导读:本文包含了激酶域论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:PINK1激酶,线粒体,表达纯化,生物学活性
激酶域论文文献综述
王淑娟[1]（2018）在《帕金森病相关线粒体膜蛋白PINK1激酶域调控机理研究》一文中研究指出同源性磷酸酶张力蛋白诱导的激酶1(PTEN-induced putative kinase 1)PINK1是一种高度保守的丝氨酸苏氨酸激酶,主要定位在线粒体上。PINK1基因是一种帕金森病PD相关易感基因PARK6,属于常染色体隐性遗传早发性帕金森综合征的致病基因之一。该致病基因的异常将导致线粒体功能异常、泛素蛋白酶体系统(UPS)功能障碍、氧化应激和神经元突触囊泡功能障碍等各种分子和细胞生物学改变,从而导致PD发生。目前已经分别解析了分辨率为2.78埃TcPINK1和3.1埃PhPINK1叁元复合物的晶体结构,阐明了激酶区INS3和C端CTE对于PINK1的生物学活性及底物识别的重要性,但是对于激酶PINK1的活化机制、C末端CTE如何影响激酶PINK1的活性仍不清楚。这些信息对于明确其调控机制及致病机理具有重要意义。本论文通过建立具有生物学活性的PINK1表达纯化体系,以及PINK1激酶活性检测体系,研究影响激酶生物学活性的关键结构元件,为阐明PINK1激酶生物学活性调控机制提供依据。(本文来源于《天津大学》期刊2018-05-01）
Linli,Zhou,Cai,Liang,Qinfu,Chen,Zhenlei,Zhang,Bo,Zhang[2]（2018）在《Haspin氨基端非激酶域与Pds5B的结合在有丝分裂期保护着丝粒区姐妹染色体粘连》一文中研究指出文章简介黏连蛋白复合体(cohesin)维持姐妹染色单体配对,并促进染色体与纺锤体的正确连接。在有丝分裂的初期,染色体臂上的cohesin在其调节亚基Wapl的作用下被大量地去除,而着丝粒区的cohesin必须得以保留才能防止染色体的错误分离。本研究发现,蛋白激酶Haspin通过位于氨基端非激酶域的一个保守基序与cohesin的调节亚基Pds5B直接结(本文来源于《科学新闻》期刊2018年04期）
李叶,廖丽丽,许婷,张怀渝,郭晋雅[3]（2017）在《拟南芥类受体蛋白激酶的激酶域信号传导强度研究》一文中研究指出为了解不同类受体蛋白激酶RLKs激酶域响应病原相关分子PAMPs信号强度的差异,本研究将拟南芥FLS2的胞外域(NT)与6种不同RLKs的激酶域(KD)组合为重组RLKs(rRLKs),构建融合基因表达载体,并通过拟南芥原生质体瞬时表达的方法,将rRLKs/FLS2、35S::GUS(内参)和FRK1::Luciferase(响应报告载体)共转化到拟南芥fls2突变体叶肉原生质体细胞中;后经flg22处理后,通过对萤光素酶(Luciferase)和葡糖苷酸酶(GUS)活性的定量分析和比较,鉴定不同RLKs激酶区域信号传导的强度。结果表明:1)FLS2、EFR、PEPR1和RLK7的激酶域可明显激活抗病响应报告基因FRK1的表达,对植物抗病反应起正调控作用;FLS2和EFR的激酶域信号传导能力最强,两者无显着差异(P<0.05);PEPR1和RLK7激酶域的信号传导能力稍弱,其信号传导强度分别是FLS2的57.13%和32.92%,与FLS2差异显着(P<0.05);2)CERK1和NIK1的激酶域对FRK1的上调作用不明显,其信号传导强度分别仅有FLS2的9.76%和7.88%,和FLS2NT(对照)之间无显着差异(P<0.05);3)PSKR1激酶域引起FRK1表达下调,对PTI起负调控作用。本研究结果有助于了解RLK家族的抗病响应作用机理,并为人工构建更高效的rRLK蛋白提供参考。(本文来源于《中国农业大学学报》期刊2017年12期）
