张海涛[1]2003年在《卡维地洛对SHR心脏成纤维细胞增殖与胶原合成的影响及其调控机制的研究》文中研究指明高血压病(EH)是一种常见的心血管疾病，可引起心、脑、肾等器官的损害及其相关疾病的发生和发展，严重危害人类身心健康。左室肥厚(LVH)是EH患者心脏受累最常见的病理表现，并被证实是加重冠心病、心力衰竭、脑卒中等心血管疾病的独立危险因素。因此，逆转LVH已成为高血压治疗的重要目标。心肌纤维化是高血压发病过程中左室重建的重要病理改变，心脏成纤维细胞(CFs)的增殖和其生物活性决定着心肌细胞外间质胶原的生成和降解，而最终影响心肌肥厚的发生与发展。卡维地洛是第叁代β受体阻滞剂(βB)，可同时阻滞β_1、β_2及α_1受体。现已证实，卡维地洛可逆转LVH，但是否与其抑制CFs增殖及胶原合成有关，目前尚不十分清楚。本研究以自发性高血压大鼠(SHR)和实验大鼠(Wistar大鼠)的CFs为实验对象，对比观察卡维地洛、比索洛尔及哌唑嗪对CFs增殖、胶原合成的作用，分析卡维地洛对增殖细胞核抗原(PCNA)表达的影响，研究NOS-NO系统活性与CFs增殖及胶原合成的关系，旨在探讨卡维地洛逆转心肌纤维化方面的分子生物学机制，为药物防治高血压LVH提供理论依据和新的思路。 本研究以胰酶消化、差速贴壁法培养的SHR及血压正常的Wistar大鼠CFs为实验模型，采用~3H-脯氨酸(~3H-Proline)掺入法测定胶原合成，~3H-胸腺嘧啶核苷(~3H-TdR)掺入法测定DNA合成，改良的四氮唑盐(MTT)比色法测定细胞数目。用南京建成生物工程研究所提供的NO及NOS测试盒进行NO含量及NOS活性的测定。免疫组织化学染色技术分析PCNA蛋白在CFs细 第四军区大学硕士学位论文一胞核的表达。动态观察：O）基础状态下SHR和WIStar大鼠CFs的细胞数目、DNA合成及胶原含量和 NOSNO系统活性的变化特点；m卡维地洛对 CFS增殖和胶原合成的影响；m卡维地洛对CFS NOS－NO系统活性的影响；＊）比索洛尔对CFS增殖和胶原合成的作用；＊）派少噪对CFS增殖和胶原合成的影响；的）卡维地洛对PCNA蛋白在CFS细胞核表达中的影响。 研究结果显示：门）在基础状态下，CFs朋。的’HProline掺入量、’H丁dR掺入量及MTT法A。70值分别为11 96．8士对．SCpm、606刀士54．7Cpm、0．38士0刀1，均明显高于CFsWu（79．4士61．ICpm、495．2士49．scpm、0．36士0＊1），差异非常的显着（均 P＜0＊ 1）。（二）10－8－10’SM的卡维地洛作用 72h，WIStsr大鼠组 CFs‘H－Proline掺入量分别为 716 ＊士50．3cpm、609．0士49．2 cpm、457．8i44．7cpm和 408．2138．ocpm； SHR组分另为 1055．0士54．scPm、832．4士64．6cpm、604．二士 39．7cpm和 480．8士 30．3cpm。同等浓度卡维地洛作用下，Wstar大鼠组CFs’H－TdR掺入量分别为462．2士40．Icpm、388．二士35．ocpm、322．6士32．7cpm和277．8上25．3cpm；SHR组分另为554对土52．ZcPm、452＊土35．gcpm、317二上36．Zcpm和 279石士24．7cPm。随着卡维地洛干预浓度的增加，两组大鼠 3HProline及3H丁dR掺入量均呈递减趋势，较各自空白对照组均明显减低，并具有统计学意义。臼）10”8～10”’M卡维地洛作用下，同各自空白对照组门％）比较，Wistar大鼠组‘HIroline掺入率分别为 90对士6．2％、76．8士6．0％、57．