导读:本文包含了房水内皮素论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:青光眼,内皮素,细胞,小梁,基质,原发性,白内障。
房水内皮素论文文献综述
向艳[1]（2010）在《内皮素-1在小梁网房水流出通道中的作用及机制研究》一文中研究指出青光眼(glaucoma)是一组以视神经受损和视功能损害为共同特征的不可逆致盲眼病。病理性眼压(Introcular Pressure, IOP)升高是青光眼视神经受损的最主要危险因素。研究表明小梁网是房水(Aqueous humor, AH)流出的最关键部位,小梁网细胞外基质堆积,吞噬功能受损、小梁网细胞骨架的重构导致小梁网细胞形态、韧性、强度、细胞间黏附性改变等,是房水阻力增加、病理性眼压升高的主要原因。内皮素-1(endothelin-1, ET-1)是一种小分子生物活性多肽,在调控血管舒缩、细胞增殖、分化等方面发挥重要作用。同时,ET-1还是一种强大的促纤维化因子,在肾、肺和心肌细胞外基质重构和纤维化方面扮演重要的角色,另外,ET-1通过活化Rho激酶导致血管内皮和肺上皮细胞等细胞骨架的重构。ET-1还是重要的促炎和促氧化应激因子,可以促进细胞分泌其他因子如ICAM-1,TNF-α,IL-1、IL-6等及过氧化物等,介导炎症和氧化应激反应。最近,研究表明原发开角型青光眼(primary open angle glaucoma, POAG)、正常眼压青光眼(NormalTension Glaucoma, NTG),色素剥脱综合症患者和青光眼动物模型房水中的ET-1水平比正常明显升高,认为ET-1与青光眼发病密切相关。ET-1作为促纤维化、促氧化应激和细胞骨架调节因子,在小梁网的细胞外基质合成、吞噬功能、细胞骨架重构方面的作用尚不清楚。本研究拟通过以下四部分的研究系统观察ET-1对小梁细胞功能的影响：1.ET-1对体外培养人小梁网细胞(human trabecular meshwork cells, HTMCs)的细胞外基质----纤维连接蛋白(fibronectin, FN)、Ⅳ型胶原(typeⅣcollagen, ColⅣ)表达的影响,及ET-1对灌注培养人眼前段小梁网组织中FN、ColⅣ表达及眼压的影响；2.观察CTGF在ET-1促HTMCs合成FN、ColⅣ中的作用；3.观察ET-1对HTMCs吞噬功能的影响；4.观察ET-1对HTMCs细胞骨架蛋白F-actin的表达及重构的影响。以期探明ET-1在调控小梁网房水流出的作用及其分子机制,为POAG降眼压治疗提供新的理论依据。第一部分：ET-1对小梁网FN和Ⅳ型胶原表达的作用研究目的：1.观察ET-1及ET受体(ETR)拮抗剂对体外培养人小梁细胞(HTMCs)中纤维连结蛋白(FN)和Ⅳ型胶原(ColⅣ)表达的影响。2.观察ET-1对灌注培养人眼前段小梁网组织中FN、ColⅣ表达及眼压的影响。方法：1.体外培养HTMCs,并用抗神经元特异性烯醇酶(neurone specific enolase, NSE)、纤维连结蛋白(fibronectin, FN)、层粘连蛋白(laminin, LN)、Ⅷ因子相关抗原(FactorⅧrelated antigen, FⅧRag)免疫组织化学染色鉴定HTMCs。