疫荧光染色结果显示,该克隆细胞甲胎蛋白阳性率为(99.1±0.6)%,表明此克隆为肝脏前体细胞克隆。结论利用甲胎蛋白启动子活力结合克隆培养法可以获得肝脏前体细胞克隆。(本文来源于《解剖学报》期刊2011年01期）
华赟鹏,赖佳明,李绍强,汪勇,王瑛[5]（2009）在《甲胎蛋白启动子驱动的yCDglyTK双自杀基因治疗裸鼠肝癌的机制研究》一文中研究指出目的研究携带甲胎蛋白(AFP)启动子的酵母菌胞嘧啶脱氨酶/胸苷激酶(yCDglyTK)双υ杀基因体内靶向性治疗肝癌的效果和机制。方法构建携带AFP启动子的yCDglyTK双自杀基因表达质粒,通过阳离子脂质体将携带AFP启动子的yCDglyTK双自杀基因转染HepG2和SMMC7721肝癌细胞的裸鼠肝癌皮下种植瘤,观察υ杀基因体内杀瘤效果以及细胞凋亡的情况。结果成功构建携带AFP启动子的yCDglyTK双自杀基因,其靶向性地在AFP阳性的HepG2细胞种植瘤上表达,而AFP阴性的SMMC7721细胞种植瘤上无表达,氟胞嘧啶(5-FC)、更昔洛韦(GCV)及两者联合可有效抑制HepG2细胞种植瘤的生长,抑瘤效果GCV+5-FC>5-FC>GCV,而SMMC7721细胞种植瘤的生长未受影响。HepG2细胞种植瘤治疗后有明显的细胞凋亡,而SMMC7721细胞种植瘤内极少凋亡细胞。结论携带AFP启动子的yCDglyTK双自杀基因能有效地靶向性地杀伤AFP阳性的肝癌细胞,细胞凋亡可能是其杀伤的重要机制之一。(本文来源于《中华普通外科学文献(电子版)》期刊2009年02期）
王水良,庄岳鹏,王志红,兰风华[6]（2008）在《人甲胎蛋白基因启动子驱动siRNA表达载体的构建及其在HepG2细胞中RNA效应的初步鉴定》一文中研究指出目的:探索基于人甲胎蛋白基因启动子构建的siRNA表达载体介导目的基因RNA干扰的可行性,为实现肝癌细胞靶向RNAi治疗作一初步研究。方法:PCR法扩增获得人甲胎蛋白基因启动子并插入pSilencer1.0-U6中以置换其U6启动子;依据人hLRH-1基因RNAi靶位点设计出siRNA模板DNA,体外合成相应寡核苷酸片段后经退火形成短双链,再克隆构建成靶向人hLRH-1基因siRNA表达载体;脂质体转染法将上述重组质粒转入HepG2细胞中,实时定量RT-PCR法初步分析所建系统在AFP表达细胞中触发靶基因hLRH-1的RNAi效应,以及hLRH-1调控下游靶基因的表达改变。结果:获得人甲胎蛋白基因启动子驱动的siRNA表达载体pSiAFP。以人hLRH-1为报告基因,本研究发现所建的RNAi载体系统可在表达AFP的细胞HepG2中有效诱导靶基因表达下调,抑制率约达85%;同时引致hLRH -1调控下游靶基因CyclinE1与Oct4的表达相应下调。结论:人甲胎蛋白基因启动子驱动的siRNA表达载体可在表达AFP的细胞HepG2中有效介导靶基因的RNAi效应,为临床肝癌细胞靶向的基因特异性RNAi治疗提供了初步的实验依据。(本文来源于《福州总医院学报》期刊2008年01期）
王水良,庄岳鹏,王志红,兰风华[7]（2007）在《人甲胎蛋白基因启动子siRNA表达载体的构建及效应鉴定》一文中研究指出目的:探索基于人甲胎蛋白基因启动子构建的siRNA表达载体介导目的基因RNA干扰的可行性,为实现肝癌细胞靶向RNAi治疗作一初步研究。方法:PCR法扩增获得人甲胎蛋白基因启动子并插入pSilencerl．0-U6中以置换其U6启动子;依据hLRH-1基因RNAi靶位点设计出siRNA模板DNA,体外合成相应寡核苷酸片段后经退火形成短双链,再克隆构建成靶向人hLRH-1基因siRNA表达载体;脂质体转染法将上述重组质粒转入HepG2细胞中,实时定量PCR法初步分析所建系统在AFP表达细胞中触发靶基因hLRH-1的RNAi效应,以及hLRH-1调控下游靶基因的表达改变。结果:获得人甲胎蛋白基因启动子驱动的siRNA表达载体pSiAFP。所建的RNAi载体系统可在表达AFP的HepG2细胞中有效诱导靶基因hLRtH-1表达下调,抑制率约达85%;同时调控hLRH-1下游靶基因CyclinE1与Oct 4的表达相应下调。结论:人甲胎蛋白基因启动子驱动的siRNA表达载体可在表达AFP的HepG2细胞中有效介导靶基因的RNAi效应。(本文来源于《肿瘤》期刊2007年03期）
