脊髓灰质炎病毒Ⅰ型抗体胶体金检测试纸条的研制

脊髓灰质炎病毒Ⅰ型抗体胶体金检测试纸条的研制

论文摘要

目的:为研制快速检测脊髓灰质炎病毒Ⅰ型抗体的胶体金试纸条.方法:以辛酸-硫酸铵沉淀法纯化脊髓灰质炎病毒Ⅰ型单克隆抗体,用柠檬酸三钠还原法制备胶体金溶液,胶体金标记单抗,再结合脊灰病毒抗原形成复合物,固定于金标垫上,将鼠抗人IgG和羊抗鼠IgG分别包被于试纸条的T (检测线)处和C (质控线)处,应用该试纸条进行性能检测.结果:以已知的脊灰病毒Ⅰ型阳性血清作为检测样品,试纸条检测的灵敏度为1:80;特异性试验证明该试纸条与甲型肝炎病毒、乙型肝炎病毒、麻疹病毒抗体阳性血清没有交叉反应;检测结果与脊灰病毒Ⅰ型疫苗抗体检测试剂盒(ELISA)试验的符合率为86.7%.结论:该试纸条检测脊灰病毒Ⅰ型的抗体水平具有较好的特异性与灵敏性,适用于大规模临床血清抗体水平检测,具有良好的应用前景.

论文目录

  • 1 材料和方法
  •   1.1 试剂和仪器
  •   1.2 细胞、病毒和动物
  •   1.3 杂交瘤细胞的培养与效价测定
  •   1.4 小鼠腹水的制备与纯化鉴定
  •   1.5 胶体金及胶体金标记物的制备与纯化
  •     1.5.1 胶体金的制备
  •     1.5.2 胶体金标记物的最适标记蛋白pH的确定
  •     1.5.3 单抗最适标记量的确定
  •     1.5.4 标记
  •   1.6 胶体金试纸条的制备
  •     1.6.1 金标垫的的制备
  •     1.6.2 NC膜的处理
  •     1.6.3 胶体金试纸条的组装
  •   1.7 灵敏度测试
  •   1.8 特异性
  •   1.9 试纸条的初步应用
  • 2 结果
  •   2.1 杂交瘤细胞的培养与效价测定
  •   2.2 单抗的制备与纯化
  •   2.3 胶体金的制备
  •   2.4 胶体金标记单抗的最适pH值
  •   2.5 胶体金标记单抗最适浓度
  •   2.6 胶体金标记的鉴定
  •   2.7 胶体金组装及结果判定
  •   2.8 试纸条灵敏度试验
  •   2.9 试纸条特异性试验
  •   2.10 胶体金试纸条初步应用
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 王朝元,黄圣,尹玉莹,莫娇,项雅丽,尹新涛

    关键词: 脊髓灰质炎病毒型,抗体检测,胶体金试纸条

    来源: 中南民族大学学报(自然科学版) 2019年04期

    年度: 2019

    分类: 基础科学,医药卫生科技

    专业: 基础医学

    单位: 中南民族大学生命科学学院

    基金: 中央高校基本科研业务费专项资金资助项目(CZP17010),中南民族大学横向科研资助项目(HZY17059)

    分类号: R392-33

    页码: 509-515

    总页数: 7

    文件大小: 1686K

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