6士5．5％和51．4士4．9％；SHR组分别为88．0士4．5％、69石士5．5％、50石士3．4％牙 40．2士2．3％。其中，10”‘M、10”’M卡维地洛干预下，两组大鼠3HProline掺入率差异显着，并且有统计学意义（分别P＜O刀5、P＜O刀1）。同等浓度卡维地洛作用下，同各自空白对照组门00％）比较，Wistar大鼠组 3H丁dR掺入率分别为 93．6士＆2％、78．4士 6．9％、65二土6．7％和 56．4士5．2％，SHR组分别为gi ＊土8．4％、74＊士6．2％、52．4士5．8％和 46．of 4．3％。其中，10－‘M、10”’M卡维地洛干预下，两组大鼠切1dR掺入率差异显着，并且有统计学意义（分别P叼．05、P叱．01人＊门0－h0”’M卡维他洛分别干预 24h、48h、72h，两组大鼠 CFS的 OD值均明显低于各自的空白对照组，随着浓度及干预时间的增加，其作用逐渐增强。6）在基础状 ·3－ 第四军区大学硕士学位论文一态下作用 72h，SHR组 CFs NO含量（66石上 3．5 u mol／L）及 NOS活性门 6．7士0．7 U／ml）较 Wistar大鼠组（80．8士 6．2 u mol／L、29J土 2．IU／ml）降低非常显着，并有统计学意义（均 P＜0．of卜“门”’M卡维地洛作用 48h、72h，SHR组 NO含量分别为 sl．4士4．In mol／L、gi石士4刀 u mol几，较各自空白对照组 （59．9士 3．in mol／L、66石士 3．5 u mol几）均明显增加，并具有统计学意义（均P＜0刀5）。10“’M卡维地洛作用 48h、72h，Wstar大鼠组 NO含量分男为 85河士 1刁 u mol／L、93．4士 4．7 u mol／L，较各自空白对照组（78．6士 1．6 n mol／L、80．8士6．2pmol几）均明显增加，并具有统计学意义（均P＜0刀5）。作用Nh时两组大?
张海涛, 赵连友, 刘朝中, 罗慧兰, 王荫静[2]2004年在《卡维地洛对高血压大鼠心肌成纤维细胞一氧化氮合酶-一氧化氮系统的影响》文中指出观察基础和卡维地洛干预条件下,自发性高血压大鼠和Wistar大鼠心肌成纤维细胞一氧化氮合酶-一氧化氤系统活性的变化。胰酶消化法分离、培养大鼠心肌成纤维细胞,采用硝酸还原酶法和分光光度法观察基础和卡维地洛干预条件下,培养基中一氧化氮合酶活性及一氧化氮含量的变化。结果发现,在基础状态下72 h,高血压大鼠组心肌成纤维细胞一氧化氮含量(66.6±3 5/μmol/L)及一氧化氮合酶活性(16.7±0.7 kU/L)较Wistar大鼠组(80.8±6.2/μmol/L和29.1±2.1 kU/L)显着降低,并有统计学意义(P<0.01);一氧化氮含量及一氧化氮合酶活性随卡维地洛浓度的增高而增加,均呈别量依赖性;另外,在不同浓度卡维地洛作用下,高血压大鼠组心肌成纤维细胞的一氧化氮含量随一氧化氮合酶活性的增强而增高,二者呈显着正相关(r=0.911,P<0.01)。结果提示,高血压大鼠心肌成纤维细胞的一氧化氮合酶一氧化氮系统功能异常,表现为一氧化氮合酶活性降低,一氧化氮含量减少。卡维地洛使心肌成纤维细胞内一氧化氯合酶一氧化氮系统活性显着增高,并呈浓度依赖性,其中对高血压大鼠的影响远远高于正常血压组,这可能是卡维地洛抑制血压增高的重要机制之一。
