论文摘要
目的目的观察骨形态发生蛋白4（BMP4）过表达转基因C57BL/6品系小鼠造血干细胞（HSC）的归巢能力。方法①构建BMP4过表达的C57BL/6品系小鼠转基因模型,设计特异引物对转基因新生小鼠进行筛选,筛选子代BMP4阳性鼠。取筛选后的子代阳性鼠5只,另取野生型C57BL/6品系小鼠5只,流式细胞仪分选出两种小鼠骨髓HSC。另取野生型C57BL/6品系小鼠20只,以10 Gy/20 g的钴60进行致死性辐照,后随机分为4组各5只,转基因1组小鼠经尾静注子代阳性鼠骨髓HSC和CFSE,野生型1组静注野生型小鼠骨髓HSC和CFSE,阳性对照组静注HSC体外CFSE追踪染色,阴性对照组只注射等量PBS。体内追踪16 h后提取骨髓有核细胞数（BMNC）,流式细胞仪上机,检测CFSE所在阳性区域为HSC的归巢效率。②随机取转基因BMP4子代阳性鼠和野生型C57BL/6品系小鼠各3只（分别计为转基因2组和野生型2组）,采用RT-PCR法检测造血归巢趋化因子（CXCL12）,Western blotting法检测整合素α4（ITGA4）和血管内皮细胞黏附分子1（VCAM-1）蛋白。结果转基因1组、野生型1组、阳性对照组、阴性对照组归巢效率分别为（0.352 0±0.0223 0）%、（0.721 0±0.032 0）%、（37.200 0±0.556 0）%、（0.101 3±0.018 0）%,转基因组与野生组、阴性组比较,野生组与阴性组比较,P均<0.05。转基因2组、野生型2组CXCL12 mRNA分别为（2.547.±0.126）%、（100.110±3.811）%,ITGA4蛋白分别为（231.0±2.49）%、（163.9±0.38）%,VCAM-1蛋白分别为（88.47±8.33）%、（92.33±1.98）%,两组CXCL12 mRNA、ITGA4蛋白比较,P均<0.05。结论 BMP4过表达转基因C57BL/6品系转基因子代小鼠HSC归巢效率与野生型相比是降低的,机制可能是通过CXCL12和ITGA4进行调控的,升高的ITGA4无法补偿CXCL12的下调,从而导致了归巢效率的降低。
论文目录
文章来源
类型: 期刊论文
作者: 张小晴,李娟,柴烁,高梦梦,李玉云
关键词: 骨形态发生蛋白,造血干细胞,归巢能力,造血趋化因子,整合素,血管内皮细胞黏附分子
来源: 山东医药 2019年30期
年度: 2019
分类: 医药卫生科技
专业: 临床医学
单位: 蚌埠医学院
基金: 安徽省自然科学研究重点项目(KJ2016A466),研究生科研创新计划项目(BYYCX1809)
分类号: R457.7
页码: 40-44
总页数: 5
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标签：骨形态发生蛋白论文; 造血干细胞论文; 归巢能力论文; 造血趋化因子论文; 整合素论文; 血管内皮细胞黏附分子论文;