论文摘要
为改善米曲霉木聚糖酶AoXyn11A的温度特性,基于其三维结构的同源建模和分子动力学模拟,随机替换最高B-factor值位点处的Gly21。以重组表达质粒pET-28a-Aoxyn11A为模板,采用全质粒两步PCR技术对AoXyn11A基因（Aoxyn11A）中编码Gly21的密码子实施饱和突变,将pET-28a-Aoxyn11A各突变体转化E. coli BL21（DE3）,构建了突变转化子文库。以酶的热稳定性为指标,从文库中筛选出最优突变转化子(E. coli/Aoxyn11AG21I)。DNA测序结果显示,E.coli/Aoxyn11AG21I表达一种由Ile21替换了Gly21的突变酶AoXyn11AG21I。温度特性分析表明:突变酶的最适温度由突变前的55℃提高至65℃;AoXyn11AG21I在55℃及以下稳定,较AoXyn11A提高了7℃。另外,AoXyn11A突变前后的pH特性改变不大。
论文目录
文章来源
类型: 期刊论文
作者: 吴芹,臧嘉,胡蝶,王瑞,邬敏辰
关键词: 定点饱和突变,木聚糖酶,温度特性,分子动力学模拟
来源: 食品与生物技术学报 2019年07期
年度: 2019
分类: 工程科技Ⅰ辑,基础科学
专业: 生物学
单位: 江南大学生物工程学院,江南大学无锡医学院
基金: 国家自然科学基金项目（31271811）
分类号: Q814
页码: 65-70
总页数: 6
文件大小: 2115K
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