黄朝阳[3]2011年在《丝裂原活化蛋白激酶信号途径在原发性高血压中分子机制和干预研究》文中提出本课题共分为叁个部分：第一部分：不同年龄高血压大鼠血管平滑肌中细胞外信号调节激酶途径的表达目的：研究不同年龄的自发性高血压大鼠(SHR)和Wistar Kyoto大鼠(WKY)主动脉平滑肌中细胞外调节激酶(ERK)及其磷酸酶(MKP-1)的表达及其与高血压的关系方法：1、用tail-cuff测量大鼠尾动脉血压；2、用免疫沉淀法测定大鼠胸主动脉血管平滑肌中ERK活性；3、用Western印迹方法检测大鼠胸主动脉血管平滑肌中总ERK (t-ERK)、磷酸化ERK (p-ERK)以及丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1(MKP-1)水平；4、用RT-PCR法测定大鼠胸主动脉血管平滑肌中MKP-1 mRNA水平。结果：1、SHR的血压自8周龄起明显高于WKY(P<0.01),且随年龄增长而升高(P<0.05)至14周以后趋于稳定；2、SHR主动脉平滑肌中的p-ERK表达和ERK活性明显高于同年龄的WKY(P<0.01),随年龄增长而递增(P<0.05),与血压呈正相关；3、各年龄组SHR与相同周龄WKY大鼠t-ERK水平比较均无明显差异(P>0.05)4、SHR主动脉平滑肌中MKP-1蛋白及mRNA的表达明显高于同龄WKY,在5周龄时明显高于WKY,之后均随年龄的增长而递减(P<0.05),与血压和ERK呈负相关,而WKY下降不明显。结论：MKP-1在高血压的发生和发展过程中起重要作用,其表达逐渐下降可能是导致ERK激活增加,从而导致血管平滑肌细胞增殖,血压升高的重要原因。第二部分：苯那普利、氯沙坦、卡维地洛和肼屈嗪对高血压大鼠血管ERK途径的影响目的：探讨苯那普利、氯沙坦、卡维地洛和肼屈嗪对SHR胸主动脉平滑肌中ERK途径的影响。方法：1、选择同周龄WKY大鼠作正常对照,将35只14周龄雄性SHR随机分成5组：模型组、苯那普利组(10 mg·kg-1·d-1)、氯沙坦组(10mg·kg-1·d-1)、卡维地洛组(30mg·kg-1·d-1)和肼屈嗪组(10mg·kg-1·d-1),喂养10周。2、大鼠胸主动脉血管平滑肌中ERK活性、t-ERK、p-ERK以及MKP-1蛋白水平测定方法同第一部分。结果：1、喂养10周后,苯那普利组、氯沙坦组、卡维地洛组和肼屈嗪组血压相似,均显着低于模型组(n=7,P<0.01)。2、6组大鼠t-ERK水平无显着性差异(n=7,P>0.05)；3、苯那普利组、氯沙坦组、卡维地洛组和WKY组胸主动脉血管平滑肌中ERK活性、p-ERK、MKP-1和p-ERK/t-ERK比值水平无差异(n=7,P>0.05),显着低于肼屈嗪组和模型组(n=7,P<0.05)。4、肼屈嗪组和模型组大鼠胸主动脉ERK活性、p-ERK、MKP-1和p-ERK/t-ERK比值水平无差异(n=7,P>0.05)。结论：SHR胸主动脉ERK活性程度和MKP-1水平增加；苯那普利、氯沙坦和卡维地洛可降低SHR胸主动脉血管平滑肌中ERK活性程度和MKP-1水平,肼屈嗪却不能,提示苯那普利、氯沙坦和卡维地洛主要不是通过降压作用影响ERK途径。第叁部分：血管紧张素Ⅱ对SHR血管平滑肌细胞中ERK信号的影响目的：探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对SHR和WKY大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs) ERK信号途径的影响。方法：1、体外培养SHR和WKY大鼠的VSMCs,先在培养基中加入终浓度为1×10-5 mmol/L的缬沙坦或1×10-5 mmol/L的PD98059或不加药物,再给予1×10-7 mmol/L的AngⅡ刺激24 h后收集细胞,以无血清培养基培养的VSMCs作对照。