胡蔚[4]（2014）在《水稻细胞壁关联蛋白激酶（OsWAK11）启动子对非生物胁迫的响应及其激酶域活性初步测定》一文中研究指出植物细胞壁关联蛋白激酶(Wall-associated kinase, WAK)是一类特殊的类受体蛋白激酶(Receptor-like kinases, RLKs),它的结构特殊,由叁部分组成：分别为胞外域、跨膜域和一个具有丝／苏氨酸激酶活性的胞内域；其中胞外域可通过与细胞壁成分果胶共价交联感知细胞壁变化,胞内域具有激酶活性可以将胞外信号通过磷酸化的方式进行传送,为WAK跨膜传递信号提供了分子基础。研究显示WAK在多种植物中被发现,分布广泛,其基因在植物体内的表达具有特异性,能受到特定因素的诱导。高等植物的基因调控主要是在转录水平上进行的,基因上游的启动子序列包含了多种顺式作用元件和核心元件,研究植物基因的启动子是研究特定基因表达特点和转录调控机制的关键。本研究通过PCR技术成功从水稻基因组DNA中分离获得细胞壁关联蛋白激酶(OsWAK11)基因上游启动子序列,长度为974bp(946/+28),将其命名为OsWAKpro.通过软件分析发现,OsWAKpro序列包含了重要的顺式作用元件以及启动子基本元件,分别为TATA-box、CAAT-box、I-box和W-box一系列启动子核心元件,以及铜响应调控元件(CuRE),茉莉酸甲酯(MeJA)相关元件,热激蛋白调控元件(HSE)和脱落酸调控元件(ABRE)以上参与植物对于外界环境响应的元件。为进一步研究WAK启动子对下游基因的调控作用,本研究利用克隆获得的OsWAKpro片段构建了连接GUS报告基因的植物表达载体pBI121-OsWAKpro-GUS,通过农杆菌介导法获得了转基因烟草。对转基因烟草进行GUS组织化学染色,结果发现OsWAKpro的表达具有组织特异性,主要在转基因烟草地上部表达,在根系中不表达。地上部主要在真叶(叶脉),子叶,茎以及茎的木质部,髓,以及形成层细胞中表达,OsWAKpro在成熟花的柱头和子房处也有强烈表达。此外还发现机械损伤强烈诱导OsWAKpro的特异性表达。已有研究发现WAK基因在水稻中受到一些特定金属离子的诱导表达,为进一步研究OsWAKpro在植物体内对于金属胁迫的响应情况,本实验对转基因烟草进行了铜、铝、钠叁种金属离子处理,结果显示3种金属都能诱导OsWAKpro的高度表达。其中GUS蛋白活性最高的是铜处理植株,为对照的6.4倍；其次为铝处理(3倍)；钠处理下GUS活性为对照的2.1倍。而对转基因烟草进行不同浓度的金属盐溶液处理,随着铝浓度升高至100μmol·L-1,转OsWAKpro烟草体内的GUS蛋白活性相应上升,而AL3+浓度继续上升至200 μmol·L-1时,GUS活性有所下降；在0-10μmol·L-1Cu2+处理下,GUS蛋白活性随Cu2+处理浓度的提高而上升,当Cu2+处理浓度提高至20μmol·L-1时,GUS蛋白活性开始下降,但仍显着高于未处理对照。而当NaCl浓度为50μmol·L-1时,GUS活性显着高于其他处理浓度。一氧化氮供体硝普钠(SNP)和抗病相关信号分子水杨酸(SA)、茉莉酸甲酯(MeJA)同样能诱导OsWAKpro表达,其中SNP处理后转OsWAKpro植株体内GUS活性显着高于未处理对照,而MeJA和SA处理下植株GUS活性在数值上略高于未处理组,但无显着差异。本实验利用Omnia(/) Ser/Thr-Peptide Kit试剂盒测定经纯化的OsWAK激酶域融合蛋白的体外激酶活性。结果显示,OsWAK激酶域融合蛋白浓度为87.5 μmol·L-1,在30℃下,1.0mmol·L-1 ATP,0.2 mmol·L-1 DTT,10 μmol·L-1 Ser/Thr-Peptide的反应体系中检测得具有激酶活性,在反应开始24 min之后10 μmol·L-1底物的磷酸化水平达到饱和。分析OsWAK蛋白米氏常量(Km)和最大反应速率(Vm),结果表明WAK蛋白体外具有激酶活性,Km=3.58μmol·L-1, Vmax=0.30μmol·min-1·μg-1。(本文来源于《南京农业大学》期刊2014-06-01）