魏强,王健伟,郭丽,屈建国,赵玉琪[8]（2006）在《以人甲胎蛋白启动子控制表达HIV-1vpr基因的重组腺病毒诱导肝癌细胞G2期阻滞和细胞凋亡作用的研究》一文中研究指出目的研究人甲胎蛋白(AFP)启动子控制表达HIV-1 vpr基因的重组腺病毒对AFP(+)肝癌细胞G2期阻滞和细胞凋亡的作用,评估以该策略利用vpr进行肿瘤特异性基因治疗的可行性。方法将以AFP启动子控制HIV-1vpr表达的重组腺病毒rvAdAFP-vpr和空白载体rvAd-null分别感染AFP(+)的肝癌细胞BEL-7402和AFP(-)的肝癌细胞SMMC-7721,利用流式细胞仪检测Vpr的特异性表达和细胞周期分布,用细胞荧光染色和线粒体膜电位检测等方法观察细胞凋亡。结果与对照病毒rvAd-null相比,重组腺病毒rvAdAFP-vpr只在AFP(+)肝癌细胞中表达HIV-1Vpr,并诱导肝癌细胞的细胞周期G2期阻滞和细胞凋亡,而在AFP(-)肝癌细胞中不明显表达Vpr,不能显着诱导肝癌细胞G2期阻滞和细胞凋亡。结论重组腺病毒rvAdAFP-vpr对于Vpr的表达是AFP表达特异性的,可有效诱导肝癌细胞G2期阻滞和细胞凋亡,有望用于AFP(+)肝癌的基因治疗研究。(本文来源于《中国实验诊断学》期刊2006年07期）
魏强,王健伟,屈建国,赵玉琪,洪涛[9]（2006）在《人甲胎蛋白启动子控制HIV-1Vpr表达的重组腺病毒体内抑瘤效果研究》一文中研究指出目的:研究人甲胎蛋白启动子控制表达HIVVpr基因的重组腺病毒对裸鼠肝癌模型的肿瘤组织生长抑制作用,探讨其应用于肝癌基因治疗的可行性。方法:将人甲胎蛋白启动子控制表达HIVVpr基因的重组腺病毒(rvAdAFP-Vpr)直接注射到利用BEL-7402细胞建立的肝癌裸鼠模型瘤体内,同时往裸鼠腹腔内注射环磷酰胺(CTX),经过1个月的治疗,利用肿瘤生长曲线、增殖指数、凋亡指数等指标,观察rvAdAFP-Vpr对肝癌组织生长抑制的效果。结果:人甲胎蛋白启动子控制表达HIVVpr基因的重组腺病毒在肝癌组织中表达了Vpr蛋白,rvAdAFP-Vpr注射明显诱导肿瘤细胞凋亡,抑制了体内肝癌组织的生长,rvAdAFP-Vpr治疗组和rvAdAFP-Vpr+CTX治疗组抑瘤率分别达到41%和66.7%,与空白对照组和rvAd-null组相比,具有统计学意义,差异显着(P<0.05,P<0.01),两组的Ki-67指数和凋亡指数相比,对照组和空腺病毒载体(rvAd-null)组同样具有统计学意义,差异显着(P<0.05,P<0.01)。结论:人甲胎蛋白启动子控制表达HIVVpr基因的重组腺病毒rvAdAFP-Vpr通过引起肝癌细胞凋亡,有效抑制了体内肝癌组织的生长。本研究结果为HIV-1Vpr应用于肝癌治疗提供了依据。(本文来源于《上海医药》期刊2006年07期）
