导读:本文包含了转酰胺基酶复合物论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:复合物,磷脂,酰胺,肌醇,标记,论文,TAP。
转酰胺基酶复合物论文文献综述
朱咏华,赵李剑,唐冬英[1](2006)在《利用TAP标记分析酵母糖基磷脂酰肌醇转酰胺基酶复合物》一文中研究指出糖基磷脂酰肌醇(GPI)转酰胺基酶复合物将GPI脂连接到新合成的蛋白质上,在酵母中包括GAA1,GPI8,GPI16,GPI17,CDC91五种亚基,皆为必需基因.采用含TAP标记转酰胺基酶亚基的酵母细胞株,利用TAP法在自然状态下提取、纯化分离蛋白复合物的优势,鉴定与靶蛋白相关联的蛋白.对Gp i8p,Gp i16p,Gp i17p进行了研究.实验结果表明,酵母只含一个拷贝的Gp i8p,Gp i16p,Gp i17p亚基,为进一步研究转酰胺基酶复合物的功能和作用机制提供了线索.(本文来源于《长沙理工大学学报(自然科学版)》期刊2006年01期)
朱咏华[2](2002)在《Gpi17p—一酵母糖基磷脂酰肌醇(GPI):蛋白质转酰胺基酶复合物亚基的功能研究》一文中研究指出很多高等和低等真核生物的糖蛋白是以糖基磷脂酰肌醇(GPI)锚定的方式被连接在质膜上。GPI化前体蛋白在依附于膜的核糖体上合成,当其易位穿过内质网(ER)膜后,被GPI:蛋白质转酰胺基酶(GPIT)识别,GPIT在移走其羧基端GPI信号序列的同时将GPI分子连接至新生成的氨基酸位点上。GPIT催化的这一反应为GPI化蛋白生物合成的最后一步,也是关键的一步。此翻译后修饰过程保证了这类蛋白质进入出自于ER的转运囊泡,再被传送至细胞表面。 GPI化蛋白对酿酒酵母的生长来说是必需的。酵母中GPIT为一膜蛋白复合物,已知至少为四聚物:Gaalp(约68kDa),Gpi8p(约45kDa),Gpi16p(约65kDa)及Gpi17p(约61kDa)。这四种成分对CPIT的功能都是必需的。目前,除了GPI8外,GAA1,GPI16和GPI17在已知功能的蛋白质中未发现其同系物,其功能尚不可知。本文为了阐明GPI17的功能,进行了一系列遗传学和生物化学实验,取得如下结果: 1.对Gpi17p可能的叁个保守区进行了PCR随机诱变,并最终获得显性负性等位基因: 1)组建了Gpi17p突变体质粒库,其所含质粒数约为100000。从总共8000个菌落中进行筛选,得到强的显性负性等位基因25个,极强的3个(分别在第二个和第叁个保守区)。测序结果表明得到了点突变。 2)生长曲线的测定表明,过表达Gpi17p对正常酵母细胞不致死,而只有显性负性突变体的过表达才会导致酵母细胞不能生长。 3)FOA(5-氟-乳清酸)处理突变体细胞表明,得到的显性负性突变体不是细胞中铜抗性基因突变的产物,其确为GPI17突变引起。 2.对获得的显性负性突变体进行了生物化学分析,以探明GPI17的功能: 胁静农业大学稼士学泣裕艾 门在突变的帅门、存在下,对细胞进行放射标记分析发现,细胞中有 自由的GPI脂积累,同时细胞中没有新的脂类产生。这表面GPi 17P与OPI生物 合成无关,而与蛋白质的 GP化有关。 2)测定过表达了突变GPi 17P细胞的存活曲线,并确定了培养介质中诱 导物铜离子的适宜浓度。 3)蛋白质印迹分析表明,在突变 GPi 17P存在下,有未成熟 Gas1P的积 累,表明存在蛋白质阶 I化缺陷。 4)过表达突变Gpi 7p,阻滞了h。1卜v易位,因此我们判断Gpil7p很可 能是具有蛋白质易位功能的GP’l’成分。 5)在6PI&活性位点突变体中没有这种州滞G。s…易位的效应产生。(本文来源于《湖南农业大学》期刊2002-10-15)
转酰胺基酶复合物论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
很多高等和低等真核生物的糖蛋白是以糖基磷脂酰肌醇(GPI)锚定的方式被连接在质膜上。GPI化前体蛋白在依附于膜的核糖体上合成,当其易位穿过内质网(ER)膜后,被GPI:蛋白质转酰胺基酶(GPIT)识别,GPIT在移走其羧基端GPI信号序列的同时将GPI分子连接至新生成的氨基酸位点上。GPIT催化的这一反应为GPI化蛋白生物合成的最后一步,也是关键的一步。此翻译后修饰过程保证了这类蛋白质进入出自于ER的转运囊泡,再被传送至细胞表面。 GPI化蛋白对酿酒酵母的生长来说是必需的。酵母中GPIT为一膜蛋白复合物,已知至少为四聚物:Gaalp(约68kDa),Gpi8p(约45kDa),Gpi16p(约65kDa)及Gpi17p(约61kDa)。这四种成分对CPIT的功能都是必需的。目前,除了GPI8外,GAA1,GPI16和GPI17在已知功能的蛋白质中未发现其同系物,其功能尚不可知。本文为了阐明GPI17的功能,进行了一系列遗传学和生物化学实验,取得如下结果: 1.对Gpi17p可能的叁个保守区进行了PCR随机诱变,并最终获得显性负性等位基因: 1)组建了Gpi17p突变体质粒库,其所含质粒数约为100000。从总共8000个菌落中进行筛选,得到强的显性负性等位基因25个,极强的3个(分别在第二个和第叁个保守区)。测序结果表明得到了点突变。 2)生长曲线的测定表明,过表达Gpi17p对正常酵母细胞不致死,而只有显性负性突变体的过表达才会导致酵母细胞不能生长。 3)FOA(5-氟-乳清酸)处理突变体细胞表明,得到的显性负性突变体不是细胞中铜抗性基因突变的产物,其确为GPI17突变引起。 2.对获得的显性负性突变体进行了生物化学分析,以探明GPI17的功能: 胁静农业大学稼士学泣裕艾 门在突变的帅门、存在下,对细胞进行放射标记分析发现,细胞中有 自由的GPI脂积累,同时细胞中没有新的脂类产生。这表面GPi 17P与OPI生物 合成无关,而与蛋白质的 GP化有关。 2)测定过表达了突变GPi 17P细胞的存活曲线,并确定了培养介质中诱 导物铜离子的适宜浓度。 3)蛋白质印迹分析表明,在突变 GPi 17P存在下,有未成熟 Gas1P的积 累,表明存在蛋白质阶 I化缺陷。 4)过表达突变Gpi 7p,阻滞了h。1卜v易位,因此我们判断Gpil7p很可 能是具有蛋白质易位功能的GP’l’成分。 5)在6PI&活性位点突变体中没有这种州滞G。s…易位的效应产生。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
转酰胺基酶复合物论文参考文献
[1].朱咏华,赵李剑,唐冬英.利用TAP标记分析酵母糖基磷脂酰肌醇转酰胺基酶复合物[J].长沙理工大学学报(自然科学版).2006
[2].朱咏华.Gpi17p—一酵母糖基磷脂酰肌醇(GPI):蛋白质转酰胺基酶复合物亚基的功能研究[D].湖南农业大学.2002