多主枝孢论文_杨柳,付永锋,李雪萍,冯萌,程训佳

导读:本文包含了多主枝孢论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:主枝,赤霉病,蛋白,菌丝,变态反应,孢子,定量。

多主枝孢论文文献综述

杨柳,付永锋,李雪萍,冯萌,程训佳[1](2011)在《多主枝孢霉重组变应原Cla h8的制备及其免疫活性鉴定》一文中研究指出目的:通过基因工程手段,获得重组多主枝孢霉变应原蛋白Cla h8,有利于进行变应原的标准化,为标准化抗原的临床特异性诊断与治疗奠定基础。方法:从多主枝孢霉菌体中提取总RNA,采用RT-PCR的方法扩增Cla h8编码基因,将其连入pET-19b载体。转入大肠杆菌BL21 Star(DE3)pLysS,经诱导表达后,进行提纯复性,用Western blot和Dot-blot检测其免疫活性。结果:重组多主枝孢霉变应原Cla h8蛋白可以与多主枝孢霉过敏患者的血清中IgE和IgG抗体特异性结合,与天然蛋白具有相似的免疫活性。结论:制备并获得了具有生物学活性的可溶性重组多主枝孢霉变应原Cla h8蛋白,可用于多主枝孢霉变应原的标准化,克服天然提取物的非单一性及标准化难的障碍。(本文来源于《中国免疫学杂志》期刊2011年05期)

杨柳[2](2011)在《多主枝孢霉重组蛋白Cla h8的制备和定量检测》一文中研究指出多主枝孢霉(Cladosporium herbarum)是引起过敏性疾病的主要霉菌之一,它不仅是一种主要的室内过敏原,也是夏秋两季主要的室外过敏原,可导致患者出现严重的过敏性哮喘。现已证实,Cla h8是多主枝孢霉的最主要致敏原,它是一种NADP依赖性甘露醇脱氢酶(NADP-dependent MtDH)蛋白,可被57%左右多主枝孢霉过敏患者血清中的IgE抗体特异性识别;临床皮肤点刺实验结果表明Cla h8可以引起患者出现皮肤红肿。为此本研究旨在制备出高纯度的重组蛋白并对其进行免疫鉴定及定量检测,从而为真菌过敏患者提供更准确的诊断及更有效、安全的免疫治疗手段。本研究通过基因工程手段,从多主枝孢霉菌体中提取总RNA,采用RT-PCR的方法扩增Cla h8编码基因,将其连入pET-19b载体。转入大肠杆菌BL21 Star (DE3)pLysS,由于目的蛋白在大肠杆菌BL21 Star (DE3) pLysS中高效表达,蛋白聚积形成不溶性的包涵体蛋白,为此对其进行复性重构,最终纯化制备出的Cla h8蛋白纯度可达98%以上,用Western blotting和Dot-blotting法检测结果表明重组多主枝孢霉变应原Cla h8蛋白可以与多主枝孢霉过敏患者的血清中IgE和IgG抗体特异性结合,与天然蛋白具有相似的免疫活性。据此制备抗Cla h8单克隆抗体(Cla h8 mAb), Western blot筛选出阳性克隆2株即3G10和1F3,并对其纯化、亚型鉴定和标记后行抗体配对实验;通过棋盘滴定法确定包被抗体和酶标抗体的最适工作浓度,初步建立了双单克隆抗体夹心ELISA法检测多主枝孢霉变应原Cla h8含量,此法重复性好,灵敏度高,操作简便。上述多主枝孢霉重组变应原Cla h8的制备和双单克隆抗体夹心ELISA定量检测多主枝孢霉方法的建立,为实现真菌变应原的标准化、特异性诊断与免疫治疗奠定了基础。(本文来源于《复旦大学》期刊2011-04-01)

翟凤艳,高扬帆,吕文彦,刘英杰,宋明月[3](2011)在《多主枝孢粗毒素提取及抑菌活性研究》一文中研究指出采用生长速率法和孢子萌发法研究多主枝孢毒素粗提物TIC和TOC对小麦赤霉病菌、番茄早疫病菌菌丝生长和孢子萌发的抑制作用。结果表明,TIC和TOC对两种供试病菌菌丝生长和孢子萌发都有一定的抑制作用,且对菌丝生长抑制作用的强度与毒素浓度呈正相关。TOC对番茄早疫病菌菌丝生长的抑制作用强于对小麦赤霉病菌的抑制作用,而TIC在较高浓度下对番茄早疫病菌菌丝生长的抑制作用较强。TIC和TOC对番茄早疫病菌孢子萌发的抑制作用均强于小麦赤霉病菌。(本文来源于《资源开发与市场》期刊2011年01期)

