酶法糖基化修饰对酪蛋白体外消化能力的影响

酶法糖基化修饰对酪蛋白体外消化能力的影响

论文摘要

利用转谷氨酰胺酶(transglutaminase,TGase)催化制备壳寡糖(1 kDa)糖基化酪蛋白;十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰氨凝胶电泳和反相-高效液相色谱证实糖基化修饰反应的发生;体外消化实验(胃蛋白酶+胰蛋白酶)分析糖基化修饰反应对酪蛋白消化性的影响。结果表明:TGase成功催化壳寡糖连接到酪蛋白分子上,所制备的糖基化酪蛋白中氨基葡萄糖的导入量为6.86 g/kg;糖基化酪蛋白经体外模拟消化后,其水解度和三氯乙酸可溶性氮均低于酪蛋白对照物,糖基化酪蛋白消化物中出现了更多大分子质量的肽段,研究表明TGase途径糖基化修饰降低了酪蛋白的体外消化能力。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料与试剂
  •   1.2 仪器与设备
  •   1.3 方法
  •     1.3.1 TGase途径壳寡糖糖基化酪蛋白(糖基化酪蛋白)的制备
  •     1.3.2 糖基化酪蛋白的SDS-PAGE验证
  •     1.3.3 糖基化酪蛋白中氨基葡萄糖导入量的RP-HPLC检测
  •       1.3.3. 1 样品处理
  •       1.3.3. 2 色谱条件
  •       1.3.3. 3 氨基葡萄糖标准曲线的绘制
  •     1.3.4 蛋白质含量的测定
  •     1.3.5 必需氨基酸组成分析
  •     1.3.6 糖基化酪蛋白的体外消化及水解动力学模型
  •       1.3.6. 1 胃蛋白酶水解
  •       1.3.6. 2 胰蛋白酶水解
  •       1.3.6. 3 糖基化酪蛋白水解程度的测定
  •     1.3.7 水解动力学分析
  •       1.3.7. 1 初始底物质量浓度对水解反应的影响
  •       1.3.7. 2 初始酶质量浓度对水解反应的影响
  •     1.3.8 两类糖基化酪蛋白消化物中的肽分子质量分布分析
  •   1.4 数据处理
  • 2结果与分析
  •   2.1酪蛋白糖基化的SDS-PAGE验证
  •   2.2 氨基葡萄糖的导入量
  •     2.2.1 氨基葡萄糖的标准曲线
  •     2.2.2 TGase途径糖基化酪蛋白中氨基葡萄糖的导入量
  •   2.3 糖基化修饰反应对酪蛋白的体外消化性的影响
  •     2.3.1 胃蛋白酶水解
  •     2.3.2 胰蛋白酶进一步水解
  •   2.4 水解动力学模型的建立
  •     2.4.1 水解动力学模型建立
  •     2.4.2 水解动力学模型验证
  •   2.5 糖基化酪蛋白消化物的肽分子质量分布
  • 3 结论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 王小鹏,赵新淮

    关键词: 转谷氨酰胺酶,蛋白质糖基化,酪蛋白,体外模拟消化

    来源: 食品科学 2019年20期

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅰ辑

    专业: 轻工业手工业

    单位: 河南农业大学食品科学技术学院,东北农业大学乳品科学教育部重点实验室

    基金: 国家高技术研究发展计划(863计划)项目(2013AA102205)

    分类号: TS201.2

    页码: 47-53

    总页数: 7

    文件大小: 1583K

    下载量: 330

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