导读:本文包含了视黄醇脱氢酶论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:脱氢酶,选择性,基因,辅酶,磷脂,转录,内膜。
视黄醇脱氢酶论文文献综述
Ma,YL,孙永康,谢智钦,颜学波[1](2019)在《HSD17B13是一种与非酒精性脂肪性肝病组织学特征相关的肝视黄醇脱氢酶》一文中研究指出【据《Hepatology》2018年11月报道】题:HSD17B13是一种与非酒精性脂肪性肝病组织学特征相关的肝视黄醇脱氢酶(作者Ma YL等)非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是慢性肝病的一种常见原因。一种单核苷酸多态性(SNP) rs6834314与一般人群中的血清肝酶相关,可能反映了肝脏脂肪样变或损伤程度。笔者团队研究了rs6834314及其最近的基因HSD17B13(17-β羟基类固醇脱氢酶13),以鉴定其与NAFLD组织学特征的关联,并表征HSD17B13在NAFLD发病机制中的作(本文来源于《临床肝胆病杂志》期刊2019年01期)
李娇,李娟,梁见楠,杨晓红,侯瑞霞[2](2018)在《银屑病患者皮损间充质干细胞磷脂酶C-β4和视黄醇脱氢酶10表达水平的研究》一文中研究指出目的:通过研究银屑病患者皮损处真皮间充质干细胞(DMSCs)中磷脂酶C-β4(PLCB4)和视黄醇脱氢酶(RDH)10mRNA的表达水平,进一步探讨银屑病发病的细胞及分子机制。方法:对24例寻常性银屑病(PV)患者和22例正常人皮肤DMSCs进行分离培养,流式细胞术进行细胞表型鉴定,实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)测定PLCB4和RDH10 mRNA表达水平。结果:PV组与正常对照组DMSCs形态无差异。PV组患者DMSCs中PLCB4 m RNA的表达水平是正常对照组的3.35倍,RDH10 mRNA的表达水平是正常对照组的1.17倍。结论:银屑病患者DMSCs中PLCB4和RDH10 m RNA表达均增高,可能影响相关信号通路,进而对银屑病发病产生影响。(本文来源于《临床皮肤科杂志》期刊2018年11期)
李艳敏,张昌军,董毅飞,邓锴,彭海英[3](2015)在《全反式视黄醛影响内异症内膜基质细胞迁移及视黄醇脱氢酶10 mRNA表达》一文中研究指出目的:探讨全反式视黄醛(at-Ral)对体外培养人子宫内膜异位症(EMT)在位内膜基质细胞迁移和视黄醇脱氢酶(RDH)10mRNA表达的影响。方法:体外分离培养EMT患者在位子宫内膜基质细胞(EMT-ESC)及正常人子宫内膜基质细胞(N-ESC),采用细胞划痕运动分析及real time PCR方法分别观察不同浓度at-Ral对细胞迁移及RDH10mRNA表达情况。结果:N-ESC的迁移距离及RDH10的表达随at-Ral浓度的升高而减少,1,10μmol/L组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),而EMT-ESC的迁移距离及RDH10的表达随at-Ral浓度的升高而增加,1,10μmol/L组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:at-Ral对内异症患者在位子宫内膜基质细胞的迁移及RDH 10mRNA表达有促进作用。(本文来源于《武汉大学学报(医学版)》期刊2015年04期)