2、SHR和WKY大鼠的VSMCs各分4组：1)对照组；2)AngⅡ刺激组；3)AngⅡ+缬沙坦组；4)AngⅡ+PD98059组。3、VSMCs中ERK活性、t-ERK p-ERK以及MKP-1蛋白水平和MKP-1mRNA的含量测定方法同第一部分。4、用RT-PCR法测定VSMCs中MKP-1 mRNA水平。结果：1、SHR和WKY大鼠AngⅡ刺激组VSMCs中ERK活性、p-ERK MKP-1及MKP-1mRNA水平均明显高于对照组(P<0.05)；SHR和WKY大鼠AngⅡ+缬沙坦组和AngⅡ+PD98059组的上述指标与对照组比较均无显着性差异。2、SHR大鼠VSMCs中ERK活性、p-ERK、MKP-1及MKP-1 mRNA均显着高于相同干预的WKY大鼠(P<0.01)。3、SHR和WKY大鼠之间以及对照组、AngⅡ刺激组、AngⅡ+缬沙坦组和AngⅡ+PD98059组间VSMCs中t-ERK水平均无显着性差异。结论：AngⅡ可能主要通过其1型(AT1)受体激活SHR和WKY大鼠VSMCs中ERK途径,增加ERK活性和p-ERK蛋白水平,继而引起MKP-1及MKP-1 mRNA水平升高。
田晓鹏[4]2008年在《卡维地洛预防胆汁淤积性大鼠肝纤维化作用的研究》文中指出肝纤维化(hepatic fibrosis)是各种不同致病因子引起慢性肝病进而发展为肝硬化的共有病理改变。肝星状细胞(hepatic stellate cells, HSC)是肝脏主要的纤维生成细胞,在肝纤维化过程中扮演重要角色。交感神经系统(sympathetic nervous system, SNS)是肝内神经的重要组成部分,参与肝脏功能、新陈代谢等方面的调控。近来越来越多的研究显示,交感神经系统可以通过对HSC增殖和凋亡等细胞行为的调节,影响肝脏纤维化的发生和发展。卡维地洛是新一代具有血管扩张作用的非选择性β受体阻滞剂,兼有α1拮抗作用,其在心肌梗死和慢性心力衰竭中的有益作用已为大规模临床试验所证实。研究发现卡维地洛可能是通过其交感神经受体阻滞作用直接抑制成纤维细胞的增殖,进而阻止细胞外间质(extracellular matrix, ECM)的合成,以达到减轻心脏间质重塑、预防心力衰竭发生发展的作用。但是,在肝纤维化形成过程中,通过阻断SNS的经典神经递质去甲肾上腺素(norepinephrine, NE)与其特定肾上腺素能受体相结合,进而影响肝纤维化的发生发展的相关研究,目前国内外均少有报道。目的:观察卡维地洛对胆汁淤积性大鼠纤维化肝组织中HSC活化增殖、凋亡以及胶原代谢的影响,探讨卡维地洛预防肝纤维化发生发展的可能作用。方法:采用胆总管结扎法建立胆汁淤积性大鼠肝纤维化模型,并给予肾上腺素能受体阻滞剂卡维地洛作为药物干预,通过HE、Masson染色等了解肝纤维化程度,羟脯氨酸测定法明确肝脏胶原合成能力,免疫组织化学、TUNEL方法测定HSC活化增殖及凋亡情况,Western Blot、Real time Q-PCR检测MMP-13以及TIMP-1表达在肝纤维化发展过程中的动态变化。结果:1术后大鼠一般情况观察大鼠胆总管结扎后1 h～2 h恢复活动,48 h左右尿液变黄,3～4天后皮肤毛发开始转黄,精神逐渐变差,进食量少于对照组,体重增加不明显或稍有下降。8～9天后逐渐出现嗜睡,反应迟钝,活动减少,黄疸明显,鼠粪呈灰白色。20天后进食量明显减少,体重与对照组相比明显降低,并且部分大鼠逐渐出现腹部隆起。2胆汁淤积性大鼠肝纤维化模型成功建立模型大鼠肝脏肉眼观呈褐绿色或棕色,表面略呈细颗粒状,质地变硬,造模4 wk组共3只大鼠有腹水产生。