孙善亮,张亮,刘海春,卢帅,陆涛[5]（2013）在《PLK1激酶域抑制剂的构效关系与作用模式》一文中研究指出Polo样激酶1(polo-like kinases 1,PLK1)作为抗肿瘤药物的靶标,在过去十年里得到了广泛的研究。目前,已有多个PLK1抑制剂进入临床研究。已报道的PLK1抑制剂的化学结构类型较多,本文主要针对激酶域ATP抑制剂,总结其构效关系和作用模式,阐述研究进展,以期对PLK1抑制剂的研究提供有益的参考。(本文来源于《中国医药工业杂志》期刊2013年10期）
李晓光,林一聪,张江鹄,谢曼青,刘明生[6]（2013）在《中国人散发性肌萎缩侧索硬化发病风险与碳水化合物激酶域包含基因单核苷酸多态性关联的研究》一文中研究指出目的探讨中国人散发性肌萎缩侧索硬化(amyotrophic lateral sclerosis,ALS)致病风险与碳水化合物激酶域包含(carbohydrate kinase domain containing,FGGY,又称FLJ10986)基因中rs6700125的关联,及其是否与其他人群相同。方法提取外周血基因组样本DNA,采用两种方法进行单核苷酸多态性(SNP)分型,第一部分样本以不对称PCR扩增包含目标SNP在内的片段,采用高分辨熔解法完成非标记探针的基因分型,第二部分样本采用质谱分型。结果完成了中国汉族人群组成的143例ALS患者与153名正常对照之间rs6700125位点的基因分型。rs6700125基因型Hardy-Weinberg平衡采用Pearson检验、lIr检验、精确检验,结果显示对照组及病例组均符合Hardy-Weinberg平衡,说明本研究的样本为连锁平衡群体,具有群体代表性。rs6700125位点在中国人群为来源的143例ALS患者与153名正常对照之间,等位基因(T/C)频率(OR=1.117,95%CI:0.84～1.62,χ2=0.94,P%=0.331)及基因型频率(OR=1.136,95%CI:0.64～2.013,χ2=0.19,P%=0.662)的差异无统计学意义。结论本研究未发现FGGY基因中的rs6700125位点与中国人散发性ALS的致病风险相关。这可能和ALS本身复杂的遗传异质性相关,也不除外人种差异,有必要根据全基因关联分析的初步结果在中国汉族患者中筛查与发病风险有关的特异易感位点。(本文来源于《北京医学》期刊2013年05期）
吴垠宽[7]（2012）在《水稻细胞壁关联蛋白激酶(OsWAK)基因的克隆及激酶域的原核表达》一文中研究指出细胞壁关联蛋白激酶(Wall associated kinases, WAKs)是一类典型的可与细胞壁直接结合的类受体激酶蛋白,具有表皮生长因子(Epidermal growth factor, EGF)结构域、跨膜域、胞内丝/苏氨酸激酶域和两个插入位置保守的内含子的典型基因组结构。不同的WAK家族成员,在植物不同部位或不同发育时期的表达具有选择性和差异性,外部环境的生物和非生物刺激也可以诱导WAK基因的表达。不同WAK家族成员的功能研究表明,在植株各种生理过程中都起到重要的作用,比如信号转导、抵抗病原体、耐重金属、矿物营养响应、细胞伸长乃至整个生长发育。研究者已经从粳稻品种“日本晴”中分离出125个水稻WAK基因家族成员,且研究表明OsWAK1 (Oryza Sativa Wall Associated Kinases 1)的诱导表达在植物防御反应中也同样起着重要的作用。但是对于WAK是通过什么机制参与并调控植物生长发育及相关防御反应过程的,水稻中的OsWAK是否也有相似的功能及其作用机制,相关研究还不够深入。本研究旨在通过对水稻WAK基因的克隆及其激酶域的原核表达的研究,为进一步机理研究奠定实验基础,本实验取得如下研究结果：1.