2.ET-1及ETR拮抗剂对体外培养HTMCs中FN、ColⅣ表达的影响：取传3代HTMCs,①观察不同浓度ET-1对HTMCs中FN和ColⅣ表达的影响,实验分为4组：对照组(0 mol／L ET-1)；ET-1低剂量组(10-9 mol／L)；ET-1中剂量组(10-8mol／L)；ET-1高剂量组(10-7mol／L),各组细胞分别孵育72h后,Weston-blot检测FN、ColⅣ的表达；②观察ETR拮抗剂对HTMCs中FN,ColⅣ表达的影响,实验分为4组：对照组；ET-1组干预组(10-7mol／L ET-1)；ETAR拮抗剂干预组(10-7mol／L ET-1+10-7mol／L BQ123)：ETBR拮抗剂干预组(10-7 mol／L ET-1+10-7mol／LBQ788),各组细胞分别孵育72h后,免疫荧光染色、Weston-blot检测FN、ColⅣ的表达。3.ET-1对灌注培养人眼前段小梁网组织FN和ColⅣ表达及眼压的影响：①建立人眼前段灌注培养模型；②取人眼(n=3对)灌注培养24h,记录基线眼压,然后分为对照眼(左眼),ET-1干预眼(右眼)；对照眼给予DMEM灌注培养,ET-1干预眼给予10-7mol／L ET-1灌注培养,记录干预后不同时点(6h,12h,18h,24h,30h,36h,42h,48h,54h,60h,66h,72h)对照眼和干预眼眼压；72h后人眼前段行4%多聚甲醛固定,石蜡切片,免疫荧光检测人眼小梁网组织中FN、ColⅣ的表达。结果：1.体外培养HTMCs呈NSE、FN、LN阳性表达,FⅧRag阴性表达,体外培养成功。2.ET-1及ETR拮抗剂对体外培养HTMCs中FN和ColⅣ表达的作用：①10-9～10-7mol／LET-1干预后HTMCs中FN表达上调,呈剂量依赖性,差异有统计学意义(P<0.01)；10-8～10-7mol／L ET-1干预后HTMCs中ColⅣ表达明显上调,差异有统计学意义(P<0.01)；②给予ETAR拮抗剂BQ123后,与ET-1组相比,HTMCs中FN、ColⅣ的表达降低(P<0.05)；但给予ETBR拮抗剂BQ788后,HTMCs中FN、ColⅣ的表达无明显变化(P>0.05)。3.ET-1对灌注培养人眼前段小梁网组织中FN和ColⅣ表达及眼压的影响：①10-7mol／L ET-1干预灌注培养的人眼前段后,小梁网组织中FN和ColⅣ表达和分布明显增多。②正常人眼前段基线眼压波动在15～20mmHg左右,对照眼基线眼压分别为：15,18,20mmHg,ET-1干预眼基线眼压分别为16,19,19mmHg,给予ET-1干预后眼压升高,72h后眼压分别为24,26,27mmHg,明显高于对照眼眼压16,19,20mmHg。结论：1.ET-1能够促进体外培养HTMCs中FN、ColⅣ的表达,其作用是通过激动ETAR起作用的。2.ET-1能够促进体内灌注培养人眼前段小梁组织中FN、ColⅣ的表达,并导致灌注培养模型眼眼压增高。第二部分：CTGF在ET-1促小梁细胞FN和Ⅵ胶原表达中的作用研究目的：观察结缔组织生长因子(connective tissue growth factor, CTGF)在ET-1促HTMCs合成FN和ColⅣ中的作用方法：取传叁代HTMCs①观察不同时间点ET-1对小梁细胞CTGF、FN和ColⅣmRNA的影响。实验分为4组：正常对照组、24h干预组,48h干预组,72h干预组,给予10-7molET-1干预HTMCs,于不同时间点收集细胞,用RT-PCR观察CTGF、FN和ColⅣmRNA的变化。②设计并合成4条CTGF反义寡核苷酸(CTGF-ASDON)序列,转染传叁代培养人HTMCs,RT-PCR检测其干扰效率,选择效果最有效的CTGF-ASDON序列进行后续实验。