HE及Masson叁色染色显示,假手术对照组肝小叶结构完整,肝板排列整齐,肝细胞无肿胀,无胆管增生,无淤胆及淋巴细胞浸润,核仁清晰,少量结缔组织局限于门管区。造模2 wk后,模型组肝板正常排列消失,小叶结构紊乱,门管区小胆管广泛增生,并向小叶内延伸、肝小叶呈花环状;新生小胆管周围纤维组织增生,门管区面积扩大,肝小叶内亦有纤维组织增生。造模4 wk后,模型组肝脏广泛纤维结缔组织增生,增生的纤维间隔互相连接、包绕、分割,改建原来的肝小叶甚至形成假小叶。3卡维地洛对肝脏病理组织学的影响HE染色显示,造模2 wk后,卡维地洛各剂量组较模型组纤维组织及小胆管增生少,肝索迂曲较轻,肝小叶结构破坏较轻;造模4 wk后,卡维地洛各剂量组仍有肝小叶正常结构部分破坏,但小叶周边及汇管区纤维组织增生较轻,肝索紊乱较模型组轻,并可见肝细胞再生现象。Masson叁色染色显示,造模2 wk后,模型组和小、中、大剂量给药组胶原面积密度(16.56%±2.11%,16.17%±1.25%,14.19%±1.41%,12.87%±1.11%)均显着高于假手术对照组(3.4%±0.24%),P<0.01;小剂量给药组与模型组相比无明显差异,P>0.05;中、大剂量给药组与模型组相比有明显降低,分别P<0.05、P<0.01;中、大剂量给药组与小剂量组相比也有明显降低,分别P<0.05、P<0.01;中、大剂量给药组之间无明显差异,P>0.05。造模4 wk后,模型组和小、中、大剂量给药组胶原面积密度(34.35%±3.27%,31.02%±2.75%,28.64%±2.44%,24.18%±2.49%)均显着高于假手术对照组(3.46%±0.17%),P<0.01;小、中、大剂量给药组均与模型组相比也均有明显降低,分别P<0.05、P<0.01、P<0.01;大剂量给药组与小、中剂量组相比有明显降低,分别P<0.01、P<0.05;而小、中剂量给药组之间无明显差异,P>0.05。4卡维地洛对大鼠纤维化肝组织中HSC活化增殖和凋亡的影响4.1卡维地洛抑制HSC活化增殖α-SMA免疫组织化学染色显示:假手术对照组大鼠肝组织中仅在血管壁平滑肌细胞有弱阳性表达;随着肝纤维化的发展,大鼠肝脏中α-SMA阳性细胞明显增多,主要分布于汇管区、纤维间隔、肝窦周围及增生的胆管周围细胞。造模2 wk后,模型组和小、中、大剂量给药组肝组织α-SMA的阳性面积密度(23.77%±2.43%,21.96%±2.03%,19.95%±2.02%,18.77%±2.15%)均显着高于假手术对照组(5.69%±1.15%),P<0.01;中、大剂量给药组与模型组相比有明显降低,P<0.01;大剂量给药组与小剂量组相比也有明显降低,P<0.05;而小剂量给药组与模型组、小剂量与中剂量给药组以及中剂量与大剂量给药组之间无明显差异,P>0.05。造模4 wk后,模型组和小、中、大剂量给药组肝组织α-SMA的阳性面积密度(36.88%±2.83%,33.86%±2.23%,30.77%±2.17%,28.72%±1.74%)均显着高于假手术对照组(5.43%±1.03%),P<0.01;小、中、大剂量给药组与模型组相比有明显降低,分别P<0.05,P<0.01,P<0.01;中、大剂量给药组与小剂量组相比也有明显降低,分别P<0.05,P<0.01;而中剂量与大剂量给药组之间无明显差异,P>0.05。4.2卡维地洛促进活化的HSC凋亡α-SMA与TUNEL双重染色显示:造模2 wk后,假手术对照组未见凋亡的HSC。中、大剂量给药组大鼠HSC凋亡指数(6.45%±1.12% , 7.89%±1.06%)均显着高于模型组(4.95%±0.95%) ,分别P<0.05 , P<0.01 ;小剂量给药组(5.19%±1.09%)与模型组之间无明显差异,P>0.05;大剂量给药组与小、中剂量组相比均有明显升高,分别P<0.01,P<0.05;而小、中剂量给药组之间无明显差异,P>0.05。