况舸,黄爱龙,唐霓[10]（2005）在《肿瘤特异性Survivin启动子与甲胎蛋白启动子的活性评价与比较》一文中研究指出目的研究并比较肿瘤特异性Survivin和甲胎蛋白(AFP)基因启动子在不同肝细胞癌细胞系中的转录活性,为肝癌靶向性基因治疗提供依据。方法采用聚合酶链反应法扩增获得Survivin和AFP 基因的启动子片段,并克隆入表达虫荧光素酶基因的报告质粒中,通过测定荧光素酶报告基因的表达情况, 测定Survivin与AFP基因启动子的转录活性,同时采用巨细胞病毒启动子为对照,评价其转录活性水平。结果Survivin启动子在肝癌细胞中具有相当强的活性,其活性水平在高表达AFP的肝癌细胞中为AFP启动子的54～100倍,达到巨细胞病毒启动子活性的16%～21%。结论Survivin启动子在肝癌细胞系中具有较强的启动活性,可望开发成为新的肝癌靶向性基因治疗工具。(本文来源于《中华肝脏病杂志》期刊2005年06期）
甲胎蛋白启动子论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的基于MSCs可向肿瘤部位归巢及在特定微环境下向肝细胞分化过程中AFP启动子活性变化的特点,笔者利用脐带组织Wharton's Jelly(WJ)来源的MSCs运载AFP启动子驱动的凋亡诱导基因IST-sTRAIL,并与5-FU联合应用,研究其对HepG2肝癌原位移植瘤的治疗作用。方法二步法体外诱导脐带WJ来源的间充质干细胞(HUMSCs)向肝脏细胞分化,通过real time PCR和Western blot分别在不同时间点检测HUMSCs中AFP及白蛋白(albumin,ALB)基因和蛋白水平的变化。以克隆载体pUpAFP、报告基因载体pGL3basic及慢病毒表达载体pLenR.CMVLuc(pLentR.Luc)、pLenR.IST-sTRAIL、pLenR.CopGFP为基础,采用PCR、酶切、连接的方法构建AFP启动子特异性驱动报告基因firefly lucifease(fLuc)表达的载体pGL3 AFP、pLenR.AFPLuc,APF启动子特异性驱动TNF相关凋亡诱导配体(TRAIL)表达的
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
甲胎蛋白启动子论文参考文献
[1].董学妍.血清RASSF1A基因启动子甲基化联合甲胎蛋白检测在HBV相关的肝细胞癌中的临床诊断价值[C].2015浙江省检验医学学术年会论文汇编.2015
[2].张晓龙,杨铭,范冬梅,李真真,鲍世琦.脐带间充质干细胞运载甲胎蛋白启动子驱动的IST-sTRAIL与5-FU联合应用对HepG2肝癌原位移植瘤的治疗作用[C].天津市生物医学工程学会第叁十四届学术年会论文集.2014
[3].叶景佳,陈萍,贾振宇,李春春,陈丽红.巨细胞病毒增强子提高人甲胎蛋白启动子效率的研究[J].中国细胞生物学学报.2013
[4].王萍,刘保清,李卫红,董凌月,尤红.利用甲胎蛋白启动子活力筛选人胚胎肝脏前体细胞[J].解剖学报.2011
[5].华赟鹏,赖佳明,李绍强,汪勇,王瑛.甲胎蛋白启动子驱动的yCDglyTK双自杀基因治疗裸鼠肝癌的机制研究[J].中华普通外科学文献(电子版).2009
[6].王水良,庄岳鹏,王志红,兰风华.人甲胎蛋白基因启动子驱动siRNA表达载体的构建及其在HepG2细胞中RNA效应的初步鉴定[J].福州总医院学报.2008
[7].王水良,庄岳鹏,王志红,兰风华.人甲胎蛋白基因启动子siRNA表达载体的构建及效应鉴定[J].肿瘤.2007
[8].魏强,王健伟,郭丽,屈建国,赵玉琪.以人甲胎蛋白启动子控制表达HIV-1vpr基因的重组腺病毒诱导肝癌细胞G2期阻滞和细胞凋亡作用的研究[J].中国实验诊断学.2006
[9].魏强,王健伟,屈建国,赵玉琪,洪涛.人甲胎蛋白启动子控制HIV-1Vpr表达的重组腺病毒体内抑瘤效果研究[J].上海医药.2006
[10].况舸,黄爱龙,唐霓.肿瘤特异性Survivin启动子与甲胎蛋白启动子的活性评价与比较[J].中华肝脏病杂志.2005
论文知识图