韩伟,沈晔,王竞,Sheaping,Yip,Maurice,K.H.Yap[4](2006)在《全反式视黄醇脱氢酶基因单核苷酸多态性连锁不平衡图谱的建立》一文中研究指出目的建立全反式视黄醇脱氢酶基因单核苷酸多态性连锁不平衡图谱。方法采用变性高效液相色谱分析技术(DHPLC),在4个汉族人DNA样品池(每个由5个样本组成)中筛查SNP,并在150个汉族人样本中测定基因频率。采用Haploview和EH软件对筛查到的常见SNP进行LD和单倍型分析。结果共筛查到15个SNP,其中10个为新发现SNP,7个为常见SNP,等位基因频率> 0.05。在3′端的4个SNP存在显着的LD(|D′|>0.75且|D′|的置信区间估计提示强LD,r2>0.33, P<0.031),组成一个明显的单倍型区块;5′端3个SNP间的LD则不明确。结论RDH8基因区域的LD分析结果提示,在进行有关RDH8基因的关联分析时,3′端需要一个代表性SNP位点即可(RDH8ESa也许最为合适),而在5′端则至少需要2个SNP(如RDH851)。(本文来源于《中华眼科杂志》期刊2006年07期)
李一凡,刘戈飞,宋旭红,杜昆,黄东阳[5](2005)在《一种人神经母细胞瘤辅酶II-依赖性视黄醇脱氢酶cDNA的克隆及特征分析》一文中研究指出背景与目的:检测神经母细胞瘤中新的辅酶II_依赖性视黄醇脱氢/还原酶[NADP(H)_dependen tretinold ehydrogenase/reductase,NRDR]选择性剪接亚型。材料与方法:我们用NRDR特异引物,从人神经母细胞瘤细胞系SK_N_SH和SK_SY_5YcDNA中分别经PCR扩增出635bp和429bpDNA片段,测序证实635bp片段是NRDR,而429bp片段是选择性剪接新亚型。再用快速cDNA末端扩增(Rapidamplification of cDN Aends,RACE)方法得到429bp片段cDNA全长序列。用绿色荧光蛋白与新亚型的融合蛋白做亚细胞定位。结果:得到新亚型全长并命名为humanNRDRA2(hum NRDRA2)(AY616182)。已知NRDR有8个外显子,而新亚型hum NRDRA2由选择性剪接造成了第4和第6外显子丢失,从第5外显子开始读码框架前移1bp,导致随后的编码区框码漂移(frameshift),同时蛋白翻译终止信号提前出现,产生仅有188个氨基酸的蛋白,其中第137氨基酸以后的序列相对于NRDR完全发生改变,同时C_末端的过氧化物酶体定位信号_SRL丢失,却在160~176氨基酸处出现了一个细胞核定位信号。我们在ESTs库中未找到与其相同的剪接形式,提示它可能是神经母细胞瘤特有的一种NRDR剪接亚型。用GFP_NRDRA2融合蛋白做该蛋白的亚细胞定位,发现发绿色荧光的细胞均已悬浮,但悬浮状态不佳,而作为对照的NRDR另一亚型则能定位成功,提示NRDRA2蛋白可能具有一定的细胞毒性。结论:人神经母细胞瘤NRDRA2选择性剪接亚型羧基端框移突变并有核定位序列;该蛋白可能是一种细胞毒性蛋白。(本文来源于《癌变.畸变.突变》期刊2005年06期)
王桂玲,黄东阳[6](2005)在《参与维甲酸合成代谢的视黄醇脱氢酶基因克隆和表达分析》一文中研究指出自然产生的视黄酸类对于体内的各种生理过程起着重要的作用。如胚胎发育、繁殖、免疫系统及视觉的维持等,特别是全反式维甲酸对于一些肿瘤有良好防癌、抗癌的作用。现有关维甲酸的研究多限于它的功能及作用机制方面。对于其体内的合成过程报道不多。NADP(H)-依赖的视黄醇脱氢酶(NADP-dependent retinol dehydrogenase/reductase,NRDR),是参与维甲酸合成的一种酶,在整个维甲酸合成的限速步骤中起作用。具有很高的视黄醇氧化活性与底物特异性,且广泛分布与各种哺乳动物的肝脏中。根据GenBank已发表NADP(H)-依赖的视黄醇脱氢酶基因(NRDR)cDNA的序列,设计并合成特异引物,利用cDNA末端快速扩增(RACE)方法和RT-PCR,得到牛肝内的NRDR cDNA的全长序列。经测序证实,牛肝NRDR的全长cDNA序列为1266bp,其开放读码框架在24-806bp,编码 260个氨基酸(GenBank收录号:AF487454)。根据NRDR的基因推导出的氨基酸序列与人、鼠、兔显示有高度同源性,并含有SDR超家族成员的两个高度保守的模序,在其C-端含有过氧化物酶体的靶向序列为SHL。结果表明,牛的NRDR是属于过氧化物酶体内SDR超家族成员并在维甲酸合成的限速步骤起作用的酶。为维甲酸合成的传统通路提供一个补充。这也是哺乳动物过氧化物酶体内的参与维甲酸合成代谢酶的首次报道。为今后更进一步研究此酶的功能及维甲酸的合成奠定基础。(本文来源于《中国细胞生物学学会2005年学术大会、青年学术研讨会论文摘要集》期刊2005-10-01)
