突变Ectodysplasin-A1对牙源性细胞生物学影响的研究

论文摘要

目的:本研究通过对牙源性细胞转染突变EDA1,探讨突变EDA1对牙源性上皮细胞（LS8细胞）及牙髓干细胞（DPSCs）增殖和细胞周期的影响,为进一步阐明突变EDA1导致先天缺牙的致病机制提供理论依据。方法:LS8细胞及DPSCs常规传代培养于含10%胎牛血清的DMEM培养基中,0.25%胰酶+EDTA消化细胞传代。转染野生型及突变型EDA1质粒及空载体质粒,将实验分组为:野生型EDA1组（Wt）、单纯型突变EDA1各组（A259H、R334H和S374R）、综合征型突变EDA1组（XLHED）和空载体pCR3对照组（pCR3）。MTT法检测LS8细胞及DPSCs各组细胞的增殖活性。流式细胞术检测LS8细胞及DPSCs各组的细胞周期分布。应用SPSS 21.0软件进行统计分析,单因素方差分析检验各组之间的差异,P值设定为0.05。结果:1.MTT实验中,Wt组LS8细胞增殖活性升高;第72小时,与pCR3组比较,差异具有显著性（P<0.05）;第96小时,与XLHED组及pCR3组比较,差异具有显著性（分别为P<0.05;P<0.01）。单纯型突变EDA1各组（A259E组、R334H组和S374R组）分别与Wt组、XLHED组和pCR3组比较均未见显著性差异（P>0.05）。2.细胞周期实验中,与Wt组及单纯型突变EDA1各组（A259E组、R334H组和S374R组）比较,XLHED组LS8细胞在G0/G1期分布比例显著增加（P<0.05）,在S期细胞分布比例显著降低（P<0.01）。3.DPSCs细胞增殖及细胞周期实验中,各组间比较均未见显著性差异（P>0.05）。结论:1.野生型EDA1较综合征型突变EDA1促进LS8细胞的增殖;2.与野生型及单纯型突变EDA1比较,综合征型突变EDA1将LS8细胞阻滞于G0/G1期,并降低S期细胞分布比例;3.EDA1对DPSCs增殖及细胞周期均未见明显作用。

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文章来源

类型: 硕士论文

作者: 刘博宇

导师: 郭长军,沈文静

关键词: 先天缺牙,牙源性上皮细胞,牙髓干细胞

来源: 河北医科大学

年度: 2019

分类: 基础科学,医药卫生科技

专业: 生物学,基础医学

单位: 河北医科大学

分类号: R329.2

总页数: 51

文件大小: 2430K

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