造模4 wk后,假手术对照组未见凋亡的HSC。中、大剂量给药组大鼠HSC凋亡指数(4.63%±1.06%,6.17%±1.27%)均显着高于模型组(2.35%±0.94%),分别P<0.05,P <0.01;小剂量给药组(3.12%±1.04%)与模型组之间无明显差异,P> 0.05;中、大剂量组给药组与小剂量组相比均有明显升高,分别P<0.05,P <0.01。大剂量组给药组与中剂量组相比也有明显升高,P<0.05。5卡维地洛对大鼠纤维化肝组织中胶原表达的影响5.1卡维地洛降低肝组织中羟脯氨酸含量造模2 wk后,模型组和小、中、大剂量给药组肝组织羟脯氨酸含量(0.363±0.027,0.338±0.028,0.315±0.034,0.279±0.031)μg·mg-1(肝组织湿重)均显着高于假手术对照组(0.163±0.007)μg·mg-1,P<0.01;中、大剂量给药组与模型组相比均有明显降低,分别P<0.05、P<0.01;小剂量给药组与模型组相比无明显差异,P>0.05;大剂量组给药组与小、中剂量组相比明显降低,分别P<0.01、P<0.05;而小、中剂量给药组之间相比无明显差异,P>0.05。造模4 wk后,模型组和小、中、大剂量给药组肝组织羟脯氨酸含量(0.778±0.052,0.719±0.024,0.654±0.048,0.605±0.034)μg·mg-1(肝组织湿重)均显着高于假手术对照组(0.164±0.006)μg·mg-1,P<0.01;小、中、大剂量给药组与模型组相比均有明显降低,分别P<0.05、P<0.01、P<0.01;中、大剂量给药组与小剂量组相比有明显降低,分别P<0.05、P<0.01;而大剂量给药组与中剂量相比也有明显降低,P<0.05。5.2卡维地洛抑制肝组织Ι型胶原mRNA的表达造模2 wk后,模型组和小、中、大剂量给药组肝组织Ι型胶原mRNA相对表达量(6.07±0.51,5.64±0.43,5.1±0.49,4.44±0.62)均显着高于假手术对照组(1.00±0.14),P<0.01;中、大剂量给药组与模型组相比有明显降低,P<0.01;小剂量给药组与模型组相比无明显差异,P>0.05;大剂量给药组与小、中剂量组相比均有明显降低,分别P<0.01,P<0.05;但小、中剂量给药组之间相比无明显差异,P>0.05。造模4 wk后,模型组和小、中、大剂量给药组肝组织Ι型胶原mRNA相对表达量(11.59±1.1,10.26±0.99,9.73±1.3,8.25±0.91)均显着高于假手术对照组(1.00±0.18),P<0.01;小、中、大剂量给药组与模型组相比均有明显降低,分别P<0.05,P<0.01,P<0.01;大剂量给药组与小、中剂量组相比均有明显降低,分别P<0.01,P<0.05;但小、中剂量给药组之间相比无明显差异,P>0.05。6卡维地洛对大鼠纤维化肝组织中TIMP-1和MMP-13蛋白表达的影响6.1卡维地洛促进肝组织中MMP-13蛋白表达Western Blot分析显示:造模2 wk后,模型组和小、中、大剂量给药组大鼠肝组织MMP-13蛋白相对表达量(1.1±0.11,1.27±0.11,1.30±0.13,1.43±0.1)均显着高于假手术对照组(0.72±0.09),P<0.01;小、中、大剂量给药组与模型组相比均有明显升高,分别P<0.05、P<0.05、P<0.01;大剂量给药组与小剂量组相比有明显升高,P<0.05,但与中剂量组相比无明显差异P>0.05;小、中剂量给药组之间相比无明显差异,P>0.05。