李一凡[7](2005)在《人神经母细胞瘤辅酶Ⅱ依赖性视黄醇脱氢酶选择性剪接亚型的研究》一文中研究指出目的 全反式维甲酸是具有重要生理功能的激素类样物质,体内生理浓度很低。维甲酸是由维生素A(Vitamin A)也称视黄醇(Retinol)经两步代谢而成,中间产物为视黄醛。辅酶Ⅱ依赖性视黄醇脱氢酶/视黄醛还原酶(NADP(H)-deperldent retinol dehvdrogerlases/reductases,NRDR)是黄东阳教授1997年最先从兔肝中发现并纯化鉴定的重要的维生素A 代谢酶(Huang and Ichikawa,1997),是短链脱氢酶家族的一个重要成员,广泛表达于哺乳动物的各种组织中。人与一些主要哺乳动物的NRDR cDNA都已相继被克隆。最近作者所在课题组从人肝克隆了一种选择性剪接亚型NRDRiso(AY071856)(Du et al,2004),提示选择性剪接可能在NRDR基因的功能调节中发挥重要作用,同时提示不应该排除该基因有其他选择性剪接形式的存在可能性。 神经母细胞瘤(neuroblastoma)是最常见的小儿恶性实体性肿瘤之一,源于胚胎期神经脊的交感肾上腺系统。维甲酸能在体外诱导人神经母细胞瘤细胞株分化引起轴索形成和轴突生长。外源性维甲酸能够诱导神经母细胞瘤细胞株向正常细胞分化使我们有理由探讨细胞中内源性(生理性)维甲酸产生障碍的可能性。最近已有数据显示,异常的选择性剪接与肿瘤发生发展相关。如果神经母细胞瘤内NRDR2选择性剪接异常导致异常蛋白的产生,可以使正常的NRDR减少从而阻碍内源性维甲酸的生理合成。因此研究神经母细胞瘤NRDR选择性剪接异常可能有助于我们了解神经母细胞瘤发生发展的机制。方法 我们用PCR、RACE的方法从人神经母细胞瘤SK-N-SH克隆了23个新的NRDR选择性剪接亚型,对其中humNRDRA2进行了绿色荧光蛋白亚细胞定位。对23个新的NRDR选择性剪接亚进行生物信息学分析.同时分析了NRDR的基因结构. 结果 人NRDR基因有叁个拷贝,分别为DHRS4,DHRS4L2与DHRS4X.其中前二者相似性为97.5%,属于片段复制(Segmental Duplication)(90%-98%;≥1 kb).叁拷贝间有插入片断分别命(本文来源于《汕头大学》期刊2005-06-04)
杜晶,黄东阳,刘戈飞,王桂玲,徐晓琳[8](2004)在《一种人肝辅酶Ⅱ依赖性视黄醇脱氢酶剪接体cDNA的克隆及特征分析(英文)》一文中研究指出在用RT PCR法局部扩增人与小鼠肝脏 6 35bp的NRDRDNA时 ,在人肝中发现了另一短序列PCR产物 ,克隆后测序显示其整个序列与NRDRcDNA编码区的前后序列完全一致。采用 3′ Race和 5′ Race方法 ,从人肝组织细胞中扩增得到两个全长cDNA ,除 12 6 1bp的NRDRcDNA外 ,另一个为全长 10 0 3bp、编码区长为 5 2 5bp的NRDRiso(GenBank登录号 :AY0 7185 6 )。数据库分析表明 ,NRDRiso编码区是由人NRDR 8个外显子中的第 1、2、3、7、8外显子选择性剪接而成。缺失的NRDR第 4、5、6外显子共 2 5 8bp ,编码 86个氨基酸。因此 ,与人NRDR的 2 6 0个氨基酸残基相比 ,NRDRiso由 174个氨基酸残基组成 ,分子量为 18 6kDa ,并且NRDRiso的组织表达与NRDR明显不同。(本文来源于《遗传学报》期刊2004年07期)
