siRNA下调RYR1表达对小鼠成肌细胞中线粒体的影响

论文摘要

目的:探讨雷诺丁受体1（RYR1）表达下调对小鼠成肌细胞C2C12中线粒体的影响及其发生机制。方法:采用小干扰RNA（siRNA）敲减C2C12细胞的RYR1表达,应用透射电镜对线粒体进行体视学分析,观察细胞内线粒体数目和形态学的改变,应用real-time PCR和Western blot方法检测线粒体融合蛋白2（Mfn2）、过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α（PGC-1α）和细胞外信号调节激酶1/2（ERK1/2）的mRNA及蛋白水平的改变。结果:RYR1敲减（KD）组RYR1的mRNA水平显著降低（P<0.01）。阴性对照（NC）组及空白对照（BC）组线粒体维持长管状结构,而KD组线粒体呈碎片化改变。与NC组相比,KD组的线粒体数目呈增加趋势（差异无统计学显著性）,线粒体面积和周长显著减少（P<0.05）。KD组的Mfn2在mRNA和蛋白水平均显著降低（P<0.01）,而PGC-1α在mRNA水平显著降低（P<0.01）,在蛋白水平未见明显差异;ERK1/2在mRNA水平和蛋白水平的差异均无统计学显著性,也未检测到磷酸化ERK1/2的水平变化。结论:敲减RYR1表达可以导致C2C12细胞线粒体的形态改变,Mfn2表达下调可能参与其发生,而PGC-1α及ERK1/2相关的氧化应激通路可能在其中不发挥主要作用。

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文章来源

类型: 期刊论文

作者: 王天爽,张静,任雅丽,常杏芝

关键词: 雷诺丁受体,线粒体融合蛋白,细胞,信号通路

来源: 中国病理生理杂志 2019年12期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技

专业: 基础医学

单位: 北京大学第一医院儿科,北京大学第一医院电镜室

基金: 国家自然科学基金资助项目(No.81301068),北京大学第一医院科研基金资助项目(No.2016GG03)

分类号: R346

页码: 2255-2261

总页数: 7

文件大小: 1256K

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