造模4 wk后,模型组和小、中、大剂量给药组大鼠肝组织MMP-13蛋白相对表达量(1.73±0.14,1.85±0.15,2.05±0.20,2.28±0.13)均显着高于假手术对照组(0.75±0.06),P<0.01;中、大剂量给药组与模型组相比均有明显升高,P<0.01;小剂量给药组与模型组相比无明显差异,P>0.05;中、大剂量给药组与小剂量组相比均有明显升高,分别P<0.05、P<0.01;大剂量给药组与中剂量组相比也有有明显升高,P<0.05。6.2卡维地洛抑制肝组织中TIMP-1蛋白表达Western Blot分析显示:造模2 wk后,模型组和小、中、大剂量给药组大鼠肝组织TIMP-1蛋白相对表达量(1.51±0.18,1.4±0.15,1.22±0.15,1.12±0.16)均显着高于假手术对照组(0.5±0.08),P<0.01;中、大剂量给药组与模型组相比均有明显降低,P<0.01;小剂量给药组与模型组相比无明显差异,P>0.05;大剂量给药组与小剂量组相比有明显降低,P<0.01,但与中剂量组相比无明显差异,P>0.05;小、中剂量给药组之间相比无明显差异,P>0.05。造模4 wk后,模型组和小、中、大剂量给药组大鼠肝组织TIMP-1蛋白相对表达量(2.53±0.21,2.33±0.16,2.15±0.19,1.94±0.13)均显着高于假手术对照组(0.55±0.05),P<0.01;中、大剂量给药组与模型组相比均有明显降低,P<0.01;小剂量给药组与模型组相比无明显差异,P>0.05;大剂量给药组与中、小剂量组相比均有明显降低,分别P<0.05、P<0.01;小、中剂量组之间相比无明显差异,P>0.05。6.3卡维地洛在蛋白水平上恢复肝组织中TIMP-1与MMP-13的动态平衡造模2 wk后,模型组和小、中、大剂量给药组大鼠肝组织MMP-13/TIMP-1的比值(0.74±0.08,0.91±0.10,1.07±0.18,1.29±0.11)均显着低于假手术对照组(1.42±0.06),分别P <0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.05。中、大剂量给药组与模型组相比均有明显升高,P<0.01;小剂量给药组与模型组相比无明显差异,P>0.05;大剂量给药组与小、中剂量组相比均有明显升高,P<0.01;小、中剂量给药组之间相比无明显差异,P>0.05。造模4 wk后,模型组和小、中、大剂量给药组大鼠肝组织MMP-13/TIMP-1的比值(0.69±0.09,0.79±0.10,0.95±0.05,1.18±0.08)均显着低于假手术对照组(1.37±0.10),P <0.01。中、大剂量给药组与模型组相比均有明显升高,P<0.01;小剂量给药组与模型组相比无明显差异,P>0.05;中、大剂量给药组与小剂量组相比均有明显升高,分别P<0.05,P<0.01;大剂量给药组与中剂量组相比也有有明显升高,P<0.01。7卡维地洛对大鼠纤维化肝组织中TIMP-1和MMP-13 mRNA表达的影响7.1卡维地洛促进肝组织中MMP-13 mRNA表达造模2 wk后,模型组和小、中、大剂量给药组大鼠肝组织MMP-13 mRNA相对表达量(4.89±0.54 , 5.19±0.46 ,5.6±0.64,6.05±0.68)均显着高于假手术对照组(1.38±0.22),P<0.01;中、大剂量给药组与模型组相比均有明显升高,分别P<0.05,P<0.01;小剂量给药组与模型组相比无明显差异,P>0.05;大剂量给药组与小剂量组相比有明显升高,P<0.05,但与中剂量组相比无明显差异,P>0.05;中剂量给药组与小剂量组相比无明显差异,P>0.05。