利用已公布的水稻细胞壁关联蛋白激酶序列设计特异性引物,以基因cDNA第一链为模板,利用PCR方法扩增水稻细胞壁关联蛋白激酶的编码序列,并成功克隆得到全长为2136bp的目的基因OsWAK(登录号：NM 001052189.1),并对其核苷酸序列和预测编码的蛋白(登录号：BAD07845.1)进行相关生物信息学分析,分析结果表明OsWAK的基因组序列包含两个内含子叁个外显子,所编码的蛋白与其他植物WAK蛋白序列比较分析发现OsWAK蛋白序列与高粱SbWAK、二穗短柄草BdWAK以及小麦TaWAK都有高于50%的同源度；利用SMART等分析工具初步预测其跨膜结构、激酶域等结构域,结果显示含有两个EGF结构域(220～268 aa、272～310 aa)、一个跨膜结构域(324～343aa)和一个胞内丝/苏氨酸激酶结构域(393～662 aa)。2.通过采用半定量RT-PCR方法对OsWAK基因表达特性进行分析,发现该基因在水稻的地上部地下部均有表达；同时发现在不同外源物质诱导下该基因表现出不同的表达模式,结果表明OsWAK基因受外源的SA、MeJA及过量的Cu2+、Al3+和Na+的诱导表达,而外源NO供体SNP下调该基因表达。3.利用大肠杆菌重组系统,将OsWAK的胞内激酶结构域片段克隆到大肠杆菌表达载体pSUMO上,重组质粒命名为pSUMO-WAKD,经验证后将含有重组子的克隆在11。C下用0.2 mM的IPTG进行诱导表达,得到分子量约为60 kDa的SUMO-WAKD融合蛋白,经Ni-NTA树脂层析后获得浓度为0.6 mg/mL的融合蛋白,并利用SUMO酶对其进行了蛋白的酶切验证,为后续激酶活性的测定奠定了实验基础。(本文来源于《南京农业大学》期刊2012-06-01）
汪青[8]（2010）在《水稻类受体蛋白激酶OsRPK1激酶域的表达纯化及体外激酶活性验证》一文中研究指出本文旨在通过异源表达系统表达水稻LRR型类受体蛋白激酶OsRPK1激酶域,并在体外进行其激酶活性分析,通过实验证明其能发生自体磷酸化反应。植物类受体蛋白激酶广泛参与植物生长发育、激素信号转导、抗病和抗逆等途径。类受体蛋白激酶生理作用的发挥依赖于自身的激酶活性,因此研究该类激酶的活性及发挥活性的必要因素是开展其功能研究非常重要的方面。本实验室在前期工作中开展了盐胁迫下水稻质膜蛋白质组学分析,鉴定了一批盐胁迫响应蛋白,其中包括一个分子量98kDa,等电点5.93的蛋白点,在胁迫处理后表达水平显着上调。经水稻蛋白数据库检索,该蛋白为一个推测的类受体蛋白激酶,我们将其命名为OsRPK1。OsRPK1基因全长3177bp,编码区2910bp,编码969个氨基酸。通过生物信息学分析,推测OsRPK1是一个包括亮氨酸富集区(Leucine-Rich-Repeat, LRR)的类受体蛋白激酶。为了用实验方法具体验证OsRPK1能否发生自体磷酸化反应,我们设计了如下实验：首先,通过RT-PCR方法从盐胁迫的水稻根尖组织cDNA中扩增得到OsRPK1(OsRPK1除去预测的信号肽区)和OsRPK1-KD(预测的OsRPK1激酶区)基因片段。利用DNA重组技术,将这两个片段分别连接到pGEX-4T-1载体上,构建了OsRPK1和OsRPK1-KD的原核表达载体pGEX-OsRPKl和pGEX-OsRPK1-KD。将原核表达载体转化大肠杆菌BL21菌株,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,SDS-PAGE检测表达情况。同时,我们从pGEX-OsRPK1-KD载体上扩增了GST-OsRPK1-KD片段,并将其连接到pPICZαA载体上,构建了酵母表达载体pPUCZαA-GST-OsRPK1-KD,将该表达载体转化酵母X-33菌株,经甲醇诱导表达,SDS-PAGE检测表达情况。最后,将有表达的融合蛋白,通过GST resin亲和纯化,与γ-32P-ATP反应,放射自显影检测磷酸化活性。通过以上实验,本文成功构建了两个原核表达载体和一个真核表达载体,其中pGEX-OsRPK1-KD能够在大肠杆菌BL21菌株表达GST-OsRPK1-KD融合蛋白。通过GST resin亲和层析,得到纯化的GST-OsRPK1-KD融合蛋白。GST-OsRPK1-KD与γ-32P-ATP孵育,在Mn2+或Mg2+或者二者都存在的情况下,表现出蛋白激酶活性,即能够发生自体磷酸化,同时该活性需要细胞总蛋白的参加。辅助因子二价阳离子,相比Mn2+来说,Mg2+更能激活GST-OsRPK1-KD的激酶活性。本文的研究结果证明,OsRPK1具有自体磷酸化的蛋白激酶活性,该活性需要通过OsRPK1与其他蛋白相互作用而表现。(本文来源于《南京农业大学》期刊2010-11-01）