王桂玲,黄东阳[9](2004)在《一种新的短链脱氢/还原酶家族新成员:NADP(H)-依赖的视黄醇脱氢酶基因的克隆和分析》一文中研究指出从牛的肝脏中快速抽提总RNA ,根据GenBank已发表NADP(H) 依赖的视黄醇脱氢酶基因 (NRDR)的cDNA序列 ,设计并合成特异引物 ,利用cDNA末端快速扩增 (RACE)方法和反转录 聚合酶链式反应 (RT PCR) ,得到牛肝内的NRDRcDNA的全长序列。经测序证实 ,牛肝NRDR的全长cDNA序列为 12 6 6bp ,其开放读码框架在 2 4~ 80 6bp ,编码 2 6 0个氨基酸 (GenBank登录号 :AF4 874 5 4 )。根据NRDR基因推导出的氨基酸序列与人、鼠、兔有高度同源性 ,并含有SDR超家族成员的两个高度保守的模序 ,在其C 端含有过氧化物酶体的靶向序列为SHL。结果表明 ,牛的NRDR应属于过氧化物酶体内SDR超家族成员并在维甲酸合成的限速步骤起作用的酶 ,也为维甲酸合成的传统通路提供一个补充。(本文来源于《遗传学报》期刊2004年04期)
刘戈飞[10](2004)在《人肝脏辅酶Ⅱ依赖性视黄醇脱氢酶及其剪切体的基因克隆与功能分析》一文中研究指出目的 辅酶Ⅱ依赖性视黄醇脱氢/还原酶(NADP-dependent retinol dehydrogenase/reductase,NRDR)是黄东阳等于1997年在兔肝细胞中发现并纯化的一种新的催化视黄醇氧化/还原反应的脱氢酶,其参与维甲酸在体内的第一步代谢反应。NRDR对视黄醇有很高的底物特异性与亲和性,酶活性也远大于迄今所报道的乙醇脱氢酶(alcohol dehydrogenase,ADH)与细胞微粒体短链脱氢/还原酶(short-chain dehydrogenase/reductase,SDR)类,其活性在其它哺乳动物肝中也普遍存在,但以兔肝脏为最高。兔与小鼠的NRDR cDNA相近,全长约为1200bp,人的NRDR cDNA全长约为1300bp,叁者编码区均为783bp,均编码260个氨基酸,已相继被克隆登录[AB045133][BC003484][AB04513 1],但人肝脏NRDR尚未在蛋白水平鉴定活性。本研究通过克隆人肝组织中NRDR及其剪接体(sNRDR)全长cDNA,分析其核苷酸序列与氨基酸序列的结构特征,并进行蛋白表达,探讨NRDR及其剪接体(sNRDR)的生物学活性及催化反应特性,为研究肝脏中维甲酸代谢提供理论依据。 方法 1.NRDR cDNA克隆 提取人肝脏总RNA并进行纯度鉴定,逆转录合成肝脏cDNA,根据人、小鼠NRDR编码区的一致性序列,设计一对引物,使用Ominiscript Reverse Transcription Kit,分别扩增人与小鼠肝脏cDNA片段。回收扩增出的PCR片段进行PCR片段亚克隆,进行DNA序列分析。RACE法从人肝脏中扩增全长cDNA。采用TaKaRa公司3' RACE试剂盒。首先,以试剂盒提供的Oligo dT-3sites Adaptor primer为引物进行逆转录;然后,根据测序结果设计F引物,R为试剂盒提供的3sites Adaptor primer,PCR扩增得到的产物克隆测序。采用TaKaRa公司5' RACE试剂盒。首先,根据测序结果设计5'磷酸化RT引物进行逆转录;然后降解杂交RNA;接着进行连接反应,使cDNA环化或形成串联体;最后进行PCR反应,采用巢式PCR,设计两对引物,以此获得了5’末端片段,克隆后测序。采用NCBI Blast,Jell声sh,扬site等软件对获得的序列进行生物信息学分析,通过Geno3D蛋白质模建服务器进行叁维结构模拟,得到的结果使用IMclite软件进行分析。应用RT一PCR和Northem的方法分别研究NRDR和sNRDR在胎儿和成人正常组织中的分布。 2.应用E.。011表达系统对NRDR进行表达 使用Gateway表达系统应用BUI一AI菌对获得的CDNA片段编码区进行表达。首先使用attB重组位点修饰编码区引物。然后将attB重组位点修饰的编码区与供体质粒pDONR201进行BP重组反应,构建带有NRDR编码区的Gateway系统入门载体(En仰clone)。扩增菌体,纯化质粒,将人门载体与E. coli表达载体进行LR重组反应。将NRDR编码区构建到pD-EST17载体中,以表达出氨基端6 x His一tag融合蛋白。