杨柳,冯萌,付永锋,程训佳[4](2010)在《多主枝孢霉重组变应原Cla h8的制备及其免疫活性鉴定》一文中研究指出背景多主枝孢霉(Cladosporium herbarum)是引起过敏性疾病的主要霉菌之一,它不仅是一种主要的室内过敏原,也是夏秋两季的主要室外过敏原,可导致患者出现严重的过敏性哮喘。多主枝孢霉含有多种变应原蛋白,现已被成功分离出的变应原有8种。其中,Clah8是一种NADP依赖性甘露醇脱氢酶(NADP-dependent(本文来源于《中华医学会2010年全国变态反应学术会议暨中欧变态反应高峰论坛参会指南/论文汇编》期刊2010-12-03)

多主枝孢论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

多主枝孢霉(Cladosporium herbarum)是引起过敏性疾病的主要霉菌之一,它不仅是一种主要的室内过敏原,也是夏秋两季主要的室外过敏原,可导致患者出现严重的过敏性哮喘。现已证实,Cla h8是多主枝孢霉的最主要致敏原,它是一种NADP依赖性甘露醇脱氢酶(NADP-dependent MtDH)蛋白,可被57%左右多主枝孢霉过敏患者血清中的IgE抗体特异性识别;临床皮肤点刺实验结果表明Cla h8可以引起患者出现皮肤红肿。为此本研究旨在制备出高纯度的重组蛋白并对其进行免疫鉴定及定量检测,从而为真菌过敏患者提供更准确的诊断及更有效、安全的免疫治疗手段。本研究通过基因工程手段,从多主枝孢霉菌体中提取总RNA,采用RT-PCR的方法扩增Cla h8编码基因,将其连入pET-19b载体。转入大肠杆菌BL21 Star (DE3)pLysS,由于目的蛋白在大肠杆菌BL21 Star (DE3) pLysS中高效表达,蛋白聚积形成不溶性的包涵体蛋白,为此对其进行复性重构,最终纯化制备出的Cla h8蛋白纯度可达98%以上,用Western blotting和Dot-blotting法检测结果表明重组多主枝孢霉变应原Cla h8蛋白可以与多主枝孢霉过敏患者的血清中IgE和IgG抗体特异性结合,与天然蛋白具有相似的免疫活性。据此制备抗Cla h8单克隆抗体(Cla h8 mAb), Western blot筛选出阳性克隆2株即3G10和1F3,并对其纯化、亚型鉴定和标记后行抗体配对实验;通过棋盘滴定法确定包被抗体和酶标抗体的最适工作浓度,初步建立了双单克隆抗体夹心ELISA法检测多主枝孢霉变应原Cla h8含量,此法重复性好,灵敏度高,操作简便。上述多主枝孢霉重组变应原Cla h8的制备和双单克隆抗体夹心ELISA定量检测多主枝孢霉方法的建立,为实现真菌变应原的标准化、特异性诊断与免疫治疗奠定了基础。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

多主枝孢论文参考文献

[1].杨柳,付永锋,李雪萍,冯萌,程训佳.多主枝孢霉重组变应原Clah8的制备及其免疫活性鉴定[J].中国免疫学杂志.2011

[2].杨柳.多主枝孢霉重组蛋白Clah8的制备和定量检测[D].复旦大学.2011

[3].翟凤艳,高扬帆,吕文彦,刘英杰,宋明月.多主枝孢粗毒素提取及抑菌活性研究[J].资源开发与市场.2011

[4].杨柳,冯萌,付永锋,程训佳.多主枝孢霉重组变应原Clah8的制备及其免疫活性鉴定[C].中华医学会2010年全国变态反应学术会议暨中欧变态反应高峰论坛参会指南/论文汇编.2010

论文知识图

单克隆抗体与多主枝孢霉变应原...多主枝孢的分生孢子梗和分生孢子...目的蛋白Cla h8的Dot blot鉴定多主枝孢的分生孢子和分生孢子梗...cla h8基因RT-PCR产物琼脂糖凝胶电泳...重组表达载体pET19b-Cla h8的双酶切鉴...

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