毛琛,徐希平,王燕,臧桐华,张彦明[9]（2007）在《EGFR酪氨酸激酶域基因突变和非小细胞肺癌的靶向治疗》一文中研究指出EGFR靶向抑制剂,是目前NSCLC靶向治疗的研究热点之一。临床研究表明,患者对EGFR靶向抑制剂的疗效存在明显的差异。本文就EGFR酪氨酸激酶域基因突变与NSCLC靶向治疗的相关性进行了回顾,探讨预示其疗效的标志物,有助于EGFR抑制剂在NSCLC治疗中的最优化使用。(本文来源于《疾病控制杂志》期刊2007年06期）
徐凡,李鹏丽,苑玲玲,王宁宁[10]（2007）在《过表达GmSARK基因全长与激酶域的转基因拟南芥的表型分析》一文中研究指出植物叶片衰老是一种受遗传和外界因子等影响的高度程序化死亡过程。植物 LRR 型类受体蛋白激酶(receptor-like protein kinase,RLPK)已证明广泛参与了生长、发育调控以及环境刺激/应答反应等多种信号传导过程,在植物生命活动中发挥着重要的生物学功能。我们前期研究发现,大豆 LRR 型的类受体蛋白激酶基因 GmSARK(GenBank Accession No．(本文来源于《2007中国植物生理学会全国学术会议论文摘要汇编》期刊2007-08-01）
激酶域论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
文章简介黏连蛋白复合体(cohesin)维持姐妹染色单体配对,并促进染色体与纺锤体的正确连接。在有丝分裂的初期,染色体臂上的cohesin在其调节亚基Wapl的作用下被大量地去除,而着丝粒区的cohesin必须得以保留才能防止染色体的错误分离。本研究发现,蛋白激酶Haspin通过位于氨基端非激酶域的一个保守基序与cohesin的调节亚基Pds5B直接结
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
激酶域论文参考文献
[1].王淑娟.帕金森病相关线粒体膜蛋白PINK1激酶域调控机理研究[D].天津大学.2018
[2].Linli,Zhou,Cai,Liang,Qinfu,Chen,Zhenlei,Zhang,Bo,Zhang.Haspin氨基端非激酶域与Pds5B的结合在有丝分裂期保护着丝粒区姐妹染色体粘连[J].科学新闻.2018
[3].李叶,廖丽丽,许婷,张怀渝,郭晋雅.拟南芥类受体蛋白激酶的激酶域信号传导强度研究[J].中国农业大学学报.2017
[4].胡蔚.水稻细胞壁关联蛋白激酶（OsWAK11）启动子对非生物胁迫的响应及其激酶域活性初步测定[D].南京农业大学.2014
[5].孙善亮,张亮,刘海春,卢帅,陆涛.PLK1激酶域抑制剂的构效关系与作用模式[J].中国医药工业杂志.2013
[6].李晓光,林一聪,张江鹄,谢曼青,刘明生.中国人散发性肌萎缩侧索硬化发病风险与碳水化合物激酶域包含基因单核苷酸多态性关联的研究[J].北京医学.2013
[7].吴垠宽.水稻细胞壁关联蛋白激酶(OsWAK)基因的克隆及激酶域的原核表达[D].南京农业大学.2012
[8].汪青.水稻类受体蛋白激酶OsRPK1激酶域的表达纯化及体外激酶活性验证[D].南京农业大学.2010
[9].毛琛,徐希平,王燕,臧桐华,张彦明.EGFR酪氨酸激酶域基因突变和非小细胞肺癌的靶向治疗[J].疾病控制杂志.2007
[10].徐凡,李鹏丽,苑玲玲,王宁宁.过表达GmSARK基因全长与激酶域的转基因拟南芥的表型分析[C].2007中国植物生理学会全国学术会议论文摘要汇编.2007