鉴别牛5种重要病毒的LAMP-基因芯片方法的建立

鉴别牛5种重要病毒的LAMP-基因芯片方法的建立

论文摘要

为建立牛的主要疫病的快速、准确及高通量鉴别诊断技术,以赤羽病病毒(AKV)、牛白血病病毒(BLV)、蓝舌病病毒(BTV)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)和小反刍兽疫病毒(PPRV)5种牛传染病病原为研究对象,将LAMP技术与微流控芯片技术有机结合,建立了相应的基因芯片检测技术,并优化了该基因芯片的反应条件。结果表明,建立的基因芯片可同时检测上述5种病原,特异性好,60 min反应时间即可给出检测结果。其中AKV和PPRV的敏感性为103copies/μL,BLV的敏感性为105copies/μL,BTV和BVDV的敏感性为102copies/μL,与LAMP检测的敏感性一致。成功建立了基于LAMP技术的5重RT-LAMP基因芯片,可同时快速准确检测上述5种病毒,为口岸检疫探索出一种能快速、高通量检测动物疫病的方法。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •     1.1.1 病毒株
  •     1.1.2 主要试剂、仪器及耗材
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 引物序列设计
  •     1.2.2 病毒核酸的提取及反转录
  •     1.2.3 LAMP检测体系的优化
  •     1.2.4 LAMP检测芯片的制备
  •     1.2.5 芯片加样
  •     1.2.6 特异性试验
  •     1.2.7 敏感性试验
  •     1.2.8 基因芯片的检验
  • 2 结果
  •   2.1 最佳反应条件的筛选
  •   2.2 特异性
  •   2.3 敏感性
  •   2.4 混合样品检测结果
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 高峰,华利忠,于伯华,王建峰,张丹,张琳,唐泰山,张常印

    关键词: 环介导等温扩增技术,高通量,微流控芯片,牛的病毒鉴别检测

    来源: 动物医学进展 2019年05期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 盐城出入境检验检疫局,江苏省农业科学院兽医研究所,宁波检验检疫科学技术研究院,江苏出入境检验检疫局

    基金: 江苏检验检疫局科研项目(2016KJ14),宁波市科技创新团队(2015C110018)

    分类号: S852.65

    DOI: 10.16437/j.cnki.1007-5038.2019.05.002

    页码: 7-12

    总页数: 6

    文件大小: 1211K

    下载量: 252

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