造模4 wk后,模型组和小、中、大剂量给药组大鼠肝组织MMP-13 mRNA相对表达量(6.25±0.63 , 7.27±0.89 ,7.91±0.98,8.92±0.83)均显着高于假手术对照组(1.4±0.15),P<0.01;小、中、大剂量给药组与模型组相比均有明显升高,分别P<0.05,P<0.01,P<0.01;大剂量给药组与小、中剂量组相比均有明显升高,分别P<0.01,P<0.05;中剂量给药组与小剂量组相比无明显差异,P>0.05。7.2卡维地洛抑制肝组织中TIMP-1 mRNA表达造模2 wk后,模型组和小、中、大剂量给药组大鼠肝组织TIMP-1 mRNA相对表达量(7.56±0.98 , 6.72±0.97 ,5.85±0.79,5.13±0.97)均显着高于假手术对照组(1.00±0.17),P<0.01;中、大剂量给药组与模型组相比均有明显降低,P<0.01;小剂量给药组与模型组相比无明显差异,P>0.05;大剂量给药组与小剂量组相比有明显降低,P<0.01,但与中剂量组之间相比无明显差异,P>0.05;中、小剂量组之间相比无明显差异,P>0.05。造模4 wk后,模型组和小、中、大剂量给药组大鼠肝组织TIMP-1 mRNA相对表达量(11.72±1.03,10.34±1.08,9.39±1.13,8.11±1.06)均显着高于假手术对照组(1.00±0.21),P<0.01;小、中、大剂量给药组与模型组相比均有明显降低,分别P<0.05,P<0.01,P<0.01;大剂量给药组与小、中剂量组相比均有明显降低,分别P<0.01,P<0.05;但中、小剂量组之间相比无明显差异,P>0.05。7.3卡维地洛在基因水平上恢复肝组织中TIMP-1与MMP-13的动态平衡造模2 wk后,模型组和小、中、大剂量给药组大鼠肝组织MMP-13/TIMP-1基因表达的比值(0.66±0.16,0.78±0.09,0.96±0.09,1.19±0.12)均显着低于假手术对照组(1.37±0.17),分别P <0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.05;中、大剂量给药组与模型组相比均有明显升高,均为P<0.01;小剂量给药组与模型组相比无明显差异,P>0.05;中、大剂量给药组与小剂量组相比均有明显升高,分别P<0.05,P<0.01;大剂量给药组与中剂量组相比也有明显升高,P<0.05。造模4 wk后,模型组和小、中、大剂量给药组大鼠肝组织MMP-13/TIMP-1基因表达的比值(0.54±0.09,0.71±0.12,0.83±0.13,1.07±0.1)均显着低于假手术对照组(1.39±0.19),P<0.01。中、大剂量给药组与模型组相比均有明显升高,均为P<0.01;小剂量给药组与模型组相比无明显差异,P>0.05;大剂量给药组与小、中剂量组相比也均有明显升高,P<0.01;中、小剂量组之间相比无明显差异,P>0.05。结论:1卡维地洛可以抑制在体HSC活化增殖,促进活化的HSC凋亡。2卡维地洛可以抑制大鼠纤维化肝组织中TIMP-1的表达,促进MMP-13的表达,从而恢复TIMP-1与MMP-13的动态平衡,进一步降解肝脏胶原。3卡维地洛可以抑制实验性大鼠肝纤维化的进展,并且在一定程度上随着剂量增大效果更强。
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