③观察CTGF-ASDON在ET-1促HTMCs中FN和ColⅣ表达的影响：选择传叁代培养HTMCs,随机分为5组,A：正常对照组(单纯DMEM)、B：ET-1干预组(DMEM+10-7mol ET-1)、C：单纯CTGF-ASDON组(DMEM+脂质体+100nmol／LCTGF-ASDON)、D组：脂质体对照组(DMEM+脂质体)、E组：CTGF-ASDON+ET-1组(DMEM+10-7molET-1+脂质体+100nmol／LCTGF-ASDON),转染24h后收集细胞,提取细胞总蛋白,Western-blot检测CTGF、FN和ColⅣ的表达。结果：①给予ET1后,HTMCs中CTGF、FN和ColⅣmRNA水平较对照组明显上调(P<0.01),CTGFmRNA水平在48h达到高峰,FN和ColⅣmRNA在72h达到高峰,(P<0.01)。②合成CTGF-ASDON序列转染HTMCs后,CTGF-ASDON1干扰效率最佳,能下调CTGFmRNA水平达40%。③CTGF-ASDON+ET-1组与ET-1组相比,HTMCs中FN和ColⅣ表达明显降低(P<0.05)结论：下调CTGF后可减少ET-1促进HTMCs中FN、ColⅣ的表达,CTGF是ET-1促HTMCs合成FN和ColⅣ的重要的下游信号分子。第叁部分ET-1对体外培养人小梁细胞吞噬功能的作用研究目的：观察ET-1及ETR拮抗剂对体外培养HTMCs吞噬功能的影响。方法：取传3代培养的HTMCs,①观察HTMCs吞噬动力学：HTMCs与直径0.5μm荧光标记的乳胶微粒共孵育0、4、8、12、24、48、72h,荧光显微镜下动态定量观察吞噬乳胶颗粒数。②观察不同浓度ET-1对HTMCs吞噬功能的影响：实验分为四组,对照组；ET-1低剂量组(10-9mol／L)；ET-1中剂量组(10-8 mol／L)；ET-1高剂量组(10-7mol／L),·与0.5μm乳胶颗粒共孵育24h后观察各组HTMCs吞噬乳胶颗粒数。③观察ETR拮抗剂对吞噬功能的影响：实验分为4组,对照组；ET-1组；ETAR拮抗剂组(ET-1+10-7mol／L BQ123)；ETBR拮抗剂组(ET-1+10-7mol／L BQ788),其中ET-1的浓度为10-8 mol／L,并与0.5μm乳胶颗粒共孵育24h,观察各组HTMCs吞噬乳胶颗粒数。结果：①HTMCs吞噬动力学示：HTMCs与乳胶颗粒共孵育4h时细胞后可见明显的吞噬颗粒,随时间延长吞噬微粒数明显增多,24h吞噬微粒密度最佳,48h吞噬微粒达到饱和,细胞形态改变；24h是实验观察的最佳时点。②加入10-9～10-7mol／LET-1干预后,HTMCs吞噬乳胶微球数明显减少,呈浓度依赖性(P<0.05)；③给予ETR拮抗剂干预后：ETAR拮抗剂组吞噬颗粒较ET-1组明显增多(P<0.05),而ETBR拮抗剂组与ET-1组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论：ET-1能抑制体外培养的HTMCs吞噬能力；ET-1主要通过ETAR来发挥其抑制吞噬作用。第四部分ET-1对体外培养人小梁细胞骨架蛋白F-actin的作用研究目的：观察ET-1对HTMCs细胞骨架蛋白F-actin表达的影响。方法：取培养3代HTMCs,随机分为四组：对照组(0 mol／L ET-1)；ET-1低剂量组(10-9mol／L)；ET-1中剂量组(10-8mol／L)；ET-1高剂量组(10-7mol／L),ET-1处理72h后,收集细胞,提取细胞总蛋白,应用Western-blot方法检测HTMCs中骨架蛋白F-actin的表达,并用FITC-phalloidin荧光探针观察F-actin在HTMCs内的分布。结果：①ET-1作用后HTMCs中F-actin表达明显增高,在10-9～10-7mol／L浓度范围内呈剂量依耐性(P<0.05)；②荧光探针示ET-1组HTMCs中F-actin应力纤维和周边肌动蛋白明显增多、浓集,分布紊乱,细胞边缘僵硬锐利；细胞-细胞、细胞-细胞外基质间黏结明显增多。