血站ELISA法筛查HIV抗体阳性标本与免疫印迹法检测结果的比较

血站ELISA法筛查HIV抗体阳性标本与免疫印迹法检测结果的比较

曹华(安徽省阜阳市中心血站安徽阜阳236000)

【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2012)16-0059-02

【摘要】目的比较血站ELISA法筛查HIV抗体阳性标本与免疫印迹法确认的结果。方法对HIV抗体初筛阳性标本采用免疫印迹试验进行确证。结果ELISA法与免疫印迹法的阳性符合率为85.4%。S/CO值大于或等于1而小于6,与确证试验阳性符合率为25.0%;大于或等于4而小于10,阳性符合率为73.7%;S/CO值大于或等于10,阳性符合率为92.3%。结论筛查试验存在一定假阳性结果,随着s/co值的增高,与确证试验的阳性符合率也升高。由于ELISA初筛试验存在假阳性结果,HIV抗体结果报告必须以WB结果为准。

【关键词】HIV抗体酶联免疫吸附测定免疫印迹血站

ComparisonofHIVantibodyscreeningpositivebyELISAinbloodstationandwesternblottestresults

【Abstract】ObjectiveComparingandanalyzingtheHIVantibodyscreeningpositiveresultsbyELISAandWesternBlot(WB)testresults.MethodsHIVpositivesamplesscreenedbyELISAwereconfirmedbyWesternBlotresults.ResultsThepositivecoincidencerateofELISAandWBwere85.4%.WhentheS/COvalueofthepositivesamplesscreenedbyELISAequa1toormorethan1andlessthan4,25.0%wereconfirmedbyWB,andwhenequa1toormorethan4andlessthan10,73.7%wereconfirmedbyWB,andwhenmorethan10,92.3%wereconfirmedbyWB.ConclusionWiththeS/COvaluesincreased,thepositivecoincidencerateofELISAandWBincreased.ThefinalHIVantibodytestresultsmustbeconfirmedbyWBtestassomefalsepositivesdoexistinthescreeningtestofELISA.

【Keywords】HIVantibodiesenzyme-linkedimmunosorbentassay;immunoblottingBloodstation

艾滋病(AIDS)是Acquiredimmunodeficiencysyndrome的英文缩写,即获得性免疫缺陷综合症。艾滋病是由艾滋病毒感染所引起的,它是一种严重的性传播疾病。艾滋病毒又称为人类免疫缺乏病毒简称HIV。HIV主要破坏人体免疫系统的CD4+的T淋巴细胞,致使人体对周围环境中的病原微生物丧失抵抗能力,进而机体免疫监视功能下降,可并发严重的感染和肿瘤,最终导致感染者死亡。

目前,血站检测HIV的主要方法是采用ELISA方法检测献血员血中的抗-HIV抗体。但经过ELISA法筛查后,仍有少部分输血后艾滋病的发生,原因包括献血者处于HIV感染的“窗口期”,不能检测到抗体;试剂本身包被抗原的质量,会出现假阳性或假阴性的结果。本文结合我站2009年1月~2011年12月份HIVELISA法初筛试验及确认实验室确证试验检测结果进行相关探讨。

1资料与方法

1.1研究对象2009年1月至2011年12月,本站献血员HIVELISA法检测初筛阳性的血清标本130例。均抽取静脉血3mL,进行HIV抗体检测。

1.2试剂与仪器

试剂:HIV抗体初筛(ELISA法)试剂盒和胶体金法试剂盒购自珠海丽珠试剂有限公司和北京万泰生物技术有限公司。仪器:爱康Xantus加样仪;奥斯邦Fame(加样枪,酶标仪,孵育器,洗板机)。

1.3检测方法初筛采用双抗原夹心ELISA法。初筛阳性标本用原试剂及另外一种不同原理试剂复查,将两法检测阳性或一阴一阳标本按照《全国艾滋病检测技术规范》要求送确证实验室进行艾滋病确证免疫印迹法确证。确证结果按试剂盒说明书进行判断,HIV-1抗体阳性:检测出两条env带(gpl60/gp41和gpl20)及gag(pl7、p24、p55)或pol(p31、p51、p66)带;阴性:没有病毒的特异性条带,或只检出pl7抗体没有其他条带;不确定:出现任何病毒特异条带,但不足于被判断为阳性。HIV-2抗体阳性:在HIV-1阳性或不确定基础上见如HIV-2清晰条带,提示HIV-2阳性感染。

1.4统计学处理采用SPSS11.0软件进行描述性统计分析。

2结果

2.1ELISA初筛法与免疫印迹法确证试验的检测结果(见表1)

表1ELISA初筛法与免疫印迹法确证试验的检测结果

2.2ELISA不同S/CO值与免疫印迹法确证试验结果(见表2)

表2ELISA不同S/CO值与免疫印迹法确证试验结果

3讨论

我在实际工作中HIV检测出现假阳性的可能原因主要是以下两个方面:(1)血液样本中含有一些干扰物质,如类风湿因子(RF)[1]、溶血、高血脂、黄疸等。(2)用于试剂固相包被的基因工程抗原不纯。由于HIV诊断试剂质量存在的一些问题及机体对HIV免疫应答的复杂性,就要求我们在实际工作中在试剂的选择上一定要优中选优,根据卫生部试剂质量分析选择理想的产品,如经济条件允许应选择进口试剂对可疑标本复检,设定合适的灰区,减少血液浪费,保证血液质量。

由于阳性判定标准更为严格,随之而来的则是不确定结果的增加。各种不同研究发现,在保证检测质量的基础上,造成不确定原因主要有:HIV新近感染不久出现的血清转换期、肝病、自身免疫性疾病、输入血制品、肾功能衰竭和血液透析、注射某些药物、妊娠、肿瘤、免疫接种、疟疾、病毒感染等[2-3]。本次研究对象中,10例为不确定,占初筛阳性的7.7%。对于不确定标本,需要4-8周甚至更长时间随访检测,并根据复查结果来最终判定是阴性还是阳性。这也是实践工作中WB确认方法的局限性。不确定结果标本的存在,给检验人员检测工作带来难度;同时由于长时问随访给受检者带来困惑和巨大的心理压力,影响他们的学习、工作、就业机会等。

参考文献

[1]易浔飞,徐元斌,王玉丰.肉源性物质对第2、3代抗-HIVELISA初筛试验的影响[J].中国输血杂志,2002,4.

[2]高凯,李燕,梁彩云,等.用蛋白印迹确认实验榆查“人类免疫缺陷病毒抗体不确定”结果的分析[J].微生物与感染,2007,2(1):16-18.

[3]郑晓虹,潘启超,张玮,等.人类免疫缺陷病毒确认试验不确定结果分析[J].上海预防医学杂志,2007,19(8):373-376.

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