将带有NRDR编码区的pDEsT17质粒转化Bul一AI菌,确定表达克隆,确定蛋白表达形式,确定蛋白表达时间,进行蛋白大量表达。分离表达出的包涵体,盐酸肌溶解变性,通过复性基质筛选确定最佳复性基质,使用Ni,‘树脂进行一步纯化和复性,咪哇梯度洗脱纯化蛋白。使用高效体积排阻色谱分析复性效率。纯化的蛋白与NADPH和视黄醛37℃孵育,5林C,8柱检测视黄醇的生成,测定纯化蛋白催化视黄醛还原反应活性。对检测出视黄醛还原反应催化活性蛋白使用双倒数法测定催化反应的KM值和Vmax值。 3.应用哺乳动物细胞蛋白表达系统对NRDR进行表达和功能分析 使用哺乳动物细胞Gateway蛋白表达系统对获得的。DNA片段编码区进行表达。首先使用attB重组位点修饰编码区引物,获得删除和不删除PISI定位信号的NRDR和sNRDR编码区片段。然后将attB重组位点修饰的编码区与供体质粒pDONR201进行BP重组反应,构建带有NRDR和sNRnR编码区的Gatew叮系统人门克隆(En仰elone)。扩增菌体,纯化质粒,将人门载体与哺乳动物细胞蛋白表达载体进行LR重组反应。将NRDR和sNRDR编码区构建到pDES犯6和pDES巧3载体中,以表达出N一端6xHis一tag融合蛋白和N一端GFP融合蛋白。应用阳离子转染试剂将pDES孔6重组质粒转染Hela细胞,进行Westem印迹分析检测蛋白表达。将转染后的细胞匀浆与NADpH和视黄醛37℃孵育,5林C,8柱检测视黄醇的生成,测定表达蛋白催化视黄醛还原反应活性。对pDEST53重组质粒转染后细胞进行过氧化氢酶免疫荧光染色和DAPI复染,使用荧光显微镜确定NRDR和sNRDR蛋白在细胞内的定位。结果 1.克隆NRDR及其剪切体的全长。DNA 经Blastu比较得知全长为1261bp的eDNA与GenBank登录的人过氧化物酶体的短链乙醇脱氢酶eDNA(peroxisomal short一ehain deohol dehydro-genase,SCAD一SRL,1258bp,BCoo3olg)几乎完全一致;与最初所报人NRDR的1325bp eDNA(AB045131)相比,编码区完全一致;而1003bp eDNA为一新的亚型序列,与126互bP oDNA相比在编码区缺少连续的258bp序列,其它完全一致,因此,我们将10O3bp eDNA以NADp一dependent retinol dehy枷-genase/reduetase short isoform(sNRDR)登录GenBank数据库(AY07 1856)。人NRDR的基因位于14号染色体长臂,整个基因序列为52638 bp,含有8个外显子和7个内含子。sNRDR是由(本文来源于《中国医科大学》期刊2004-04-01)
视黄醇脱氢酶论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
目的:通过研究银屑病患者皮损处真皮间充质干细胞(DMSCs)中磷脂酶C-β4(PLCB4)和视黄醇脱氢酶(RDH)10mRNA的表达水平,进一步探讨银屑病发病的细胞及分子机制。方法:对24例寻常性银屑病(PV)患者和22例正常人皮肤DMSCs进行分离培养,流式细胞术进行细胞表型鉴定,实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)测定PLCB4和RDH10 mRNA表达水平。结果:PV组与正常对照组DMSCs形态无差异。PV组患者DMSCs中PLCB4 m RNA的表达水平是正常对照组的3.35倍,RDH10 mRNA的表达水平是正常对照组的1.17倍。结论:银屑病患者DMSCs中PLCB4和RDH10 m RNA表达均增高,可能影响相关信号通路,进而对银屑病发病产生影响。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
视黄醇脱氢酶论文参考文献
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