结论：ET-1促进HTMCs中F-actin的表达增多、细胞黏结形成,导致细胞骨架重构。研究总结一、主要研究结果1.本研究证实：ET-1能够通过ETA受体促进体外培养HTMCs中FN及ColⅣ的表达；进一步发现ET-1能够促进灌注培养人眼前段小梁组织中FN及ColⅣ的表达,并导致灌注培养人眼前段的眼压升高。推测ET-1可能在POAG患者小梁细胞外基质堆积和房水流出阻力中发挥重要作用。2.下调CTGF能明显抑制ET-1促HTMCs中FN、ColⅣ的表达,提示CTGF可能是ET-1介导FN、ColⅣ表达的重要下游信号分子。3. ET-1能够通过ETA受体抑制体外培养HTMCs的吞噬功能。4.本研究证实ET-1促进体外培养HTMCs细胞骨架蛋白F-actin的表达,导致细胞骨架重构；二、研究结论ET-1可能通过促进HTMCs细胞外基质(如FN、ColⅣ)表达、细胞骨架重构(如F-actin)和抑制吞噬功能等多方面影响小梁细胞功能,导致房水流出受阻,眼压升高。通过给予ETA受体抑制剂或下调CTGF的表达,可能有望改善小梁细胞整体功能。(本文来源于《华中科技大学》期刊2010-05-01）
蔡维,徐克勤,李国保[2]（2000）在《原发性开角型青光眼患者房水内皮素的检测》一文中研究指出目的探讨内皮素在原发性开角型青光眼发病中的作用。方法应用放射免疫分析法对 ３０例原发性开角型青光眼患者和 １５例对照组房水中 ＥＴ含量进行测定。结果青光眼患者组房水 ＥＴ含量明显高于对照组房水 ＥＴ含量（ Ｐ ＜０． ０５）。结论开角型青光眼患者的眼局部 ＥＴ分泌过多。内皮素可能在原发性开角型青光眼的发病机制中起作用。(本文来源于《临床眼科杂志》期刊2000年06期）
魏敏,符本琪,王延俊,闵鹄秋,陈力[3]（2000）在《原发性开角型青光眼房水内皮素与眼压的相关关系研究》一文中研究指出目的 了解 POAG房水内皮素与眼压有无相关关系。方法 通过放射免疫饱和分析法 (RIA )测定高眼压状态的原发性开角型青光眼 (POAG)及正常眼压的白内障患者房水内皮素 (ET)。结果 POAG组明显高于白内障组 (P <0 .0 1)。两组术前眼压比较 ,P <0 .0 1POAG眼压和 ET回归分析 ,P <0 .0 5 ,白内障组眼压与 ET回归分析 ,P >0 .0 5。结论 POAG眼压与 ET分泌有相关关系 ,眼部 ET水平的改变是机体对眼压增高产生的一种保护性应急反应 ,ET可能与 POAG发病有关。(本文来源于《临床眼科杂志》期刊2000年05期）
房水内皮素论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的探讨内皮素在原发性开角型青光眼发病中的作用。方法应用放射免疫分析法对 ３０例原发性开角型青光眼患者和 １５例对照组房水中 ＥＴ含量进行测定。结果青光眼患者组房水 ＥＴ含量明显高于对照组房水 ＥＴ含量（ Ｐ ＜０． ０５）。结论开角型青光眼患者的眼局部 ＥＴ分泌过多。内皮素可能在原发性开角型青光眼的发病机制中起作用。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
房水内皮素论文参考文献
[1].向艳.内皮素-1在小梁网房水流出通道中的作用及机制研究[D].华中科技大学.2010
[2].蔡维,徐克勤,李国保.原发性开角型青光眼患者房水内皮素的检测[J].临床眼科杂志.2000
[3].魏敏,符本琪,王延俊,闵鹄秋,陈力.原发性开角型青光眼房水内皮素与眼压的相关关系研究[J].临床眼科杂志.2000
论文知识图
