藤壶cp19k基因mRNA二级结构对其在大肠杆菌中表达的影响

藤壶cp19k基因mRNA二级结构对其在大肠杆菌中表达的影响

论文摘要

目的探究藤壶cp19k基因5′端mRNA二级结构对其在大肠杆菌中表达的影响。方法通过对3个藤壶物种的cp19k基因(balcp19k、mrcp19k、bicp19k)序列进行分析,并利用大肠杆菌密码子偏好性对其进行优化,将优化后的3个基因序列利用BioSun软件分析其5′端和3′端的mRNA二级结构和自由能。利用大肠杆菌原核表达系统对3个基因进行表达,并通过SDS-PAGE观察蛋白表达情况。结果 3个基因的3′端mRNA二级结构和自由能差异较小;5′端mRNA二级结构相比,balcp19k结构相对简单,自由能较高,mrcp19k和bicp19k二级结构较稳定,自由能较低。SDS-PAGE及Western印迹结果显示,Balcp19k蛋白有表达,而Mrcp19k蛋白和Bicp19k蛋白无表达。结论cp19k基因5′端mRNA二级结构稳定且自由能低不利于蛋白表达。此结果为藤壶cp19k的进一步研究奠定了基础,也为其他外源基因在原核系统中表达提供了借鉴。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1 1.1 材料
  •   1 1.2 方法
  •     1.2.1 藤壶cp19k基因序列的获得和优化
  •     1.2.2 基因mRNA二级结构分析
  •     1.2.3 重组表达载体的构建与鉴定
  •     1.2.4 目的基因的诱导表达
  •     1.2.5 表达产物的Western印迹检测
  • 2结果
  •   2.1 cp19k基因mRNA二级结构分析
  •   2.2重组表达质粒的验证
  •   2.3 SDS‐PAGE检测蛋白表达
  •   2.4重组cp19k的Western印迹鉴定
  • 3讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 徐臻臻,刘青,付文亮,李伍举,邢薇薇,王园园,徐东刚,刘中成

    关键词: 藤壶胶,基因表达,二级结构,自由能,大肠杆菌,仿生材料

    来源: 军事医学 2019年06期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技,基础科学

    专业: 生物学

    单位: 河北大学药学院,军事科学院军事医学研究院军事认知与脑科学研究所

    基金: 国防基础科研计划(JCKY2018548C001)

    分类号: Q786

    页码: 401-405

    总页数: 5

    文件大小: 1453K

    下载量: 91

    相关论文文献

    标签:;  ;  ;  ;  ;  ;  

    藤壶cp19k基因mRNA二级结构对其在大肠杆菌中表达的影响
    下载Doc文档

    猜你喜欢